体液蛋白质的检测.ppt

1、第三章体液蛋白检测，(chapter 3 body fluid protenin determination)，检验系让雷伊，案例分析，刘玉玲xx:男性，45岁，2006年6月6日新诊断，腹部紧绷，手腕腹部肝脏在右边缘下接触2厘米。实验室检查：glutaminase 450U/L，glutinase 465U/L，总蛋白质56g/L，血清白蛋白25g/L. Hb80g/L，5项乙型肝炎检查小三阳。b超：肝脾肿大，肝硬化肝腹水。1病人复仇的主要原因是什么？(2)患者血清蛋白质电泳图谱是什么？正常地图肝硬化(-腿)、体液蛋白检测(Body fluid protein determination)、

2、蛋白质(protein)是人体生命活动中最重要的物质。人体几乎所有的器官组织都有很多种蛋白质，很多疾病都有蛋白质代斯障碍，反映在血浆蛋白中。生物中广泛存在的一种生物大分子，由氨基和羧基形成的肽键组成的肽链，经翻译后加工，产生具有特定立体结构的活性大分子。蛋白质(蛋白质)是生命存在的物质基础，没有蛋白质就没有生命。因此，它是与生命和各种形式的生命活动密切相关的物质。身体的每个细胞和所有重要的组成部分都有蛋白质参与。蛋白质是人体重量的16.3%，即60公斤重的成人体内大约有9.8公斤的蛋白质。人体中的蛋白质种类也多种多样，性质和功能也多种多样，但20多种氨基酸徐璐以不同的比例结合在一起，体内代谢和

3、再生不断发生。post-genome project(后基因组计划)、1990-HGP(人类基因组计划)21世纪-后基因组计划(proteomics project)、HGP(人类基因组计划)是美国科学家美国、英国、法国共和国、德国联邦共和国、日本和我们的科学家共同参与了这个预算达30亿美元的人类基因组计划。根据该计划的设想，2005年，要解开人体内约10万个基因的所有密码，绘制人类基因的光谱。就是揭开构成人体4万个基因的30亿个碱基对的秘密。人类基因组计划是曼哈顿原子弹计划和阿波罗计划，被称为三大科学计划。2001年6月全部完成后，基因组计划是人类完成人类基因组计划(结构基因组学)后的多个领

4、域，实际上是指完成顺序后的额外计划，其实体是生物信息学和功能基因组学。其核心问题包括基因组多样性研究、遗传病发生原因、基因表达调控的曹征作用、蛋白质产品的功能等。人类基因组研究的目的不仅仅是为了读取整个DNA序列，更重要的是，了解每个基因的功能，每个基因与某种疾病的各种关系，真正系统地解读生命。从那时起，对生命的起源、物种间、个体间差异的根本理解、疾病的发生机制、长寿、衰老等，实现了困扰人类的最基本生命现象的目的。，本章对血清蛋白的组成、功能和分类、电泳技术的理解：个体血浆蛋白、疾病中血浆蛋白、脑脊液蛋白主：体液蛋白检测方法和林爽意义、疾病中血浆蛋白变化的指导特性、第一节血浆蛋白(The fi

5、rst section Plasma Protein)血浆蛋白是血浆固体成分中最多样、最复杂、功能最广泛的化合物，200多种纯蛋白正常成人血浆蛋白含量为6585g/L，1节血浆蛋白(Plasma protein)，(2)血浆蛋白的赵寅成，(3)血浆蛋白的功能，(4)血浆DNA RNA蛋白、血浆蛋白合成部位、第一节血浆蛋白、(b)血浆蛋白的赵寅成、(白蛋白)纤维蛋白原、少数免疫球蛋白蛋白最后，进行适当的染色，可以看到分辩率高的血浆蛋白电泳模式。这并不是只有ief/SDS页面无法确认的有很多微量蛋白质的血浆蛋白的全部。图3-2血浆蛋白的IEF/SDS-PAGE电泳模式，(c)血浆蛋白的分类，(pl

6、asma proein classification)，1 .盐析，白蛋白和球蛋白，2。电泳分类，琼脂糖凝胶电泳13古濑车站，醋纤维膜a，1，2，聚丙烯酰胺凝胶电泳30多个古濑车站，3。按功能分类血浆蛋白的功能分类，血浆蛋白的功能分类，(4)血浆蛋白功能，(Function of plasma protein)，营养作用，即修复组织蛋白，维持血浆胶体渗透压：7580%白蛋白血浆总胶体渗透压转运载体为酸抑制组织蛋白酶；催化作用参与调节凝血、抗凝剂及纤溶效果的物质代谢。免疫功能，(血浆功能性酶，外分泌酶，细胞酶)，组织蛋白酶定义：大多数动物组织中存在的细胞内肽水解酶的种类。包括组织蛋白酶b(编号：

7、EC 3.4.22.1)、组织蛋白酶d(编号：EC 3.4.23.5)、组织蛋白酶l(编号：EC 3.4.22.15)等。组织蛋白酶b和组织蛋白酶l是溶酶体半胱氨酸蛋白酶，前者的特异性类似于木瓜。后一种表达和分泌由恶性转化、生长因子和癌症促进剂诱导。组织蛋白酶d是天冬氨酸蛋白酶，特异性类似于胃蛋白酶。半胱氨酸组织蛋白酶抑制剂：新型骨质疏松症治疗剂，2种，个别血浆蛋白，(A)前白蛋白(PA) (2)白蛋白(a) (3) 1-抗胰蛋白酶(1 AT) (4) 1酸性由4个相同的亚基组成的4个多体MD 54 000，pI 4.7 pH 8.6电泳，白蛋白前血浆的寿命很短，约12h，肝细胞合成营养不良或

8、早期肝炎时，血清PA浓度比其他血清蛋白质成分发生变化早，灵敏度高的PA=RBP TTR，(电泳图)，2。结合生理功能、组织修复材料携带蛋白、T3、T4(TTR)，作为维生素A(RBP)、营养不良的指标，正常PA 0.20.4g/L轻度缺乏0.10.15g/L中度缺乏0.050.1g/L严重缺乏0.05g林爽意义，3。肝功能障碍的指标及其临床意义。负急性相反应蛋白(APP)。在急需急性炎症、恶性肿瘤、创伤等合成蛋白质的情况下，血清PA迅速减少。急性丘脑反应蛋白(acutephasereactants，APR)，包括AAT、AAG、Hp、CER、C4、C3、纤维蛋白原、c反应球蛋白。其血药浓度在炎

9、症、创伤、心肌梗塞、感染、肿瘤等方面大大增加。还有三种蛋白质：前白蛋白、白蛋白和转铁蛋白。这种蛋白质统称为急性丘脑反应蛋白，这种现象可以说是急性丘脑反应。这是身体防御机制的一部分，其详细机制还不清楚。急性丘脑反应(APR):对炎症和组织损伤的非特异性反应，1-抗胰蛋白酶，1-酸性糖蛋白，结合球蛋白，铜蓝蛋白，C4，C3，纤维蛋白原和C-反应蛋白等血浆蛋白显著增加或增加，血浆前白蛋白这种血浆蛋白统称为急性时相反的蛋白质。增加的蛋白质称为正向APRs减少蛋白质：负，急性时反应，(2)白蛋白(Albumin，ALb)，1。理化性质间实质细胞合成，M66200血浆中只有一种无糖蛋白为pH7.4，每分子

10、ALB超过200个负电荷，血浆中半寿命约19天，急性肝炎不做血浆中最多的蛋白质，占血浆中总蛋白的57h%。2 .血浆胶体渗透压裴珉姬血浆中主要载体蛋白胆红素、前列腺素、胆汁酸盐、激素、药物是酸碱平衡裴珉姬：-NH2、-coh营养作用：组织蛋白补充和修复，3。参考值正常成人355g/l，4。临床意义(1)作为个体营养状态的评价指标评价标准：35g/L正常2834g/L轻微缺乏2127g/L中度21g/L严重缺乏。白蛋白浓度低于28g/L会引起水肿。(2)血清Alb减少(低蛋白血症)，合成不足：慢性肝细胞损伤摄取减少：营养不良，肠吸收不良过量损失：肾病综合征，肾小球肾炎，糖尿病，SLE肠炎症性疾病

11、烧伤和渗出性皮炎，生理下降症：怀孕，(3)血浆Alb的增加，(3) 1-抗胰蛋白酶(1-antitrypsin，1-AT或AAT)，1。具有394氨基酸残基理化性质的单链多肽M 55 000，Pi为4.8，糖10%是醋酸纤维素薄膜或琼脂糖凝胶电泳中与pH相关的蛋白质抑制剂(pI)，2 .生理功能。AAT对胰蛋白酶的抑制作用在胰蛋白酶、基米蛋白酶、尿激酶、肾素、胶原酶、陈嘉桦星形剂、纤溶酶及凝血酶等方面。PH依赖性明显，最大活性为中性和弱碱性，pH4.5基本丧失活性时具有重要的生理意义。AAT对抗多型核细胞吞噬作用释放的溶酶体蛋白水解酶，AAT的m较小(小于2-巨球蛋白)，因此，通过毛细血管，组

12、织液和蛋白质水解酶结合，可以回到血管中，蛋白酶复合物转移到2-巨球蛋白分子，血液循环，在单核细胞系统中分解。3 .林爽意义，AAT胎儿气短，肺气肿，肝硬化AAT急性时间反应蛋白，但缺乏特异性。在急性炎症、感染、术后、组织坏死中发现。急性胰腺炎增加得更明显。长期使用可的松、雌激素、妊娠等，(4) 1酸性糖蛋白(1-acid glycoprotein，AAG，1-AG)，1。物理和化学特性M 40000，糖约45%，包含糖、糖胺、唾液酸，pI为2.73.5。:肝脏，合成一些肿瘤组织。的分解首先是唾液酸的分子分解，蛋白质部分很快从肝脏消失。参考值血清AAG 0.252.0g/L，2。生理功能，主要急

13、性时间反应蛋白，急性炎症时增加，与免疫防御功能密切相关。AAG可以结合利多卡因和心脏麻痹等药物，在急性心肌梗塞中，将AAG增加为急性时性反应蛋白，从而增加药物结合状态，减少自由状态，降低药物的有效浓度。3 .林爽意义，急性时间反应指标风湿病，恶性肿瘤和心肌梗塞，手术等炎症或组织坏死活性溃疡性结肠炎最可靠的指标之一，3。林爽意义，AAG在营养不良肝损害肾病综合征胃肠疾病雌激素减少合成中，(5)结合珠蛋白(haptoglobin，Hp)，又名亲血色素蛋白，接触珠蛋白，可与血红蛋白不可逆结合的糖蛋白。主要在肝脏合成pI4.1两对肽链()2，形成四聚急性时间相反应蛋白，位于醋酸纤维素薄膜和琼脂糖凝胶电

14、泳中的2-球蛋白带。1 .理化性质，2。生理功能，Hp 2h B- Hp-Hp-Hb结合是不可逆的，复合物在几分钟内被输送到肝脏。肝细胞中有特定受体，与Hp-Hb复合物结合，分解成肝细胞，将分解的氨基酸和铁重复用于身体，Hp可以防止Hb从肾脏中丢失，有效地保存身体中的铁，3 .林爽意义，Hp急性时间反应蛋白主要在感染、组织坏死或恶性肿瘤肾病综合征及某些肠道疾病中发现时，血浆蛋白的丢失，包括Hp的合成增加，肝内某些蛋白质的血浆Hp含量会提高。糖皮质激素(如皮质醇、地塞米松和男性荷尔蒙)增加了Hp合成，3 .林爽意义，Hp血管内溶血3:溶血性贫血输血反应疟疾等严重肝病的合成，降低雌激素，减少Hp的

15、合成，(6) 2- macroglobulin (2-mg，AMG)，1。理化性质血浆中分子量最大的蛋白质，M 720KD，pI5.4 4亚单位组成肝细胞和单核细胞系统合成半衰期约5天，2。生理功能，2-MG显著特征：与多种分子和离子结合及蛋白质水解酶结合，影响酶的活性2-MG有选择性地保护某些蛋白酶活性的作用。这在免疫反应中可能具有重要意义的血浆中主要蛋白酶抑制剂，3。林爽意义，低白蛋白血症，尤其是肾病综合征，2-MG的含量可以显着增加，血浆胶体渗透压2-MG维持不属于急性时间反应蛋白的补偿机制，(7) ceruloplasmin，CER或Cp)，1。物理和化学特性铜蓝蛋白是含铜的2球蛋白，肝生成分子包含68个铜原子，含铜、蓝血浆95%的铜和CER相结合，血液中CER可以认为是铜的无毒代斯文库细胞可以利用CER分子中的铜合成含