血栓与止血实验的质量保证

1、血栓与止血实验的质量保证,检测系统,测定方法,仪器,校准物 质控物,检测方法,试剂,一、检测系统的选择,检测系统 选择原则,用途 经济条件 来源 技术支持 维修能力,仪器,试剂,配套 敏感度高,校准物 质控物,配套 供货及时,MNPT的确定方法,标本：多份混合血浆（20份以上） 年龄：1855岁 性别：男、女（非妊娠、非经期）各半 药物的影响： 激素 抗生素 口服避孕药 降压药 维生素 采血前的要求：勿剧烈运动空腹或只服 少量无脂类食物,使用高敏 PT 试剂的优点,举例: 口服抗凝剂病人的同一份血浆用两种试剂测定 ISI=1.0试剂 ISI=2.0试剂 PT正常平均 12 sec 12 sec

2、 PT病人sec 24 sec 16.9 sec PT病人INR (24/12) =2.0 (16.9/12) =2.0 当系统误差是 (23/12) = 1.92 (15.9/12) =1.76 1秒时的INR (25/12) = 2.08 (17.9/12) =2.22 INR分布范围 1.92 2.08 1.76 2.22,1,2,1,2,INR校准血浆,来 源： 口服抗凝剂（香豆素类）病人血浆 人工去因子血浆 处理方式： 冻干 冷冻 获得途径： 中心机构 厂商 INR定值方法：直接用IRP或WRP测定 多个实验室的INR均值,二、仪器的校准（1）,校准的概念 测试和调整检测系统的过程

3、校准程序文件的建立 校准物 溯源性 校准方法 何时进行校准 负责人及其职责,校准,仪器,加样器,天平,有校准物 无校准物，有定值质控物,何时进行校准？,二、仪器的校准（2）,离心机,二、仪器的校准（3）,新仪器在测定常规标本前要建立标准曲线，在更换试剂批号、仪器维修后等情况下应重新建立标准曲线 无法定标的测定项目如APTT，可使用配套的定值质控物进行测定，测定结果应在允许范围内,三、检测系统的性能评价,精密度： 批内、批间、日间 线性 可比性： NCCLS EP9文件 抗干扰功能：NCCLS EP7文件,加入干扰物的血浆测定值未加干扰物的血浆测定值 100% 未加干扰物的血浆测定值,影响度,血

4、红蛋白对PT、APTT和Fbg测定结果的影响 血红蛋白浓度（mg/L） 项目 0 460 920 1380 1840 2300 2760 3220 3680 4140 4600 PT(s) 12.8 12.8 12.8 12.9 12.8 12.8 12.9 13.0 13.0 13.1 13.1 影响度(%) 0 0 0 0.8 0 0 0.8 1.6 1.6 2.3 2.3 APTT(s) 28.9 29.2 29.4 29.0 29.3 29.2 29.1 29.4 29.4 28.9 29.3 影响度(%) 0 1.0 1.7 0.3 1.4 1.0 0.7 1.7 1.7 0 1.4

5、 Fbg(mg/L) 2526 2526 2580 2474 2508 2458 2474 2408 2458 2579 2492 影响度(%) 0 0 2.1 -2.0 0.7 2.7 2.0 4.7 2.7 2.1 -1.3,四、室内质量控制,目的 质控物的选择： 定值 非定值 靶值的确定 允许限的确定,至少20次测定结果的加权均值（均值3SD） 加权均值在允许范围内 加权均值不在允许范围内 以加权均值为靶值 查找原因,确定靶值的程序,开始阶段,均值2SD警告限 均值3SD失控限,半年以后,计算平均CV 平均CV乘以靶值 得出平均SD 均值2SD警告限 均值3SD失控限,允许限的确定,五、

6、参考范围的确定,参考范围不是操作规程或教科书上订出的简单的固定的范围，而是随着仪器、试剂、年龄、性别以及环境等因素而变化的 操作者应学会确定参考值的程序，以根据实际情况确定不同的参考值,六、标本的采集,真空采血管或注射器取静脉血 塑料或硅化玻璃管收集标本 用第二管血测定 止血带造成血液淤积的时间在1分钟以内 采血管加盖 颠倒混匀 防止肝素的污染,六、标本的处理,确认标本量： 取血量与采血管标示的体积相差 10% 压积 55% 时,调整抗凝剂用量 确认有无凝快 溶血 黄疸 脂血 离心条件： 离心力 时间,抗凝剂的选择和使用,用0.109 mol/L的枸橼酸钠作为抗凝剂, 全血与抗抗凝剂的比例为1

7、9，对于严重贫血和红细胞压积明显增高（55%）的血液标本要调整抗凝剂的量 C=1.8510-3(100-H)V C 枸橼酸钠的毫升数 H 压积的百分数 V 取血量,六、标本的保存,取血后冷藏保存 1小时内分离血浆，血浆在08保存 4小时内完成测定 4小时内无法完成测定时，在-20或 -70保存,七、测定过程中应注意的问题,严格按仪器、试剂说明书的要求进行测定 双份测定，取均值报告结果 使用非配套试剂时，一般按试剂说明书的要求进行操作,手工方法检测应注意的问题（1）,恒温器的温度控制（371） 秒表的准确性 试剂复溶时水或稀释剂的加量要求准确 试剂预温时间不可超过30分钟 血浆预温时间不超过10

8、分钟 试管等接触血浆的器具均应为塑料或硅化玻璃器具,手工方法检测应注意的问题（2）,纤维蛋白形成的判别方法 加样器的使用 单个操作人员检测同一份标本的精密度 不同操作人员检测同一标本的可比性 Fbg含量大于4 g/L时,应稀释血浆后重测 低于0.8 g/L时, 应将血浆改为12或15稀释,八、结果的报告,PT 秒数（s） 比率（PTR） 国际标准化比率（INR）：口服抗凝药物治疗检测时 (预防静脉栓塞2.03.0) APTT 秒数（s） 比值（肝素治疗控制范围1.52.5) Fbg PT导出纤维蛋白原测定法 Von Clauss法,九、室间质量评价,美国CAP的方法 国内目前使用的方法 存在的

9、问题,美国CAP的方法,分组统计方法： 同时根据使用试剂和仪器的类型 进行分组 靶值: 加权均值 评价指标: 偏差 你室结果 靶值 偏差 = 100% 靶值,Analyte Target Value Evaluation Criteria PT Peer Group 15% APTT Peer Group 15% Fbg Peer Group* 20%,国内开展室间质评的方法,一般情况 分组统计方法 评价方法,一般情况,组织者 参加者 质评物的选择 申请参加质评的程序 质评物发放次数 质评物发放数量 回报表与评价结果的传输方式,分组统计方法,根据使用试剂和仪器的种类进行分组 各组的实验室数在10个以上,最近一次质评的分组情况,Dade Behring 试剂/ Sysmex仪器 Dade Behring 试剂/除Sysmex仪器外的其他仪器 IL试剂/ IL仪器 IL试剂/ 除IL仪器外的其他仪器 Stago 试剂/ Stago 仪器 Stago 试剂/ 除Stago 仪器外的其他仪器 Pacific 试剂/ 各种类型仪器 不使用IL、 Dade Behring 、Sta