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文档简介

1、. 1、基因工程的基本操作步骤.2、原核细胞的基因结构、原核细胞基因、查询密码区(查询密码序列):蛋白质合成，即可以查询密码的蛋白质，非编码区(编码序列):位于编码区上游和编码区下游的DNA序列控制序列中的结合位点可以识别并结合。 转录开始后，RNA多聚酶沿着DNA分子移动，与DNA分子的单链合成RNA作为铸造模型。4、真核细胞基因结构，与原核细胞相比，真核细胞基因结构的主要特征是查询密码区域是间隔不连续的。 也就是说，能够查询密码蛋白质的序列被不能查询密码蛋白质的序列所划分，形成断裂的形状。 其中，能查询密码蛋白质的序列叫做外显子，一般不能查询密码蛋白质的序列叫做内含子。 5、真核细胞基因结

2、构、真核细胞基因、查询密码区(间隔，不连续)、外显子：能查询密码蛋白质的DNA序列内含子：不能查询密码蛋白质的DNA序列、非编码区：具有原核生物类功能的启动子、终止子、(2)无翻译产物的基因：例如rRNA (3)不能转录的DNA片段：如操作基因。 (8)启动子与终止子，启动子是在非查询密码区内靠近转录起点、调控遗传信息表达的脱氧核苷酸序列，诱导RNA多聚酶与准确基因位点结合，转录从起点沿查询密码区进行。 终止子是在非查询密码区内接近转录终点、控制遗传信息表达的脱氧核苷酸序列，阻碍RNA多聚酶的移动，脱离DNA模型链，并终止转录。9、基因工程基本操作流、10、基因组文库和部分基因活拉力赛、基因组

3、文库、部分基因活拉力赛、11、基因组文库和部分基因活拉力赛、12、cDNA合成过程、第一步、逆转录酶h是RNA-DNA杂交分子中的rnn 第三，以单链DNA为铸造模型，通过DNA多聚酶合成另一条互补DNA链，形成双链DNA分子。13、利用PCR技术放大目的基因，原理： DNA双链复制前提：需要知道目的基因脱氧核苷酸序列，合成引物。 获得、14、目的基因，从基因活拉力赛利用PCR技术用化学方法合成人造的.15、建构表达运载体，表达运载体的构成目的基因启动子标签基因.16、基因工程载体构建中应考虑的因素，(1)基因特征：基因的产物如果是糖蛋白，则在原核生物细菌中发生糖蛋白上的糖链加入内质网和高尔基

4、体膜，因为细菌没有这些个细胞。 (2)选择强启动子或组织特异性启动子。 启动子有较强的弱点，选择强启动子后转录活性增加，基因产物量增加。 如果想在生物的某个组织中表达基因，要想只在植物种子中表达，需要选择在种子中特异表达的启动子。 (3)为了选择真正的转基因生物，需要选择抗生素基因等标记基因。17、接纳体目的基因细胞球(植物细胞球)、农杆菌转化法法基因枪法花粉管通道法、18、接纳体目的基因细胞(动物细胞)、显微注射法、19、目的基因受体细胞(微生物细胞) :功能活性检查耐受力检查，检查是否插入了目的基因，检查是否转印，分别抽出什么进行检查，总结步骤，21， 从总结：基因工程基本操作步骤获得目的基因的基因活拉力赛中用PCR化学方法建构基因表

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