如何选择HPLC溶剂-斯百全化学_第1页
如何选择HPLC溶剂-斯百全化学_第2页
如何选择HPLC溶剂-斯百全化学_第3页
如何选择HPLC溶剂-斯百全化学_第4页
如何选择HPLC溶剂-斯百全化学_第5页
已阅读5页,还剩9页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

1、如何选择高效液相色谱溶剂,800-720-5720620,高效液相色谱,20世纪60年代末70年代初发展起来的一种新的分离分析技术,已成为生物化学、医学研究、药物临床、化学化工、食品卫生、环保检测等领域最常用的化学分离分析方法。1.定性分析,2 .定量分析(用于化合物含量和纯度的分析)简而言之,高效液相色谱分析的主要目的是分离混合物中的每种成分,并量化混合物中每种成分的比例。工作过程:流动相通过高压泵以一定的流量连续流过色谱柱;通过注射器注入样品混合物。由于混合物中各组分的性质不同,它们在柱中以不同的速度移动,并逐渐分离。通过检测器检测,获得并放大元件的电信号;记录

2、仪以图形形式记录放大的电信号,从而获得液相色谱图。高效液相色谱,分离原理:当溶解在流动相中的各组分通过固定相时,由于与固定相相互作用的大小和强度(吸附、分布、离子吸引、排斥和亲和)不同,在固定相中的停留时间也不同,从而一个接一个地流出固定相。在色谱分析中,如何选择最佳色谱条件实现最佳分离是色谱工作者的重要任务,也是计算机建立和优化高效液相色谱分析方法的任务之一。高效液相色谱和液相色谱系统的许多问题都可以在谱图上反映出来,其中一些问题可以通过改变设备参数来解决,而另一些问题则必须通过修改操作程序来解决。色谱柱和流动相的正确选择是获得良好色谱的关键!高效液相色谱,高效液相色谱分离指数分辨率:定性鉴

3、别和定量分析都要求待测峰与其他峰、内标峰或特定杂质对照峰之间有更好的分辨率。它不一定是两种被测物体的分离度,而是它们最接近的干扰物的分离度。我们应该尽最大努力确保1.5,2.0是理想的,最大的一个是可以的,但是它不是很有意义。峰型:窄而对称的峰最悦目,这也是保证良好分辨率的一个因素,同时有利于准确量化和良好再现。(尾随引物:通过计算峰高为5%时的峰宽与峰顶至前缘的距离之比,评估峰形参数。)托盘数量:与半峰宽相关。半峰宽度越小,塔板数越多,峰越窄,分离越好。它有多大应该基于良好的分离。保留时间:要求重现性,这是色谱定性分析的基础,也决定了分析时间rsd(标准偏差)。2流动相的正确选择直接影响检测

4、结果和仪器的损耗!高效液相色谱溶剂要求,(1)纯度高,溶剂与固定相不混溶,并能保持色谱柱的稳定性。由于高性能液相的高灵敏度,也需要流动相溶剂的纯度。不纯的溶剂可能导致不稳定的基线或“假峰”。(2)溶剂必须对待测样品具有合适的极性和良好的选择性,即溶剂的极性应与待测样品相匹配,并具有足够的溶解度。如果溶解度不好,样品会沉淀在柱头上,这不仅会影响纯化和分离,还会使柱恶化。(3)溶剂应与检测器相匹配。对于紫外-可见,所用的流动相在检测波长处应该没有吸收或有少量吸收。(4)由于其良好的化学稳定性,不能选择与样品反应或聚合的溶剂。(5)低粘度和中等沸点降低了溶质的传质阻力,降低了柱压,有利于提高柱效。常

5、用的低粘度溶剂有丙酮、乙醇、乙腈等;不应使用粘度太低的溶剂,如戊烷和乙醚,它们容易在色谱柱或检测器中形成气泡,影响质量梯度洗脱可以控制流动相的组成,如溶剂的极性、离子强度和酸碱度等。并可用于分析具有许多成分和不同性质的复杂样品。梯度洗脱可以缩短分析时间,提高分辨率,改善峰形,提高检测灵敏度。不溶性溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。当有机溶剂和缓冲溶液混合时,盐晶体可能会沉淀,特别是当使用磷酸盐时,必须特别注意更高的纯度要求,以确保良好的重现性。样品分析前,必须进行空白梯度洗脱,以识别溶剂杂质峰,因为弱溶剂中的杂质在色谱柱头富集后会被强溶剂洗脱。用于梯度洗脱的溶剂需要完全脱气,以防止混合过程中产生气

6、泡。防止压力过大。混合溶剂的粘度通常随组成而变化,因此压力在梯度洗脱过程中经常变化。例如,甲醇和水的粘度很小,当它们以相似的比例混合时,粘度增加很多,此时的柱压大约是作为流动相的甲醇或水的两倍。spectrumhplc溶剂特性,超越acs标准,低紫外吸收背景,低水分含量,低蒸发残渣提供良好的梯度性能,保证不同批次产品的质量稳定性,附有全套的检测报告,选择高效液相色谱溶剂,反相液相色谱(柱效高,分离能力强,保留机制明确),是应用最广泛的液相色谱分离模式之一。适用于非极性-中极性组分)固定相:低极性的烷基键合相c8柱,c18柱的流动相:高极性的流动相极性固定相甲醇-水或乙腈-水,选择高效液相色谱溶

7、剂,反相液相的流动相一般使用水或缓冲溶液,经常加入有机改进剂如甲醇、乙醇、四氢呋喃、二恶烷、异丙醇等与水混溶的有机溶剂来调节保留时间。分析弱酸样品时,通常在流动相中加入少量弱酸,通常是50摩尔/升磷酸盐缓冲液和1%乙酸溶液;在分析弱碱样品时,通常加入少量弱碱,通常使用50摩尔/升磷酸盐缓冲液和30摩尔/升三乙胺溶液。可用作液相色谱流动相的溶剂有100多种,但只有少数几种是实用的。一般来说,甲醇-水体系可以满足大多数样品的分离要求,而流动相是反相色谱中最常用的流动相,因为其粘度低,价格便宜。乙腈的性能优于甲醇。在实验室用甲醇、乙腈、水、四氢呋喃、正己烷、异丙醇和二氯甲烷,可解决9o以上的色谱分离。光谱高效液相色谱溶剂、高效液相色谱产品、离子

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论