第18章-体液免疫球蛋白测定.ppt

1、第十八章体液免疫球蛋白的测定免疫球蛋白是一组由浆细胞合成和分泌的具有抗体活性的蛋白质。重链性质，Ig可分为五类：IgG()，IgA()，IgM()，IgD()，IgE()轻链性质，Ig可分为两类：Ig占血浆总蛋白的20%。检测意义：反映机体免疫功能，诊断疾病免疫球蛋白含量：血清免疫球蛋白、免疫球蛋白、免疫球蛋白：克/升，IgD第一节血清免疫球蛋白、免疫球蛋白、免疫球蛋白的测定，免疫球蛋白的特性和功能。IgG在出生后三个月开始合成，是血清中最高的免疫球蛋白。IgG主要是单体，半衰期约为23天，占血清免疫球蛋白总量的75%。大多数抗感染抗体和自身抗体都是IgG样IgG，它是唯一能穿过胎盘的抗体，有

2、四种亚型(IgG1、IgG2、IgG3、igg4)。免疫球蛋白激活补体的能力比免疫球蛋白强。天然血型抗体是IgM2)，IgA，可在个体发育的最早阶段产生，并可在胚胎晚期合成。如果新生儿脐带血中IgM水平升高，就意味着婴儿患有宫内感染。因此，检测IgM水平可用于传染病的早期诊断。有两种亚型(IgM1、IgM 2)。IgA的特性和功能分为血清型和分泌型。血清型IgA主要由肠系膜淋巴组织中的浆细胞产生。分泌型IgA(SIgA)是由呼吸道、消化道和泌尿生殖道固有层的浆细胞产生的。它主要存在于初乳、唾液、眼泪以及呼吸道、消化道和泌尿生殖道粘膜表面的分泌物中。分泌型IgA的合成和主要作用位点在粘膜中分为两

3、种亚型：(IgA1，IgA2)。首先，测定血清中的IgG、IgA、IgM。测定方法为单向循环免疫扩散免疫比浊法。评价了原理误差的主要原因。一、单向循环免疫扩散法、免疫比浊法、直接透射比浊法、速率散射比浊法，以及二、血清IgG、IgA、IgM测定单克隆抗体免疫球蛋白升高(免疫增生性疾病)低Igemia :先天性低Igemia(免疫缺陷性疾病)；获得性低IGE血症(蛋白质丢失)。第二部分测定血清IgD和IgE。正常人血清中IgD含量很低，半衰期为2.8天。膜结合IgD(mIgD)构成BCR，这是B细胞分化和成熟的标志。未成熟b细胞仅表达mIgM成熟b细胞表达mIgM，mIgD激活b细胞或记忆b细胞

4、mIgD逐渐消失。IgE是正常人血清中最少的免疫球蛋白，主要由粘膜下淋巴组织中的浆细胞分泌，是一种嗜细胞抗体，可导致型超敏反应。这也可能与抗寄生虫免疫有关。1.血清IgD的测定及其临床意义：放射免疫分析法、化学发光免疫分析法、免疫比浊法、酶联免疫吸附法，IgD:生物学功能的未知增加：类风湿性关节炎、过敏性疾病、败血症和新生儿溶血病的减少：意义不大；2.血清IgE的测定及其临床意义，测定方法总IgE测定：放射免疫测定化学发光免疫测定免疫比浊酶联免疫吸附测定特异性IgE测定：免疫斑点酶联免疫吸附测定，IgE临床意义：增高：过敏性疾病、寄生虫感染、病毒感染、自身免疫性疾病。减少：意义不大。在第三部分

5、，尿液和脑脊液中的Ig含量很低。当机体免疫功能异常或炎症反应引起肾脏疾病时，可导致肾小球滤过膜的分子屏障破坏或电荷屏障破坏，从而导致球蛋白和其他大分子蛋白的渗漏增加。生理条件下，根据免疫球蛋白的分子量不同，穿越血脑屏障的难度不同，脑脊液中免疫球蛋白、免疫球蛋白a和免疫球蛋白m的浓度降低。在病理状态下，脑脊液的成分发生变化。分子屏障：肾小球滤过屏障，电荷屏障：1上皮细胞2基底膜3内皮细胞4滤过物质1。尿液免疫球蛋白测定及其临床意义尿液：肾小球滤过膜损伤程度：选择性蛋白尿指数标本：晨尿或随机尿液免疫球蛋白(尿液免疫球蛋白血清免疫球蛋白)(尿液TRF血清TRF)选择性微小病变肾病非选择性膜性肾病、膜

6、性增生性肾炎和肾病综合征，具有临床意义：肾病和免疫增生有助于根据尿液免疫球蛋白增高的类型鉴别诊断肾小球疾病；2.脑脊液免疫球蛋白测定及其临床意义，脑脊液：血脑屏障损伤程度：白蛋白商数：1000 9，提示血脑屏障无明显损伤，轻度损伤915例，急慢性病毒感染，多发性硬化，神经梅毒，带状疱疹神经节炎，脑萎缩，中度损伤1533例，急性神经疏螺旋体病，条件性脑膜炎，格林-巴利综合征，重度损伤33100例，化脓性脑膜炎，单纯疱疹脑炎，结核性脑膜炎等100例完全破裂，区分鞘内免疫球蛋白的来源：IgG产生指数和24小时IgG合成率IgG产生指数QIgGQalb (QIgG=IgGCSF/IgGS，其中IgG合

7、成率qalb=albcsf/albs)/24小时=(IGgcsf-IGgs/541)-(albcsf-albs/243)(IGgs/albs)0.43500。 当24小时内IgG合成增加时，表明脑脊液中IgG主要在中枢神经系统鞘内合成，这在多发性硬化中更为常见。第四节血清IgG亚类的测定及临床意义：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4及其含量依次降低。测定方法：单向免疫扩散免疫比浊法(常用)放射免疫分析法酶联免疫吸附试验，临床意义：IgG亚类含量随年龄变化。IgG亚类的缺陷可表现如下：反复呼吸道感染、腹泻、中耳炎、鼻窦炎、支气管扩张、哮喘等IgA缺乏性疾病常伴有IgG2缺陷，而一些病毒感染已

8、使IgG1、IgG2和IgG3显著降低。IgG亚类的异常增加主要见于型变态反应。第五节m蛋白的测定及其临床意义。m蛋白：由B淋巴细胞或浆细胞异常增殖产生的异常单克隆免疫球蛋白在多发性骨髓瘤、高丙种球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链疾病、轻链疾病等中更常见。蛋白质测定，蛋白质区带电泳：计算蛋白质含量和百分比的经典方法。免疫比浊法：免疫球蛋白定量准确度，快速免疫电泳：M蛋白分型免疫固定电泳：M蛋白分型和鉴定，高分辨率、G、A、M、IgG型M蛋白，标记物，免疫固定电泳图谱，第六节轻链测定和临床意义，本周蛋白质检测样本：尿液方法：免疫电泳，热沉淀(简单易行)免疫球蛋白和-免疫球蛋白定量检测样本：尿液和血液方

9、法：单向免疫扩散法，免疫比浊法(常用，准确和快速)应用：M蛋白血症的分类和鉴定，第七节检测大多数冷球蛋白是免疫复合物，它们的抗原可以是外源性的或内源性的。冷球蛋白的类型及临床意义型：单克隆冷球蛋白，占25 %;最常见的是IgG或IgM。在免疫增殖性疾病中更常见：单克隆和多克隆混合冷冻球蛋白，占15%；最常见的组合是免疫球蛋白。在自身免疫性疾病中更常见：多克隆混合冷冻球蛋白，约占50%；最常见的组合是免疫球蛋白。它在自身免疫性疾病和感染性疾病中更常见。标本：在体温下采集并储存4毫升静脉血，不添加抗凝剂。试验：带静脉血槽的离心式冰箱、37、37、0-4、12h、沉淀，24小时内，单克隆冷冻球蛋白几天后以混合冷冻球蛋白出现。验证：用0.1M醋酸钠缓冲液加热冷沉淀，pH4.0. 2。什么是免疫球蛋白？它的基本分子结构？3.免疫球蛋白的分类和亚类？4.血清免疫球蛋白的测定方法有哪些？5.比较单向免疫扩散法和速率散射比浊法的优缺点。6.免疫球蛋白IgG、IgA和IgM测定的临床意义是什么？思考问题，7。免疫球蛋白IgG亚类测定的临床意义是什么？8.单向免疫扩散试验的主要影响因素是什么？9.如何保证速率散射比浊法的准确性？10.如何评价肾小球滤过膜的损伤程度？11.如何判断血脑屏障的损伤程度？12.如何正确选择测量M蛋白的实验项目？选择题，1。巨球蛋白血症患者血