脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)

1、脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2） -直揭动脉粥样斑块稳定性,目 录,脑卒中分类,流行病学特点,脑卒中明显存在四高现象： 高发病率：根据统计中国每年发生卒中病人达200万，发病率高达120/10万； 高死亡率：中国每年卒中病人死亡120万； 高致残率：现幸存中风病人700万，其中450万病人不同程度丧失劳动力和生活不能自理，致残率高达75%； 高复发率：我国脑中风病人出院后易再复发，每复发一次，加重一次，第一年的复发率是30%，第五年的复发率高达59%；,流行病学特点,随着他汀类药物以及药物洗脱支架的临床应用，冠状动脉粥样硬化性疾病的发病率和致死率明显下降。 每年全世界仍有大约有2千万人死于急

2、性心血管事件，而且大部分人没有前驱症状，现有的诊断技术难以在心血管事件前发现受害者。 导致急性心血管事件的主要原因是动脉粥样硬化（AS）斑块破裂和血栓形成，后者取决于AS斑块的不稳定性，即易损性（vulnerability）。 易损斑块的基础和临床研究已成为近年来AS领域中的研究热点。,易损斑块,易损斑块 主要包括破裂斑块、侵蚀性斑块和部分钙化结节性病变。斑块内炎症是引起斑块不稳定的关键因素;易损斑块变成罪犯斑块是ACS发病的共同机制。,易损斑块概念的临床意义 陷阱 冠脉粥样硬化是一种节段性或局部的疾病，只需要简单地用冠脉搭桥或PCI处理 真相 斑块稳定性的临床意义远大于斑块的大小 病人常见到

3、不止一个易损斑块 系列IVUS研究发现许多人有不止一个破裂斑块 血管重建不能解决所有问题,脑卒中与Lp-PLA2,目 录,动脉粥样硬化（AS）与炎症,Ross R. Atherosclerosis - an inflammatory disease. N Engl J Med 1999;340(2):115126. Chisolm GM, Steinberg D. The oxidative modification hypothesis of atherogenesis: an overview. Free Radic Biol Med 2000;28:1815-1826.,动脉粥样硬化是一

4、种过程性的炎症反应疾病，而斑块的破裂是一个急性的发病过程 炎症反应直接作用于粥样斑块的形成和破裂 炎症反应标志物可帮助 预测心脑血管事件的风险,来源：生命时报 2011年2月15号 第09版,现有筛查方法,A 内皮损伤的指标: 粘附分子：ICAM-1、VCAM-1、E-selectin、PECAM-1、内皮因子、粘蛋白等；细胞因子：IL-6、IL-8、TNF-、 ET-1等； B 炎症指标： hsCRP、WBC、血清淀粉样蛋白A； C 凝血因子： vWf、t-PA、PAI-1、FVII、FV、凝血素、纤维蛋白溶酶原、纤维蛋白原、D-二聚体等； D 脂代谢指标：ApoE、ApoB、LPL、Lp(

5、a) 、sd-LDL、ox-LDL、ox-Lp(a)、CETP、RBP4、pre-1-HDL等。,颈动脉超声，造影、CT-CTA、DSA、MRA等,A 脉搏波传导速度（PWV）：反映动脉僵硬度的早期敏感指标，是AS性CV事件的独立危险因素。 B 颈总动脉内中膜厚度（C-IMT）：有研究显示C-IMT是 CV事件危险性的独立预测指标。 C 踝臂指数（ABI）：踝部动脉收缩压和双侧肱动脉收缩压的最高值之比，冠状动脉狭窄程度越重，ABI值越低，对冠状动脉疾病的严重程度有较好预测价值。 D 多排螺旋CT冠状动脉钙化积分（CAC）：用于冠状动脉钙化的定性定量分析，明确钙化的部位、数目、体积及密度，对PC

6、A的筛查有重要意义。,现有筛查方法,遗传指标能够为临床提供在症状出现之前，或在造成不可逆器官损害之前就能做出诊断的可能，其发生异常早于生化指标、动脉功能和结构的改变、并能够对患者的预后及治疗反应进行评估,PCA,现有筛查方法,PCA筛查方法-遗传指标,易感基因,易感基因：在适宜的环境刺激下能够编码遗传性疾病或获得疾病易感性的基因,应用基于候选基因的关联分析和基于全基因组的连锁分析和关联分析策略 发现了数十个冠心病相关基因易感等位基因，如ApoE基因的E4，MEHFR基因的C677T，ACE基因的DD，ApoB基因的GG，PAI1基因的4G/5G等 相继报道了多种易感位点和区域，如9q21.3、

7、2q36.3、6q25.1、16q23 、12p12.1等区域。 对心血管疾病预警、高危人群的筛查和预测、临床早期诊断、新药研发具有重要的科学价值,DNA甲基化,最早发现的表观遗传修饰方式之一； 发生在CpG二核苷酸上对胞嘧啶的共价修饰，由DNA甲基化转移酶 （DNMT）介导； 基因组DNA 甲基化模式改变会直接或间接抑制基因转录，影响基因表达。,全基因组DNA甲基化分析、特异基因DNA甲基化分析； 发现DNA甲基化谱的改变是As的早期标志物，亦可能是As形成的原因； 基因组甲基化水平的升高或降低与CVD的发生尚存在争议； 某些特异基因的甲基化水平与CVD密切相关，如ESR1（雌激素受体）、E

8、SR2（雌激素受体）,蛋白质组：一个细胞或组织中基因组所表达的全部蛋白质 研究： 对蛋白质表达模式的研究 蛋白质功能模式的研究 核心技术：双向凝胶电泳(2-DE)、质谱分析,“差异”蛋白质组学，即筛选和鉴定不同种类、不同状态或不同时期下各样本之间蛋白质组中蛋白质组成的变化-寻找疾病特异性蛋白。 发现心肌梗死、高血压、心力衰竭等心血管疾病中均存在蛋白质组的变化，鉴定几百种病理状态下的心血管疾病特异性蛋白质，为CVD的早期诊断、疗效监测和预后判断提供了依据。 已建立心肌蛋白质组2-DE数据库、人类心脏蛋白质联合二维电泳数据库等血清/血浆蛋白质组-为蛋白质组研究进入临床奠定基础。,蛋白质组,微小核糖

9、核酸 (microRNA, miRNA),Univariate and multivariate logistic regression analyses of serum miRNAs for cardiovascular risk stratification,成像技术,心肌酶检测,hs-CRP,血脂常规检测,心肌梗死发生后才会出现异常，因而失去了预防和监测意义。,1.适用于特点部位，量评估斑块的活跃程能力较差；2.服用造影剂易造成并发症，CT造成辐射伤害；3.费用高不适用于普检、预防和监测。,易受急性疾病（包括感冒、细菌感染以及代谢综合症等）干扰，缺乏对血管炎症检测的特异性。,无法预警动

10、脉粥样斑块的炎症程度，无法针对急性卒中给予有效的检测。,传统预测方法及其局限性,一种独立有效的炎症标志物,Lp-PLA2,脂蛋白磷脂酶A2（Lp-PLA2）分子量45k Da，钙独立的脂肪酶，由441个氨基酸组成 主要由巨噬细胞分泌 主要存在于低密度脂蛋白（80%）和高密度脂蛋白（20%）中 直接参与导致动脉粥样硬化的血管炎症反应,Asano K, Okamoto S, Fukunaga K, et al. Cellular source(s) of platelet-activating-factor acetylhydrolase activity in plasma. Biochem B

11、iophys Res Commun 1999;261:511-514. Nakajima K, Murakami M, Yanoshita R, et al. Activated mast cells release extracellular type platelet-activating factor acetylhydrolase that contributes to autocrine inactivation of platelet-activating factor. J Biol Chem 1997;272:19708-19713.,Lp-PLA2特点,Lp-PLA2的致As

12、作用,Lp-PLA2可水解脂蛋白Sn-2位含有多不饱和脂肪酰基的氧化卵磷脂（ox-PC），生成促炎因子：溶血卵磷脂（lyso-PC）和氧化型游离脂肪酸（ox-FFA），两者促发了一系列促As反应。,Lp-PLA2水解动脉内膜上的ox-PC,溶血卵磷脂(lyso-PC)和氧化型游离脂肪酸(ox-FFA),刺激粘附因子和细胞因子的产生，导致单核细胞向内膜聚集,单核细胞衍生成巨噬细胞，并吞噬ox-LDL变成凋亡的泡沫细胞,巨噬细胞和泡沫细胞聚集形成动脉斑块，内皮功能障碍诱导细胞凋亡,斑块破裂，产生、释放更多的Lp-PLA2,1,2,3,4,5,6,Lp-PLA2反映AS严重程度,Source: Da

13、vidson MH. Jones PH. Am J Card Suppl 2008,Lp-PLA2与心脑血管疾病关系研究,心血管风险预测,预后,临床疗效评估,32项前瞻性研究的meta分析,风险预测,Lancet 2010 May 1;375(9725):1536-44.,Lp-PLA2活性、质量与心血管事件相关, 且与动脉粥样硬化脂质水平（non-HDL-C、apoB、HDL-C、TG）相关。,32项研究 n=79036,32项前瞻性研究的meta分析,风险预测,Lp-PLA2质量与活性均与冠心病事件风险有较好的对数线性相关，对于高危人群进行冠心病的风险预测有积极作用。,Lancet 201

14、0 May 1;375(9725):1536-44.,鹿特丹研究,Circulation. 2005；111:570-575,在进行了多变量矫正后，与处于最低四分位数相比，Lp-PLA2活性处于二、三、四分位的： 冠心病的危险度分别增加1.39 、 1.99和1.97； 缺血性脑卒中的危险度分别增加1.08 、1.58和1.97。,风险预测,7983名大于55岁的健康人 跟踪随访：平均历时6.4年,ARIC研究,Stroke. 2009; 40:376-381.,风险预测,传统危险因素（trditional risk factor, TRF）与Lp-PLA2、 hs-CRP 联合可更好地预测中

15、年人群缺血性中风的发生风险,12762名健康中年男、女性 跟踪随访历时6年,ARIC研究,ARIC研究同时发现： 缺血性卒中风险与Lp-PLA2的水平和心脏收缩压紧密相关 高Lp-PLA2、高血压患者发生缺血性卒中的概率是正常人的7倍 Lp-PLA2活性可用于缺血性卒中的风险分级，是一个独立预测缺血性脑卒中的生物标记物,风险率,风险预测,Stroke. 2009; 40:376-381.,冠心病与卒中的预后,Arterioscler Thromb Vasc Biol.2007;27:2463-2469,预后,Lp-PLA2水平四分位分析显示：CVD死亡、 心肌梗死（MI）、冠脉重建术、不稳定心

16、绞痛（UA）住院 或中风的发病率随Lp-PLA2水平上升而逐步显著升高的趋势。 相对于Lp-PLA2水平最低四分位患者，Lp-PLA2水平最高四分位患者的风险率为 1.51。,3766名稳定冠心病患者 跟踪随访：中间值时间4.8年,冠心病与卒中的预后,预后,Lp-PLA2抑制剂的临床研究,研究对象：330名有冠脉血管造影史的患者 研究方法：对患者进行国际化、多中心、随即、双盲、安慰剂对照研究，对符合要求患者按1:1随即分组，一组每日口服160mg darapladib（一种口服Lp-PLA2 直接抑制剂），一组等量安慰剂，持续120月。血管内超声（IVUS）随访中值时间364天，并进行重复IV

17、US检查。,Circulation.2008;118:1172-1182,临床疗效评估,Archives of Internal Medicine, IF=11.579,因Lp-PLA2被认为是中风复发风险的一种强预测因子,因Lp-PLA2被认为是中风复发风险的一种强预测因子,在进行心脑血管疾病的治疗过程中，可以利用 Lp-PLA2的水平监测来评价治疗效果,Lp-PLA2抑制剂可能为心脑血管病的治疗提供 新的靶点,Lp-PLA2抑制剂的临床研究,研究结果：抑制Lp-PLA2的水平可以阻止坏死核心的扩大，从而避免板块的破裂和血栓的形成。,结 论 1,结 论 2,临床疗效指导,临床应用,AACE2

18、012指南指出Lp-PLA2为一种强大而独立的卒中和心血管事件的预测因子，特异性强不受肥胖影响，将Lp-PLA2检测作为一种心脑血管疾病风险分层的重要检查项目,2010AHA/ASA指南推荐Lp-PLA2作为由于炎症或感染导致卒中的风险评估标志物,专家指南及共识,专家指南及共识,ESOC2012指南指出Lp-PLA2 为最新反映动脉粥样硬化斑块破裂及血栓事件的一种高度一致性，精确性的独立风险因子，可作为一种急性动脉粥样硬化血栓复发事件高风险患者的准确风险评估标志物，优于Hs-CRP ACCF/AHA2010指南推荐Lp-PLA2最为新型的血管炎症标志物进行使用 美国FDA建议将Lp-PLA2纳

19、入心血管疾病和脑卒中的检测指标之一,美国AACE明确指出Lp-PLA2水平： 200ng/ml为正常或低风险； 200且223ng/ml为中度风险； 223ng/ml为高度风险。,American Association of Clinical Endocrinologists (AACE) Guidelines for Management of Dyslipidemia and Prevention of Atherosclerosis Endocrine Practice (2012) European Guidelines on cardiovascular disease prevention in clinical practice (version 2012),临床分层,低风险,中风险,高风险,目 录,心血管疾病危险因素 抽烟 高血压 低高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C） 家族性的心血管病史（CAD） 年龄（男性45岁，女性55岁） 心血管疾病极高风险（已确诊为心血管疾病并同时存在以下四个因素）： 多个主要危险因素（尤其是糖尿病） 控制不佳的高危因素（特别是长期抽烟）