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文档简介
1、实验一母种培养基配制及棉塞制作,一.实验目的 1、 掌握食用菌固化培养基的配制。 2、学会棉塞 的制作方法。 二、基本原理 食用菌母种分离、移接和斜面保存菌种都必须要制作相应的培养基,以备食用菌的培养、分离和保存之用。 培养基是根据各种食用菌在生长繁殖过程中对营养物质需求制成的,它可供给食用菌的C源、N源、水分、各种无机盐及生长物质等。 培养基的种类很多,本实验学习斜面培养基(PDA)制作。,三.实验准备 1.器具:天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、漏斗架、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、棉花、线绳、牛皮纸、皮筋、纱布、电炉、菜刀、菜板、小铝锅等。
2、2材料:马铃薯、葡萄糖或蔗糖、琼脂、水。 四、实验内容 过程:制马铃薯滤液融化琼脂培养基的分装 棉塞的制作 方法步骤:,1配方(PDA):马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂1520g,自来水1000ml,pH自然。 2制作方法 (1)制滤液:马铃薯刮去粗皮,去芽眼,切成碎块,称量后放锅中,加水12001300ml,将其煮沸20min。用双层纱布过滤,取1000ml滤液。,(2)化琼脂:将滤液加热至将沸腾时加入琼脂,不断搅拌,注意控制火力不要使培养基溢出或烧焦。待琼脂完全融化后加入剩余原料,并使其溶解(用热水补足水量).,(3分装 :通过漏斗装置,趁热将培养基分装于试管中,装量约占试管高度的1/4(分装三角瓶,其,装量以不超过其容积的一半为宜)。注意管口或瓶口不要沾染培养基。 (4)制棉塞棉花以白色长绒脱脂棉为宜。根据试管口大小取棉,将其卷成棉塞,最好 外包一层纱布。将棉塞塞入试管口。棉塞塞入试管2/3。制做棉塞要求外表光滑,外包的纱不能折、松紧适宜等。,A.正确; B.不正确,(5)包扎:管口堵入棉塞后7或9支试管扎一捆,棉塞部分用牛皮纸包扎。在包装纸上标明培养基名称,制备组别和姓名、日期等。 (6)、灭菌 (7)、摆斜面 (8)、存放冰箱(4-6C) 六、作业 1、简述高压灭菌锅的使用。 2、何谓灭菌?简述热力灭菌的类型和原理。 3.何时加入琼脂?融化时注意什么问题?分装的技
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