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文档简介

1、电泳技术及其应用、电泳原理和分类、SDS-页面电泳技术、电泳聚焦电泳、双向电泳技术、1电泳原理和分类、原理：带电粒子在电场下移动到电的相反电极，并被称为电泳(电泳，EP)。带电粒子在电场中以不同速度移动，到达分离的技术称为电泳技术。电泳分类：1基于支持材料的特性：纸张电泳、粉末电泳、凝胶电泳、边缘电泳2支持材料的设备形式：平面电泳、垂直板电泳、圆周(管)电泳3 pH的连续性：连续pH电泳(无浓缩胶)、不连续pH电泳2丙烯酰胺凝胶电泳，原理：聚丙烯酰胺凝胶由单个丙烯酰胺(Acr)和交联剂N，n-甲基双丙烯酰胺(Bis)加速剂N，N，N-四甲基乙二胺(TEMED)和催化硫酸铵(AP) 其迁移率取决

2、于它拥有的正电荷和分子的大小、形状等因素。分子量与凝胶浓度的关系，SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE):在丙烯酰胺凝胶系统中添加阴离子去污剂十二烷基磺酸钠(SDS)，蛋白质分子的电泳迁移率主要取决于分子量，而不考虑带的电荷和形态。因此，蛋白质分子量可以用SDS-PAGE测定。蛋白质的分子量在15KD-200 KD之间时，电泳迁移率与分子量的对数具有线性关系。浓缩胶和分离胶的浓度和标准蛋白质取决于分子量大小。分离胶溶液pH 8.8，添加分离胶，水密封目的是使分离胶的表面直立，排除气泡。凝胶聚合良好的死因是胶和水层之间形成了明确的界面。分离胶pH 8.8，浓缩胶的制造，安装-胶-注入-电

3、泳工艺-剥离-染色-脱色-凝胶成像-软件处理，三等全焦电泳，原理：等全焦电泳(IEF)利用良性电解质载体形成连续稳定的线性pH梯度，在具有pH梯度缓冲液的电泳槽中如果在高于自己的等电点的环境中，就带着负电向两极移动。游泳移动到自己独特的等电点时，净电荷下降到0，游泳速度下降到0，具有不同等电点的物质最终集中在各自的等电点位置，形成了明确的波段，分辨率很高。在电泳系统中，从阳极到阴极、从pH到高(即环境中从酸到碱)连续生成稳定的pH梯度时，系统中的各种蛋白质分子会根据每个pI值和在场oH值的差异带来正电或负电。等电聚焦电泳模式、4双向电泳、双向电泳(two-dimensional electrophoresis)是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合：等电聚焦电泳(根据pI分离)、SDS蛋白质二维电泳的分辨率和灵敏度都很高，可以分离1000-3000个蛋白质，最多区分11000个蛋白质，pi差异小于01003个pH单位，也可以用于蛋白质分离。二维电泳

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