CELL-细胞培养的生长测定

1、细胞球培养的生长测定、一、活性细胞球的观察测定方法、肉眼观察相差显微镜观察、细胞球在体外培养过程中需要每天观察，可以很快知道细胞球的生长状态、数量的变化、细胞球形态、有无细胞球的移动、有无污染、培养液的pH是否变成酸、是否变成黄、是否交换等。 细胞球检查的方法有：肉眼观察，一般检查可用肉眼观察，主要观察培养液的颜色和透明度的变化。 pH的颜色透明度为正常的7.27.4桃色明亮，透明的酸性产物浅，黄色污垢，黄色pH变红，生长良好的细胞球，显微镜下观察到细胞球透明度大，折射性强，轮廓不明显。 细胞球生长状态差，细胞球轮廓增强，细胞球折射性减弱，细胞质中可出现空泡、脂滴及其他颗粒状物质，细胞球间空隙

2、增大，细胞球形态不规则，丧失原有细胞球特征，并圆润脱落，可在细胞表面及周围摇滾乐。显微镜观察、细胞球生长状态、BMSC(bone marrow stromal cells骨髓基质细胞球)、Anip973 (肺癌细胞球)、二、细胞球计数、计数方法有血球计数板的人工计数的细胞球计数器自动计数法、三、细胞球生长曲线、细胞球生长曲线(cell growth cuu 是观测细胞球生存期内增殖过程的重要指标，分析了细胞球增殖速度，决定了进行细胞球传代与冻存操作的最佳时间。 为什么要做成这样？ 1 .培养细胞球首先在培养板的2.1个孔中分别接种相同数量的细胞球。 计算并记录接种的细胞球混悬剂的密度。 接种时

3、间为0h，2 .细胞球密度每24h计算3孔(瓶)内的细胞球密度，算出平均值。 第七天就到此结束。 3、画曲线，以培养时间为横轴，细胞球密度为纵轴，将结果标绘在坐标纸上，即四、通过体外生物染色进行观察，体外生物染色是在体外条件下用染色剂将活组织和细胞球染色，不影响活细胞球的生命活动方法。 原理：一般的生物材料不能透过胞质膜。 细胞球固定后，胞质膜被破坏，染料进入细胞球内部。 然而，生物染料可进入活的细胞球，它可以无毒或毒性小的染色剂，使细胞球中的特定结构着色。 生物染料对细胞球的生命活动几乎没有影响。 1 .生物染料的种类盐化学基性生物染料：二烯烃茄子绿、中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝、亮焦油紫等酸

4、性生物染料：台望蓝、刚果红、体外生物染色中盐化学基性生物染料(带正电)、2 .台望蓝排除测定法(1)0.4台望蓝溶液的制备： 0.4g台望蓝加入少量的双蒸散粉碎后，向50m1中加入水，离心取出上清液，再加入100 ml1.8NaCl溶液即可完成。 染色工序1 )吸引、清洗培养液。 2 )加入生物染料，2min后观察。 3 )用显微镜观察；4 )注入染色液。 洗衣服。 5 )加入培养液。 继续培养。 活细胞球染料排除检查法，由于死亡细胞球的胞质膜渗透性发生了变化，因此有一部分染料可以大量进入使细胞球显色。 镜下，死去的细胞球呈浅蓝色，活着的细胞球未染色。 注意事项：细胞球混悬剂放置时间过长，导致正常细胞摄取染料影响染色结果。 1、填空题1血细胞计数板：型号不同，经改良的新鲍尔血细胞计数板常用。 新巴氏的血细胞计数板有两个算术室，每个算术室分为-个大小，每个大小的平均面积为-。 在计算室上面盖上血细胞计数板专用的盖玻璃后，室的深度为-mm。 用于血细胞计数时，为白细胞用-、血红细胞用-。 2体外生物染色是一种在-条件下用染色剂染色，不影响活细胞球生命活动的方法。 用这种方法，可以对培养物进行染色观察，被染色的培养物可以继续培养。二.名词解释细胞球生长曲线三.简单解答1简要叙述制作细胞球生长曲