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文档简介
1、氯吡格雷抵抗的血小板功能差异和遗传多态性研究,实习生周星,河北北方大学,导师孙斌,309医院实验室,主要内容、1。研究背景2。研究目的3。技术路线和测试方法4。研究特点和创新5。预期结果、研究背景、1。治疗形成的血栓,开放和阻塞血管,恢复冠状动脉灌注溶栓,经皮冠状动脉介入治疗,2。预防新血栓形成、防止血栓扩张、缩小损伤范围、抗凝治疗、抗血小板治疗、冠心病(尤其是ACS)的治疗原则、抗血小板药物抗性、治疗反应性差、血小板旁路途径激活、临床危险因素、基因多态性、依从性差/剂量不足、药物相互作用、药物生物利用度、外部因素、内部因素、抗血小板药物抗性的可能机制、研究内容、氯吡格雷的作用机制、氯吡格雷、
2、氯吡格雷、非活性羧酸衍生物、2-氧代氯吡格雷、腺苷酸环化酶的ADP抑制、磷蛋白肠吸收(50%),肝内代谢(CYP2C19,CYP1A2,CYP2B6),肝内代谢(CYP3A4/5,CYP2B6,CYP2C19,CYP2C9),-,-,细胞色素P450酶(CYP2C 450吸收环节:ABCB1代谢环节:CYP3A4,CYP3A5,CYP2C9,CYP2C19受体环节:P2Y12,GP b/a,与氯吡格雷疗效相关的基因; 首先,遗传多态性与氯吡格雷疗效的差异、相关性、体重、系统和个体化之间的相关性;第二,评估各种血小板功能检测技术并建立行业标准。PAF-100、PL-11、SC-2000,现在验证
3、、比较血小板功能检测方法,血小板功能检测在治疗和预防血栓形成中具有重要价值;然而,现有的血小板功能检测方法、质量和标准还不足以满足临床需要。-2011年7月,AACC和美国心脏病学院在美国亚特兰大联合举办了抗血小板治疗实验室检测和诊断功效研讨会。PL-11血小板功能分析仪采用“自动连续检测法”,直接检测全血中血小板的原始数量,加入引诱剂后继续计数和检测血小板的数量。通过比较加入诱导剂前后血液中血小板的数量、血小板数量的变化和血小板下降的速度,评价和分析PL-11的功能值,建立行业标准。原始血小板数-聚集后的最小血小板数100=MAR%原始血小板数*(原始血小板数-聚集后的最小血小板数=聚集血小
4、板数),sc-2000血小板聚集测试仪原理,该仪器采用光电比浊法在特定的连续搅拌条件下测试血小板聚集:在富血小板血浆(PRP)中加入诱导剂,发生血小板聚集,PRP透过率增加或光浊度的变化转化为电信号的变化,然后计算血小板聚集率。搅拌方式采用国际先进的磁棒搅拌方式。计算公式如下:购买力平价光电电压值-测得的光电电压值聚集率=(1 )100%购买力平价光电电压值-PRP光电电压值,*(购买力平价为血小板贫血浆),技术路线和研究方法,技术路线,目标基因选择,引物设计,冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗,血小板功能试验评价应用氯吡格雷后血小板功能状态(低或正常), 提取全血基因组,-测序*建立用于*聚合酶
5、链反应*分析患者遗传多态性的最佳反应条件,缺血事件的发生:致死性或非致死性心肌梗死、急性或亚急性血栓形成(支架内再狭窄)、不稳定型心绞痛和需要再次住院的中风,*评估基因多态性和氯吡格雷疗效之间的相关性,并建立用于血栓性疾病的抗血小板药物。 *评估血小板功能检测技术的优缺点,选择最佳技术,并建立行业标准。诊断标准、纳入标准、排除标准、先进行血小板功能试验,然后进行基因分析、标本采集、病例数据采集,*一般数据*实验室指标*冠状动脉造影结果*经皮冠状动脉介入术操作、患者临床特征与三甘醇试验结果的相关性,随访6个月。不同临床类型冠心病患者的临床特征,血小板功能与基因多态性的相关性,从同一标本中提取全血基因组进行血小板功能检测,(反应条件的优化),基础因子的测序,多态性与缺血事件的相关性,研究方法,DNA,聚合酶链反应,研究特点及创新,(1)首次将7个靶基因的遗传多态性分为3个环节,包括吸收环节,代谢环节和受体环节, 同时对影响氯吡格雷疗效的因素进行了研究,分析了各目标基因对氯吡格雷疗效的影响权重,并考虑了多基因联合多态性的影响。(2)探索并建立以遗传多态性为核心,综合考虑患者其他临床信息,通过计算风险评分来评价氯吡格雷疗效的评价体系在国内外尚属首次; (3)PL-11血小板分析仪是最新的血小板功能检测技术,采用“自动连续检测”的方
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