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文档简介
1、实验3,微生物数量测定,1,实验目的:利用血细胞计数板掌握微生物显微镜直接数量测定方法,原理和应用,2,实验原理普通干重量为湿重量的10%。注:该方法适用于细菌浓度高的样品。浊度法,在一定范围内,菌悬浮液的细胞浓度与浊度成正比。也就是说,与吸光值成正比,细菌数量越多,吸光值就越大。因此,通过分光光度计在一定波长下测量菌显液的光密度,可以反映菌液的浓度。这种方法适合于测量大量细胞。显微镜直接计数法是利用血细胞计数板在显微镜下计数的常用微生物计数法的优点。直观快速的缺点:误差大,不适合细菌计数(太小)。其原理与计算板的结构有关。每个计算板有两个计算室(方形),盖上盖子后体积固定(0.1mm3),深
2、度,那个刻度一般有两种规格。16个中格,每个25个小格1625,25个中格,每个16个小格2516,检查计算板以确定计算板是否损坏。2.镜子检查计算室在添加样品之前,先对计算板的计算室进行镜子检查。如果有污物,需要清洗才能计算。3样品将干净干燥的血细胞计数板复盖在复盖幻灯片上,用薄滴管稀释的酿酒酵母菌液在复盖幻灯片边缘放入小水滴(渡边杏过量),使菌液沿间隙通过毛细渗透作用进入计数室。一般结算室都可以装满菌液。注意不要起泡。4。把显微镜的计数保持几分钟,把计算板放在显微镜下,先用低倍率镜子找到计算室,然后换成高背景数。5.清洗血球计数板计数,在水龙头下冲洗,自己晾干,镜子观察每个小格子内没有残留物。注意事项1,添加样品时,先摇晃菌液。计算室不应产生气泡。2.菌液浓度最好每隔5-10个菌体。3,数的时候,网格的菌丝体只在上面和右边的线。4.酵母发芽后,芽达到母细胞的一半时,用两个菌体计算。5、清洁计数板时,不要用手或固体物品擦拭。从水龙头用水柱冲洗,直到洗干净为止。6,一个样品必须在两个计算室计算的平均值中计算。特别是血球计数板都有编号,每个人一个人要小心使用
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