关于乙肝疫苗的产品研发历程与市场现状分析

1、关于乙肝疫苗的产品研发历程与市场现状分析摘要：疫苗在疾病预防中的地位日益重要,对疫苗质量的要求也日益提高。近年来,在传统和新型疫苗的制备中,应用先进的分离纯化技术是提高疫苗效力降低副反应的有效手段。综述了我国乙肝疫苗制品研发过程、疫苗市场与疫苗生产企业的发展现状,指出了我国疫苗产业的市场前景与发展方向。关键词：乙肝疫苗；疫苗市场；现状前景 乙型肝炎是由hbv 引起的全球性传染病,其疫苗的研究很早就受到重视。促进生物产业加快发展的若干政策中将“发展预防和诊断严重威胁我国人民群众生命健康的重大传染病的新型疫苗和诊断试剂”列为生物医药领域的重点工程,发展疫苗产业已成为我国医疗卫生事业以及生物高新技术

2、领域发展的重点。1 血源乙肝疫苗生的研发早在1964 年,blumberg 等发现乙型肝炎表面抗原(hbsag) 后,即报告用氯化铯密度梯度离心法分离hbsag 的初步研究。1972 年dressman等应用差速离心、超声处理后,再经2 次氯化铯1次蔗糖密度梯度离心,制出hbsag 纯品。1978年谢彦博等采用胃酶消化、deae 离子交换层析、亲和层析、凝胶过滤等四步综合法获得高纯度的乙肝表面抗原,用来免疫动物,生产抗2hbs 诊断血 。随着超速离心技术越来越多的应用于生物大分子的分离,国内学者正式开始了血源乙肝疫苗的研制。血源乙肝疫苗的制备,是以密度梯度离心为主,结合盐析和超滤为辅的综合纯化

3、方法。首先,在hbsag 阳性血浆内加入氯化钙(cacl2 ) ,经保温后离心,除去纤维蛋白。随后在血浆中加入硫酸铵, 使终浓度达到50 %饱和度, 经低速离心(3 000 r/ min) ,收集沉淀即为hbsag 的粗提物。第2 步精提纯,主要采用超速离心技术,也是制备血源乙肝疫苗的关键技术。其基本原理是根据所分离物质在介质中的浮密度的差异,将混合物质进行分离。hbsag 的纯化通常采用2 次等密度区带离心( isopycniczonalcent rifugation) 和1次速率区带离心(rate zonal cent rifugation) 。等密度区带离心是将氯化铯或溴化钾配制成不同浓

4、度的梯度液,将样品置于梯度液的高浓度区,经过30 000 r/ min ,20 h 离心,在重力的作用下, hb2sag 浮升到与自身相符的密度区间( d = 1. 2) ,收集抗原密集部分,经过2 次离心,可将hbsag 与球蛋白有效分离,但与hbsag 密度相同的高密度脂蛋白和dane 氏颗粒,必须再通过以蔗糖为介质的速率区带离心才能彻底分离。速率离心是根据所分离物质的分子量之间的差异,在密度梯度介质中的沉降速度不同,使混合物达到分离。经速率离心后, hbsag 密集在蔗糖浓度为45 %( d =1. 14 - 1. 16) 区间内,与高密度脂蛋白和dane 颗粒达到完全分离 。第3 步是

5、表面抗原的灭活,在此过程中,hb2sag 经胃酶消化后通过洗涤浓缩,将残存的微量杂蛋白彻底去除。hbsag 通过盐析粗提,超速离心精提和灭活处理后,电镜下观察均为形态一致的22 nm 表面抗原颗粒。电泳分析, 纯度可达98 %以上。为血源乙肝疫苗的规模化生产奠定了工艺基础。乙肝疫苗的大规模生产中,各纯化工艺之间的衔接和转化过程,都需要对大量样品进行脱盐、脱糖和浓缩。在此,超滤技术发挥了重要的作用。根据乙肝表面抗原的分子量,采用截流分子量为100 ku 的中空纤维超滤柱,在对hbsag 进行脱糖、洗涤、浓缩的同时,将一部分小于截留分子量的非目的蛋白去除,有利于抗原的进一步纯化。因此,在超滤浓缩过

6、程中,选择不同截流分子量的滤膜也能起到一定的纯化作用。2 乙肝疫苗产业发展现状2. 1 我国疫苗流通领域的开放和计划免疫范围的扩大,加强计划疫苗需求,激活有价疫苗市场 2005 年6 月,我国开始实施疫苗流通和预防接种管理条例,对疫苗实行分类管。该条例的颁布开创了全新的疫苗流通体系,疫苗生产商的合法流通渠道由原来的143 个接种点、疾控中心和医院增加到700 多个。2008 年2 月,卫生部发布扩大国家免疫规划实施方案,新增甲肝疫苗、流脑疫苗、乙脑疫苗、麻腮风疫苗、出血热疫苗、炭疽疫苗和钩体疫苗7 种计划免疫疫苗。条例和方案的实施,不仅加大了人们对计划疫苗接种的需求,而且非计划免疫的疫苗也获得

7、了良好的发展契机。2. 2 我国加大传统疫苗的技术改良与新型疫苗品种的开发力度 国内已规模化生产预防用基因乙肝疫苗重组(汉逊酵母) 乙型肝炎疫苗,免疫原性强、安全性好、母婴传播阻断率高。自主研制的国家一类新药治疗性乙肝dna 疫苗已进入临床研究,这是国内首次批准用于人体的dna 疫苗试验;第一个具有完全自主知识产权的治疗用合成肽乙肝疫苗也已正式进入临床试验阶段。全国肝炎治疗用药市场规模约200 亿元,乙肝疫苗市场容量可维持在4 000 万人份左右,基因工程乙肝疫苗具有广阔前景。2. 3 我国疫苗产业展开从产品竞争到企业竞争的双重竞争 我国目前可生产预防20 种传染病的50 余种疫苗,年产量超过

8、10 亿个计量单位,种类和数量都达到世界之最。但我国97 %的疫苗制品多为国外产品的仿制品,13 种获准在我国市场销售的进口人用疫苗,均能找到同类国产疫苗,且具有价格优势。而国产疫苗出口发达国家需要疫苗生产企业通过世界卫生组织gmp 认证,所以参与国际医药市场竞争还有一定难度。我国有30 多家疫苗生产企业,是世界上疫苗产品生产企业最多的国家。但与国外疫苗生产企业相比,我国疫苗生产企业普遍存在规模偏小、研发匮乏、产品单一等问题。国内有价疫苗的大部分高端市场被葛兰素史克、赛诺菲巴斯德等跨国企业所占据,而我国中小疫苗企业凭借成本、价格以及政策等有利条件,占据计划疫苗市场和部分中低端有价疫苗市场。目前

9、国内诞生了一批新兴疫苗企业,规模较大的有天坛生物、华北制药、哈药集团等,明显提高了我国疫苗行业的规模化生产力和研发实力。而新兴中小型疫苗企业利用其自身机制灵活的优势,将每年销售收入的12 %15 %投入研发,升级产品质量,丰富产品种类,力争开发出具有自主知识产权的新产品。国内越来越多的生物制药企业,参与到承接国际医药企业新疫苗外包研发的业务合作中,既增加了收入,又及时掌握了国际新药研发的动向,有效提高国际分工地位。3 我国疫苗产业的发展前景与展望 新型疫苗产品研发上市,国家免疫规划范围扩大,有价疫苗流通渠道放开,疫情高发唤醒民众预防意识,这些因素都将为疫苗产业创造巨大的市场空间和良好的发展环境

10、。疫苗产业将是生物医药产业和医疗卫生事业的重要发展方向,人类将有望通过疫苗接种来有效预防或根治艾滋病、恶性肿瘤等多种重大疾病。中国疫苗产业在未来一段时间里将呈现更快的发展态势,开发新型、安全、有效和经济的疫苗仍然是生物技术领域及生命科学工作者的重大挑战。参考文献：1.于滨. 基因重组乙型肝炎疫苗的临床应用j . 实用药物与临床,2006 ,9 (1) :52253.2. 徐向田. 治疗性乙肝疫苗研究和应用进展a/ / 2006 年全国肝炎疫苗研究及应用经验交流会论文集c . 成都:中国肝炎防治基金会,2006.3. 陈大明,肖宏. 全球乙型肝炎疫苗研发分析j . 第二军医大学学报,2006 ,27 (7) :7742777.4- 谢彦博,王际彰,李岩,等. 制备免疫纯乙型肝炎表面抗原(hbsag) 的一种综合方法j . 微生物学报,1978 ,18 ( 2) :140 - 146.5. 张国强. 密度梯度离心法及其在肝炎病毒诊断和研究中的应用a . 刘锡光. 病毒性肝炎实验诊断学(2 版) c . 北京:人民卫生出版社,1999 ,185 - 203.6.韩雅儒,王淑珍,宫荫乡,等. 乙肝重组疫苗(痘苗表达) 的研制与试用j . 中华微生物学和免疫学杂志,1989 ,97. 于滨. 基因重组乙型