基因扩增仪PCR仪测温系统校准规范

1、基因扩增器(PCR器)测温系统校准规范一个范围本规范适用于48孔或96孔的孔结构测量范围为(0120)的多信道基因扩增器(PCR校正)测温系统或单信道基因扩增器(PCR校正)温度校正的校正，其他孔结构和温度范围的基因扩增器(PCR校正)测温系统的温度校正可参考本规范。2参照文件本规范引用以下文件JJF 1071-2000 国家计量校准规范编写规则JJF 1007-2007 温度计量名词术语及定义JJF 1527-2015 聚合酶链反应分析仪校准规范YY/T 1173-2010 聚合酶链反应分析仪智能运输系统- 90 1990年国际温标注日引用文件仅注日版本适用于本规格未填写日期的参考文件的最新

2、版本(包括所有修改单)适用于本规格。3术语3.1基因扩增器(PCR器)，即聚合酶链式反应分析器polymerasechainreactionanalyzer基于PCR (聚合酶链式反应)技术原理，模拟DNA或RNA复制过程，在不存在铸造模型、引物、校验和的条件下，特异性扩增已知序列并对其进行检测分析的仪器设备。 YY/T 1173-2010 3.23.2基因扩增器(PCR器)测温系统temperaturemeasuringsystemforpolymerasechainreactionanalyzer用于基因扩增器(PCR器)的专用温度校准装置。3.3温度校正专用等温块和附件isotherma

3、lblockandaccessoryfortemperaturecalibration与标准恒温箱结合使用，提供基因扩增器测量(PCR器)温系温度校正的洁净温场辅助装置。3.4温度校正专用等温块测试孔testingholefortemperaturecalibration本发明提供一种模拟基因扩增器温度块摇滾乐内的结构并将基因扩增器(PCR器)测温系统的探头放置于插孔内的专用等温块摇滾乐。3.5基因扩增器温度校正专用等温块标准温度验证孔temperature validate hole在基因扩增器等温块上设有放置标准铂电阻温度校正的固定位置。3.6温度测量范围温度测量在精度要求中，基因扩增器测

4、温系统可实现的上下限温度f的范围。3.7显示值误差指示错误基因扩增器测温系统在温度测量范围内可达到的最大温度误差。3.8温度极限分辨率温度解决方案。所述基因扩增器测温系统显示与向末尾变化的修正数顺序对应的输入变化温度值。4概要基因扩增器(PCR器)测温系统是用于基因扩增器(PCR器)的实时温度校准的感测系统。 通常由多通道测温传感器(测温模块)、数据收集模块、数据线、显示器(电脑)构成。图1是示出基因扩增器(PCR器)测温系统的测温结构的图5修正测量特性5.1显示值误差基因扩增器(PCR器)测温系统的温度显示值误差最大允许误差： 0.20。5.2温度测量范围基因扩增器(PCR器)测温系统的温度

5、测量范围请复盖(30100)。5.3温度极限分辨率基因扩增器(PCR器)测温系统的温度极限分辨率必须在0.01以下。5.4功能性检查5.4.1外观基因扩增器(PCR器)测温系统应外观良好。 各通道温度传感器的外形应干净、无弯曲、无断裂、清洁无污染。 温度传感器封装良好，导线连接器应良好接触。 温度传感器使用的保护管及导线应能承受相应的使用温度。5.4.2显示功能基因扩增器(PCR器)测温系统的显示功能的检查在电源接通的状态下进行。 测温系统各通道的温度值满足温度极限分辨率的要求，显示数和图像要清晰，小数点和状态的显示要准确。测温系统超过测温范围、传感器故障时，软件应实时显示对应的通道编号。6校

6、准条件6.1环境条件6.1.1环境温度： (1535)； 环境大气湿度：85 %RH。6.1.2电气量测仪器设备的环境条件应符合相应要求。6.1.3校准时，基因扩增器(PCR器)测温系统的供电电压应在正常工作范围内，与共恒温设备和电气测量共同使用的电源条件应满足相应的使用要求。6.2测量用标准设备及配对设备测量用标准设备及配对设备如表3所示。表3测定用标准器及配对设备序列号德老虎钳名称技术要求用途备考1二等规格铂测温电阻体温度校正测量范围(-189.3442419.527) )温度标准器也可以使用符合要求的其他测量标准2电测设备0.005级，电气测量设备加装标准器后，最小极限分辨率相当于0.0

7、01。定径套电气测量设备3与恒温箱PCR测温专用等温块及配件温度范围温度均匀性温度变异性提供基因扩增器测温系统专用的均匀温场以标准铂电阻为测定基准时，作业区域的深度为300mm以上。没有自重结构的基因扩增器测温系统必须与压杆组合使用(-20150)0.030.01/10min4水三相点瓶U=0.002，k=2测定标准铂电阻的水三相点值7校准项目和校准方法7.1校准项目a )温度显示值误差b )测温范围c )温度极限分辨率7.2校正方法7.2.1校准前的准备a )打开电气测量设备进行预热，预热时间至少达到20min或其使用说明书相应要求。b )将标准铂电阻温度校正装入预先冻结的水三相点瓶中，测量

8、其水三相点值。 新测量的水三相点值输入到定径套电气测量设备中使用。c )按照恒温箱和使用说明书的要求正常工作，保证工作区域的液面在规定位置。d )基因扩增器测温系统本体接通电源进行预热，进入测量状态。e )基因扩增器测温系统校正专用等温布摇滾乐，如图2所示放置在恒温箱内(建议向等温布摇滾乐温度孔内注入15L导热油以保证更好的温度传导性)，以保证等温布摇滾乐在恒温箱内所需的液面浸渍深度满足下表所示的要求。局浸式等温封摇滾乐全浸式等温封摇滾乐浸渍深度180毫米180毫米图2基因扩增器测温系统校正专用等温块摇滾乐示意图f )如图3所示，将基因扩增器测温系统放入PCR测温专用等温子摇滾乐。 将标准铂电

9、阻温度校准插入PCR测温专用等温布摇滾乐专用验证孔内，保证标准铂电阻测温零配件和等温布摇滾乐底部的保持水平，将恒温箱设定在所需的校准温度点，并将等温布摇滾乐与恒温箱一起温度稳定1小时后，所监测的标准铂电阻温度校准显示基因扩增器测温系统校准装置的温度波动度小于0.01/10min，基因增加图3在基因扩增器测温系统等温子摇滾乐内校正温度显示值误差原理图7.2.2校准过程7.2.2.1温度显示值的误差a )校正温度显示值误差的温度点一般选择为30、50、60、70、90、95。 如果用户提出请求，可以根据用户的请求选择校准点。b )将基因扩增器测温模块与测温系统本体连接，使其处于正常工作状态。 将基

10、因扩增模组放入基因扩增器测温系统校正专用等温布摇滾乐，将温度传感器放入等温布摇滾乐测试孔，保证测温传感器与等温布摇滾乐贴紧，并盖上绝热棉。 没有自重功能的基因扩增器测温系统需要在测温模块上对密封件进行加压。 参照图3。 在云同步中，将标准铂电阻温度校正放入恒温箱中，将标准铂电阻温度校正放入PCR测温专用等温块摇滾乐专用验证孔中，浸渍在恒温介质中的深度在180mm以上。c )将恒温箱设定为校准的温度点，恒温箱的实际温度的最大偏差为0.20以下，(以二等标准铂电阻温度校正的显示值为基准)稳定30分钟以上，分别读取标准器和基因扩增器测温系统的各通道的温度值，连续4次进行测量。 修正各自的平均值。标准

11、器(t*1)测试点a1(ta1) 测试点a2(ta2) 测试点an(tan )欸标准器(t*2) 测试点a1(ta1) 测试点a2(ta2) 测试点an(tan )欸标准器(t*3)测试点a1(ta1) 测试点a2(ta2) 测试点an(tan )欸标准器(t*4) 测试点a1(ta1) 测试点a2(ta2) 测试点an(tan )在测定中，恒温箱的温度变化在0.01以下。d )根据上述c )的测定要求，在30、50、60、70、90、95的状态下，依次测定标准器和基因扩增器测温系统的各通道a1an点的温度显示值。e )温度校准点也可根据客户要求，采用上述方法进行测量。7.2.2.2温度测量范

12、围7.2.2.1中的b )和c )的要求，分别测定基因扩增器测温系统的温度测定通常下限30和通常上限95的状态下的显示值误差。温度测量上限和温度下限也可以根据制造商填写的温度测量范围，用上述方法进行测量。7.2.2.3温度极限分辨率节根据7.2.2.1中的b )和c )的要求，将基因扩增器测温系统模块放入恒温箱中的基因扩增器校准专用等温布摇滾乐温度验证孔内，并将恒温箱与等温布摇滾乐一起设定在90、恒温30min以上，而测量基因扩增器测温系统在90的状态下保持稳定b )根据校正基因扩增器测温系统的标称显示的温度极限分辨率D1，缓慢调整恒温箱的设定温度，直到校正基因扩增器测温系统的显示值稳定为(t

13、1 D1)，并记录此时的标准铂电阻温度校正显示值T2，将基因扩增器测温系统放入恒温槽中的基因放大器校正专用等温块在恒温10min以上c )按照步骤a和步骤b，反复进行连续4次测定，记录数据。 修正4次测定和的平均值。d )温度极限分辨率(率)请用=进行订正7.3校准结果的处理7.3.1温度显示值的误差按下式校正式中：基因扩增器测温系统温度显示值误差。基因扩增器测温系统a1an通道4次温度测量的平均值。标准铂电阻温度校正4次测定得到的温度测定的平均值。按照JJG160的规定，换算以标准铂电阻温度校正4次测定的温度值，并校正其平均值按照JJG160的规定，换算以标准铂电阻温度校正4次测定的温度值，

14、并校正其平均值b )计算基因扩增器测温系统a1an通道的4次温度测量的平均值。c )修正基因扩增器测温系统的各通道a1an的显示值误差；修理到约0.01。7.3.2温度极限分辨率(率)通过下式进行修正。=-其中-是温度极限分辨率、标称温度极限分辨率D1的有效位数约为；等温块在恒温箱内稳定在90.00时，在基因扩增器测温系统的各个通道一次测量的温度显示值的4次平均值，以标称温度极限分辨率D1的有效位数计约为；在基因扩增器测温系统的各通道中一次测量的温度显示值(T2 D1 )时的标准铂电阻温度校正显示值的4次平均值，以标称温度极限分辨率D1的有效位数计约为；a )修正基因扩增器测温系统的各通道a1

15、an的显示值误差；=-、公称温度极限分辨率D1的有效位数约为。b )计算基因扩增器测温系统某通道的4次测定结果的平均值。用公称温度极限分辨率D1的有效位数修理约、。8校正结果的表现校对结果必须反映在校对证明书上。 校对证书必须至少包含以下信息：a )标题：“校对证明书”；b )实验室名称和地址c )进行校正的场所(与实验室地址不同时)d )证书的唯一标识符(如编号)、每页和总页数的标识符e )客户的姓名和地址f )被校对象的记述和明确的识别g )在进行校正的日期与校正结果的有效性和应用有关的情况下，应该说明被校正对象的接收日期h )在涉及校准结果的有效性的应用的情况下，对被校正样本的采样顺序进行说明I )显示校准所依据的技术规格(包括名称和符号)j )本次校准中使用的测定基准的质量跟踪和有效性的说明k )校正环境的说明l )各校正项目的检查结果的说明m )校准规格偏差的说明n )校准证书颁发者的签名、职务或等效标识牌；o )表示校正结果仅对被校正对象有效的声明p )未经实验室书面批准，不得部分复制证书声明。附录a