天然产物分离材料课件

1、常用天然产物分离材料，中国物理大学，1，学习交换PPT，主要内容，2，学习交换PPT，I，构成硅，硅胶的硅石(SilicaGel)的化学成分为二氧化硅用作分离介质的硅胶的特点是合成多孔硅胶，表面含有硅作为表面化学键基础的硅。这是一种具有丰富微孔结构，表面积高，纯度高，活性高的优良吸附材料。3，学习交换PPT，硅胶的分类，1 .根据粒度，常用分析硅胶基质的直径为5-10米高效制造硅胶，其直径大部分为20-40米2。正负硅正相列大部分是硅胶为柱填料，或硅表面上-CN、-NH3等官能团的耦合相硅列。反相柱填料主要以硅胶为矩阵，在其表面粘接非极性的结合相。连接八叉丝(ODS)称为C18柱。其他常见的倒

2、相柱包括C8，C4，C2，苯基等。4，学习通信PPT，3 .根据含水量将硅胶分为5个等级。等级0% 1、等级5% 2、等级15% 3、等级25% 4、等级38% 5。第五阶段水分含量最高，此时与分布色谱相同。适合极性大的生物碱、酚化合物、有机酸、碳水化合物、氨基酸等组成。5，学习交换PPT，硅胶的特性，硅胶无毒，无味，化学性质比较稳定。除氢氟酸和碱外，不溶于水和各种化学溶剂，物性很稳定。机械强度高，在液相及气相介质上具有很强的吸附特性。硅胶为PH范围(pH18，6)，学习交换PPT，1，正常硅，二氧化硅吸附剂为粉末多孔固体，起氢键吸附作用的组分为硅基底的羟基(吸附中心)，这些羟基形态不同，吸附

3、能力也不同。作用原理，7，学习交换PPT，使用硅，1。计量：按照常面量，通常采取30-70倍于常面量的硅胶；如果很难区分，也可以用100倍的硅胶h。8，学习通信PPT，2 .填料：(1)湿：混合硅胶等体积的溶剂，完全混合成玻璃棒。把柱子底部用棉花钉好，加入约三分之一体积的洗脱剂，打开柱子下的活塞，将均匀的东西一次倒入柱子内。用洗脱剂压缩(添加更多洗脱剂，用双极口或空气泵加压，直到流速稳定)。支柱床压缩到大约9/10体积。)，9，AC PPT学习，(2)干燥方法：连续将硅胶添加到硅柱中，在硅胶填充到适当高度之前轻拍柱的两侧，硅胶不再脱落。10，学习通信PPT，3 .上：(1)湿：用少量溶剂溶解样

4、品后，使用胶头滴管沿色谱柱内壁均匀添加。然后用少量溶剂清洗后添加。(2)干燥法：将要分离的样品用少量溶剂溶解，然后加入少量硅胶，搅拌均匀，然后搅拌溶剂。那么得到的粉末又细心地添加到柱子顶上。完成样品后，应添加空硅胶，保持柱床平整。最好是开闭剂，如果助溶度不好，可以使用大极性溶剂，但要学会少量，11，交换PPT，关于混合溶剂：洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮系统的话，用石油醚混合；如果洗脱剂是氯仿/酒精系统，则用氯仿混合。12，学习交换PPT，4。过柱和收集：溶剂系统：根据TLC选择，初始洗脱液选择样品的Rf值约为0.2。极性较小的乙酸乙酯：石油醚体系极性较大的甲醇：氯仿体系极性较大的甲醇：水：正

5、丁醇：乙酸体系抹布可以添加少量的氨和冰醋酸，如：样品量为10毫克，馏分为1g硅h，0.5毫升；1-2g当量、50g二氧化硅(200-300颈部)、20-50ml馏分。13，学习通信PPT，5。测试： TLC测试：使用更多专用发色剂或紫外线检测。紫外线敏感度一般比有色剂底部高1-2倍左右。您还可以使用HPLC进行其他测试。硅胶可以是粗糙的分段和细分。粗糙的点可以根据化合物极性弱、强的流出顺序分段，但不适合极性大的化合物的细分，因此很容易在极性太大的化合物中吸附苯酚、极性生物碱等死亡。14，学习通信PPT，使用案例，Schisandra是magnoliace AE schis andra schi

6、 Sandra chinensis(Turcz .)Baill。或Schisandra schi Sandra spenanthera Rehd。et wils .的干燥成熟的水果。前者称为五味子，后者称为五味子。敛固，益气生津，补肾宁心功能。主要活性成分为木脂素，从五味子中提取和分离木脂素b，木脂素，a，15，学习通讯PPT，北五味子果实，乙醇热回流提取3次，乙醇提取物，反相硅、反相硅柱填料在硅表面结合非极性组的耦合和相反相柱包括C18、C8、C4、C2和苯基柱等。其中C18 (ODS)是十八烷基硅烷键合硅胶填料，在反相色谱中起着非常重要的作用。18，学习交换PPT，作用原理：分配原理：在水

7、混合有机溶剂中，溶质由流动中溶剂决定，在固定相和流动中，为了形成溶质平衡，在固定相表面吸附的烷基官能团中，与弱极性有机溶剂分子交换。吸附原理：根据稀疏溶剂理论，图1。溶剂膜2。粘接相3。化合物极性端4。化合物非极性末端，19，学习交换PPT，使用：类似于两相硅胶。加载柱：仅使用湿式商品化：使用洗脱剂溶解湿式相溶出系统：甲醇-水系统，ODS分离时化合物按极性强弱的顺序流出。ODS通常用于细分，适合极性化合物的分离，可以从硅胶的薄层板中分离出分离度不好的样品。ODS也可以用于粗糙区段。20，学习通信PPT，2，聚酰胺，氢键吸附原理双色谱理论聚酰胺的应用实例，21，学习通信PPT，1。概述，聚酰胺(

8、polyamide，PA)聚合了聚酰胺，尼龙、尼龙色谱中常用的聚酰胺为尼龙-6(己内酰胺聚合)和尼龙-66(己二酸和己二胺聚合)。亲水性和亲水性，性能优秀，水溶性物质和脂溶性物质可以分离。尼龙11，1010亲水性不好，不能使用水分含量高的溶剂系统。22，学习通讯PPT，概述，聚酰胺色谱可用于分离黄酮、酚、有机酸、生物碱、萜、类固醇、苷、碳水化合物、氨基酸衍生物、核苷酸等化合物，尤其是黄酮、酚、醌特征：类黄酮等物质的色谱是可逆的。分离效果好，可以分离极性相似的类似物，柱层析的样品容量大，适合分离准备。23，AC PPT，氢键吸附原理，苯酚，酸羟基和聚酰胺的羰基与氢键芳硝基，醌等化合物的硝基或羟基

9、(醌)和聚酰胺的游离氨基形成氢键。解吸是通过溶剂分子形成取代原始氢键的新氢键来实现的。黄酮苷元和糖苷的分离，甲醇-水等水溶剂溶出，糖苷先溶出；非极性溶剂溶出后，结果完全相反。24，学习交换PPT，2。双色谱原理，聚酰胺既有非极性脂肪结合，又有极性酰胺结合。如果将水性极性溶剂用作流动相，则聚酰胺是非极性固定相，其色谱行为与反相分配色谱相似，因此糖苷比异烟肼更容易溶出。非极性氯仿-甲醇作为流动相时，聚酰胺作为极性固定相使用，色谱行为类似于两相分配色谱，因此，二野锥比配给体更容易溶出。萜类、类固醇、生物碱、糖类等形成氢键的化合物难以分离的25、学习通讯PPT、3。聚酰胺的应用，聚酰胺柱色谱柱：将颗粒

10、型聚酰胺掺入水中的湿加载柱，非极性溶剂系统使用中成分中的低极性溶剂柱。上图：一般每100毫升的聚酰胺可商用为1.5-2.5g。样品首先溶出溶剂，浓度为20%-30%。如果不能溶于溶剂，则可以使用挥发性有机溶剂溶解，混合在干燥淀粉中，然后减压溶剂蒸发，在主顶湿载。溶出：溶出剂经常使用水将乙醇增加为浓缩乙醇或氯仿、氯仿-甲醇，将甲醇增加为纯甲醇溶出。如果还有未溶出的物质，可以用稀氨和稀甲酸溶液溶出，馏分。26，学习通讯PPT，再生：使用的聚酰胺一般用5%NaOH清洗后水洗。用10%HOAc洗涤，最后用蒸馏中性水洗就可以了。在各种溶剂系统中添加少量酸性或碱，可以克服色谱的拖尾现象，使斑点明显。27，

11、学习通信PPT，一般是扩展系统，28，学习通信PPT，29，学习通信PPT，影响吸附的因素：分子内羟基的数量，位置溶剂与化合物或与聚酰胺的氢键能力大小。溶剂分子与聚酰胺或化合物形成氢键能力越大，聚酰胺对化合物的吸附就越弱。30，学习通信PPT，聚酰胺应用问题(1)洗涤速度慢。用体质提前去除与细粉或硅藻土(1: 2)混合的柱子，用加压或减压的方法克服。(2)混合了小分子量聚酰胺和其他杂质。5用甲醇或10%盐酸预清洗去除。(3)粒度不均匀。安装柱子之前先筛一下。31，学习交换PPT，3。聚酰胺应用实例，醛固酮白叶，70%乙醇回流提取，等量水沉淀整夜提取，减压富集，100毫升水分散用聚酰胺柱120c

12、m，湿安装柱洗涤无黄曲霉毒素反应乙醇-水梯度洗脱，10 乙腈-1%乙酸梯度洗脱，化合物，32，学习交换PPT，hyperin，myricin，quercitrin，槲皮素-3-o-d-d 摘要MCI GEL系列微分离填料是基于三菱化学双离子和Sepabeads大孔吸附树脂设计的，是聚合物基体的分离填料。主要包括以聚苯乙烯苯为基底，以甲基丙烯酸酯为基底的多种系列。可用于离子交换色谱、尺寸排斥色谱、反相色谱和疏水相互作用色谱等。MCI-GEL具有4微米到300微米粒子大小分布的多种产品。35，学习交换PPT，36，学习交换PPT，MCI-GEL逆相填充剂，MCI GEL逆相填充剂中使用的聚合物主要

13、包括聚苯乙烯和聚甲基丙烯酸酯两种气质。37，学习交换PPT，2。MCI-GEL反相填充物特性，吸附量高，颗粒均匀，机械强度好，稳定性好(pH 1-14)，不易破碎，残留物少，预处理方便，疏水表面均匀，在等度或梯度条件下传统的反相分离比反相ODS填料便宜，没有硅的羟基可使用水溶性和非水溶性成分的分离。38，学习交换PPT，3。使用MCI-GEL逆相填料，1)在甲醇、乙醇或丙酮中浸泡色谱填料。(2)充分搅拌均匀柱，用选定溶剂冲洗压缩柱床。3)用多倍柱体积的胃溶剂冲洗柱，直到填料的交联剂被清除干净为止。4)用选定的洗脱溶液平衡和储备柱。5)流动相选择：适用于所有乙腈、甲醇、乙醇、丙酮等及所有酸、碱、

14、盐比例的水溶液。，39，学习交换PPT，MCI再生：一般可以用甲醇再生，在柱子上储存更多，可以用乙腈、丙酮等溶剂再生，特殊情况下可以用一摩尔l/l盐酸或一摩尔l/l的直溶液溶解，最后用水中性冲洗。40，学习交换PPT，使用经验，多水时MCI粒子会很热，因此安装支柱时建议使用有机溶剂。色谱流动相选择可以在RP-18或反相TLC的条件下将有机相浓度提高10%-15%。由于大部分叶绿素具有很强的疏水性，MCI GEL填充柱对去除叶绿素等色素有很好的效果。样品的水溶性差异，可能的话酒精含量高的洗脱液，41，AC PPT学习，MCI gel填充处理比RP-18容易，但是比DA-101等大孔树脂要麻烦一些。因此，如果造型物先用大孔树脂等颗粒大的物质去除叶绿素等水溶性小的各种物质(例如甲醇直接溶于85号水溶液，去除色素和氧化度极小的三萜或类固醇，将清洗液合并浓缩，然后用MCI GEL填充柱分离)，分离效果会更好。42、学通讯PPT，黑药茎粗粉(8.0公斤)60%丙酮-水冷浸出减压浓缩悬浮液石油醚(脱脂)水溶液冷冻干燥冻干粉乙醇溶出Sephadex LH-20乙醇溶出成分a成分c成分d MCI-结chp