苯并[a]芘的测定.ppt

1、食品中苯并a芘的测定,一、苯并a芘的结构与性质 简称为BaP,针状结晶，沸点310320 溶解特性：水中溶解度为0.0040.012mg/L 易溶于石油醚、环已烷、已烷、苯、甲苯、 二甲苯、丙酮 稍溶于乙醇、甲醇 化学性质：稳定，常温下不与硫酸作用，能与硝酸、 高氯酸 反应 碱性条件下稳定 荧光特性：紫外线（360nm）下产生典型紫色荧光,二、食品中苯并a芘的来源 BaP是含碳燃料及有机化合物热解过程中的产物，是煤、石油、天然气、木材等不完全燃烧的产物。 空气中BaP含量为0.01100g/m3; 地表水中BaP含量为0.030.1g/L; 土壤中BaP含量为0400g/kg,在熏烤、烘烤过程

2、中形成 燃烧产物与食品的直接接触、烟尘与食品的直接接触 粮食烘干 高温下脂肪、胆固醇等成分的热解或热聚（1070倍） 高温下食品的焦化或炭化 淀粉390时产生 0.7g/kg 650 时产生17g/kg 650 下葡萄糖产生7mg/kg、脂肪酸产生88mg/kg,加工环节的污染 设备管道 酱油、醋、酒、饮料 包装材料 糖果、面包、冷饮包装用蜡纸 润滑油等 工业废水、废气的污染 三废的排放 沥青的利用（沥青中苯并芘含量为2.53.5%） 细菌、原生生物、淡水藻类及某些高等植物的组织内合成 藻类、水生植物BaP含量为0.005 g/kg 植物BaP含量0.010.02g/kg,部分食品中的Bap含

3、量（g/kg）,三、BaP的危害 BaP为致癌、致突变化学物质，可致多种癌症，并具有致畸性和遗传毒性。 四、限量标准 1、国家标准允许限量标准,2、其它一些国家、地区标准 欧共体 调料 0.03ug/kg 德国 肉及肉制品 1.0ug/kg 意大利 食品及饮料 0.03ug/kg 荷兰 肉制品 1.0ug/kg 北欧国家 肉制品 1.0ug/kg 3、一些国家的每日允许摄入量(ug) 美国 0.161.6 英国 0.48 德国 0.020.14 荷兰 0.120.42 意大利 0.10.3 奥地利 0.36,五、防治措施 加强环境治理 改变生产方式 改进烹调和加工方法 改变饮食习惯 去毒处理,

4、六、测定方法,（一）分配柱层析净化荧光测定法 1.原理 样品先用有机溶剂提取，或经皂化后提取，再将提取液经液液分配或色谱柱净化，然后在乙酰化滤纸上分离苯并(a)芘，因苯并(a)芘在紫外光照射下呈蓝紫色荧光斑点，将分离后有苯并(a)芘的滤纸部分剪下，用溶剂浸出后，用荧光分光光度计测荧光强度与标准比较定量。,2、试剂 试剂需重蒸，并检查其荧光特性 吸附剂：硅镁型吸附剂 水洗并活化，加5%水减活 中性氧化铝 活化（120 4h） 乙酰化滤纸制备： 滤纸（30cm4cm）乙酰化（180mL苯：130mL乙酸酐：0.1mL硫酸）6h,并浸泡过夜取出风干 苯并a芘标准液 苯并a芘标准贮备液：100ug/m

5、L 苯并a芘标准使用液：1ug/mL, 0.1ug/mL,3、仪器 脂肪抽提器 层析柱（10cm350cm） 层析缸 K-D浓缩器 紫外灯 荧光分光光度计,4、操作方法 （1）样品提取 粮食及低水分含量食品 回流抽提，碱皂化68h（90下） 皂化液趁热转移至分液滤斗 洗涤接收瓶（50mL95%乙醇） 加水（100mL）振摇提取 静置分层 下层二次提取（70mL环已烷） 合并环已烷 洗涤环已烷层（水，100mL3） 洗涤水环已烷提取（30mL2） 浓缩至40mL（60 水浴中）,植物油,称样20g,分液滤斗,环已烷100mL,提取,DMF40mL3,环已烷层,DMF层,DMF层,提取,环已烷40

6、mL,环已烷层,DMF层,弃去,分液滤斗,2%硫酸钠240mL,混匀,提取,环已烷100mL2,鱼、肉及其制品 称样， 加无水硫酸钠（1：1或1：2）搅拌 环已烷抽提取 蔬菜 称样、晾干、加丙酮（150mL）捣碎， 过滤至分液滤斗 加水、 环已烷提取 环已烷重复提取 环已烷层洗涤（水，125mL2） 浓缩至25mL,（2）净化 装柱 加样吸附 洗脱（苯30mL） 减压浓缩至0.10.5mL,（3）分离 点样 展开（95%乙醇：二氯甲烷=2：1） 观察（紫外灯照射） 剪下斑点，加苯浸泡溶解。,（4）测定 测定标准斑点及样品斑点的荧光激发光谱和发射光谱 读取F401nm、F406nm、F411nm （）计算 相对荧光强度,（二）HPLC法 、原理 用KOH-甲醇水（1:1）溶液皂化样品中脂肪，环已烷提取多环芳烃（PAH），再经60%硫酸净化，Sephadex LH-20色谱柱富集样品中PAH，用高效液相色谱仪检测。 、操作方法 （）皂化 称取100g样品直接皂化 （）提取、净化 环已烷萃取，甲醇水洗涤、水洗涤 浓缩 60%硫酸洗涤、水洗涤 过滤（过硅胶、无水硫酸钠）、滤液浓缩,（）富集 加样于Sephadex LH-20柱上， 异丙醇