结核分枝杆菌实验室检测方法ppt课件

1、。结核分枝杆菌的实验室检测方法。分枝杆菌是一种细长的、略弯曲的有时分支的杆菌，具有耐酸性，也称为抗酸杆菌，其体内含有分枝杆菌酸，细胞壁中含有大量脂质，这与分枝杆菌的染色、抗性和致病性密切相关。该属已鉴定出70多种细菌，可分为三类：结核分枝杆菌、非典型分枝杆菌和麻风分枝杆菌；根据生长速度，可分为三种类型，即慢生细菌、快生细菌和未培养细菌。结核分枝杆菌，即结核分枝杆菌，是人类和动物结核病的病原体，包括结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和结核分枝杆菌。结核分枝杆菌属于生长缓慢的分枝杆菌、非典型分枝杆菌、偶发分枝杆菌，如偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌/脓肿分枝杆菌、胞内分枝杆菌、鸟分枝杆菌、戈登分枝杆菌

2、、甘肃分枝杆菌、玄参分枝杆菌、黄分枝杆菌、土分枝杆菌、草分枝杆菌、草分枝杆菌、黄分枝杆菌、苏加尔分枝杆菌、蟾酥分枝杆菌等。在鸡蛋培养基上可以看到菌落3-5天。大多数其他非典型分枝杆菌是生长缓慢的类型。麻风分枝杆菌和麻风分枝杆菌是麻风病和抗酸杆菌的病原体，但它们比结核分枝杆菌短且厚，两端逐渐变细，抗酸染色均匀，成束或成簇排列，结核分枝杆菌分散且偶尔聚集。它是一种典型的胞内寄生虫，麻风杆菌的胞质是泡沫，称为麻风细胞。它不能在体外培养。世界上大约三分之一的人口感染了结核分枝杆菌，有2000万活动性结核病人，每年出现900万新病例，每秒钟有一人感染结核，每年有300万人死于结核。随着抗结核药物的不断发

3、展以及健康和生活条件的改善，结核病的发病率和死亡率一度大幅下降。20世纪80年代后，由于艾滋病和结核分枝杆菌耐药菌株的出现、免疫抑制剂的应用、药物滥用、贫困和人口流动，世界结核病疫情突然恶化。结核分枝杆菌是一种细长而略弯曲的芽孢杆菌，有时有分枝，无孢子和鞭毛，这是由于衰老或细胞壁含有大量脂质，不易着色，特别是肽聚糖层周围有大量分枝杆菌酸，通常被染成耐酸性。深棕色是红色，背景是蓝色。荧光染料“O”染色、荧光显微镜下橙色、8、培养特征、实验室检测方法、钐染色、罗氏分枝杆菌快速培养、抗原和抗体检测、细胞因子检测、荧光定量聚合酶链反应芯片杂交、病原学、免疫学、分子生物学、涂片镜检。可用于检测疾病的进展

4、，为感染控制提供参考。可以确认培养物为阳性，红色，普通显微镜(高倍)，荧光，黄色或橙色荧光显微镜(低倍)，联合染色：灵敏度高，特异性好，速度快！嘿。抗酸染色的局限性，抗酸染色对分枝杆菌是非特异性的，其他，如诺卡氏菌、红球菌、军团菌、隐孢子虫、等孢菌等。具有抗酸细菌的特点，不能区分结核和非结核分枝杆菌，不能区分活菌和死菌，且敏感性差。一般来说，在1毫升痰中可检测到5000-10000个细菌，而在培养物中可检测到10-100菌。发光二极管荧光显微镜具有成本高、易损坏、功耗大、光源寿命短、显微镜价格昂贵、需要在暗室工作等优点。荧光染色法尚未广泛应用于肺结核痰涂片的诊断。用二极管代替普通光学显微镜的目

5、镜就相当于荧光显微镜。组合式“荧光显微镜”结合金胺O染色在肺结核痰涂片检查中具有一定的应用价值。田斌，等。发光二极管荧光显微镜在基层实验室结核分枝杆菌诊断中的应用评价。实用预防医学，2012年10月，第19卷，第10期，分枝杆菌培养技术，目前结核分枝杆菌培养仍是诊断的金标准，特别是药敏试验结果对指导临床用药和耐药性检测具有重要作用，是鉴别其是否为活菌的可靠方法。1.传统的固态培养法检测结核分枝杆菌的生长需要46周，阳性率只有各种特异性差的分枝杆菌才能生长。为确定是否为结核分枝杆菌，应结合分枝杆菌鉴定和药物敏感性试验。BACTECMGIT960是BD公司引进的一种分枝杆菌快速液体培养技术，是一种

6、操作简便的全自动分枝杆菌培养和药敏鉴定系统。检测阳性样品的平均时间为9天。鉴定和药敏试验的平均时间为4天。阳性样品的检出率约为传统固体培养的10倍。固体培养和液体培养的优缺点。固体培养污染少，易于观察菌落形态。然而，培养时间很长。液体培养：细菌与培养基充分接触，生长迅速，但容易被污染。血清学试验。免疫学检测方法，1。结核菌素试验。任何感染结核分枝杆菌的生物体都会产生相应的致敏淋巴细胞，这些淋巴细胞具有识别结核分枝杆菌的能力。当再次遇到通过皮肤注射的少量结核菌素时，致敏的淋巴细胞将在48-72小时内再次被相同的抗原刺激。活动性肺结核的诊断敏感性高达77。嘿。局限性：假阴性：儿童结核病、老年结核病

7、、免疫缺陷或免疫功能低下患者(如感染艾滋病病毒和接受免疫抑制剂治疗的患者)假阳性：接种卡介苗的人也会产生阳性反应。干扰素释放试验被认为是近十年来结核病诊断史上最重要的成就。这种检测方法的原理是结核感染后在体内长期存在。目前，有两种商业上可获得的方法，即QFT-葡萄糖法和结核杆菌斑点法。结核病更敏感，但QFT-G更特异，但两者都优于结核菌素试验，也推荐用于诊断潜伏性结核病。近年来，核酸扩增技术和杂交分析技术的发展为分枝杆菌的检测、鉴定和药敏试验提供了极大的便利，并将诊断时间从几周缩短到几天。结核病基因诊断技术的研究和应用主要包括聚合酶链反应(PCR)、核酸探针杂交、DNA测序、基因芯片、基因分型

8、等。MDR早期诊断、分枝杆菌分子诊断系统(联合医院)、菌株鉴定、筛选、鉴别诊断、实时荧光聚合酶链反应、基因芯片快速检测平台、22、高效：一个样品可以同时检测结核分枝杆菌和NTM。快速：4周(培养)3小时敏感：10个细菌/反应(结核)；102细菌/反应(NTM)，分枝杆菌核酸检测，功能：结核病快速筛查；结核病/NTM鉴别诊断。23，高效：同时检测17种分枝杆菌(包括结核杆菌)快速：4周(菌株鉴定)6小时敏感：103细菌/反应，检测范围：结核杆菌、胞内、鸟、戈登、堪萨斯、偶然、淋巴结核、浅黄色、土壤等。分枝杆菌菌种鉴定(DNA微阵列芯片法)，24，通量：两种一线抗结核药物(MDR)速度：8周(药物敏感性)6小时敏感性：103细菌/反应。基于rpoB和卡介苗的基因突变，可以快速诊断耐多药结核病。结核分枝杆菌耐药基因检测试剂盒，五种结核病检测方法效果评价，结核病组：1260例，非结核病组：100例，改良罗氏培养，荧光聚合酶链反应，涂片法，MGIT960快速培养，结果比对，点层析，灵敏度和特异性比较，结