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文档简介
1、临床免疫学检验技术,第29章生殖免疫及其免疫检验,王芳,内容,第1节概述了第2节中常用的生殖相关免疫检验项目及其检验方法和临床意义,人类生殖过程图解,生殖免疫学是近年来发展起来的一门交叉学科,主要研究生殖医学中的免疫学问题。它主要包括神经生殖内分泌免疫调节、母胎免疫调节和生殖免疫调节。第一节概述了局部免疫性妊娠和免疫性自然流产以及免疫性性激素和生殖道组织的免疫性,首先是生殖道组织的局部免疫性。(1)宫颈和阴道免疫1。抗原呈递细胞(1)性质:树突状巨噬细胞(2)分布:宫颈和阴道上皮2。T细胞(1)组成:主要是CD8 T细胞(2)分布:宫颈自然上皮、转化带上皮细胞3。b细胞(1)分布:阴道、宫颈阴
2、道和宫颈管组织(1) 1。生殖道组织的局部免疫;2.子宫组织的局部免疫;1.t细胞的免疫营养;2.巨噬细胞的免疫杀伤;3.大颗粒淋巴细胞(LGL);1.生殖道组织的局部免疫。(3)卵巢免疫。免疫细胞(1)巨噬细胞(2)淋巴细胞(3)肥大细胞(4)多形核细胞(2)细胞因子(1)胰岛素样生长因子(IGF) (2)转化生长因子(TGF-) (3)表皮生长因子(表皮生长因子),2。妊娠与免疫,(1)配子免疫。精子抗原(1)膜抗原(2)结构抗原(3)血型抗原(4)组织相容性抗原(5)精子中的各种酶系统抗原2。怀孕和免疫2。卵细胞-透明带抗原是颗粒细胞分泌的包裹在卵细胞膜表面的一层基质,是一种糖蛋白,在受
3、精中起重要作用。透明带抗原可诱导免疫系统产生抗透明带抗体,当抗体与透明带结合时,可影响卵细胞的受精和着床。(2)妊娠和免疫;(2)胚胎免疫;(1)定义:一类来源于胚胎期和胚胎组织的抗原。(2)分类:胚胎同源抗原;人类白细胞抗原;甲胎蛋白,第二,妊娠与免疫,(三)母胎免疫中胎儿不被母亲排斥的因素:(1)母亲妊娠期免疫防御反应受到严重抑制;(2)胎盘免疫屏障阻断胎儿抗原;(3)母体抗体和其他免疫因子被胎盘屏障阻断。妊娠与免疫,(4)胎盘免疫1。胎盘机械屏障功能;2.胎盘限制大分子抗原进入胎儿血液循环;3.滋养层表达的人类白细胞抗原发挥免疫抑制作用。4.胎盘分泌许多具有免疫抑制作用的蛋白质和激素。3
4、。自然流产与免疫,免疫机制,非免疫,免疫相关,40%-50%,50%-60%,染色体异常,生殖器解剖异常,内分泌异常,生殖道感染,自身免疫型,同免疫型,3。自然流产与免疫。自身免疫类型(1)意义:如果是阳性,流产的发生率高达66%。(2)抗精子抗体:阻碍精子获能;干扰精子通过透明带等。3。自然流产与免疫。同型免疫(1)自然流产的组织相容性抗原系统(HLA)和滋养层-淋巴细胞交叉反应抗原(TLX),(2)在母胎界面阻断与父系抗原结合的抗体(BA),阻止母体th细胞识别胎儿抗原,(3)细胞免疫和复发性流产之间Th1/Th2失衡;(4)性激素与免疫、催乳素、孕激素和雌激素;(4)性激素与免疫;(1)
5、催乳素性质:垂体激素;分布:以胸腺、卵巢和淋巴细胞为主;作用:促进胸腺中T细胞的分化,促进B细胞的分化和成熟,B细胞也是自然杀伤细胞的重要调节因子。(4)性激素与免疫(2)黄体酮激活孕酮受体,形成孕酮受体,保护妊娠;黄体酮干扰花生四烯酸代谢,诱导免疫反应通过PIBF转移到TH2,从而降低自然杀伤细胞活性,有助于维持妊娠。性激素与免疫,(3)雌激素1。雌激素对免疫系统的影响:调节T淋巴细胞的生长、分化和增殖;影响细胞因子的产生;刺激B细胞的活化和抗体的产生。2.雌激素受体(ER),第2节中常用的生殖相关免疫学检验项目,及其检验方法和临床意义,重点是不孕症的生殖免疫学检验、生殖系统感染的免疫学检验
6、、生殖系统肿瘤的免疫学检验、生殖系统内分泌功能的免疫学检验。抗精子抗体和抗透明带抗体是重要的免疫因子。1.不孕症的生殖免疫学试验,(1)抗精子抗体(AsAb) 1。抗精子抗体产生机制:(1)男性抗精子抗体:自身抗体;(2)女性抗精子抗体:同种异体抗体;2.抗精子抗体类型:(1)分泌型IgA主要存在于生殖器分泌物中,IgG和IgM主要存在于血清中;(2)临床上通常检测血清中的IgG。1.不孕症的生殖免疫学检测。抗精子抗体的检测方法(1)精子凝集试验的原理:精子表面结合抗体后能相互凝集;检测方法:明胶凝集法、管板凝集法、圆盘凝集法、毛细管凝集法等。特点:该方法特异性差,假阳性率高。精子凝集图,1。
7、不孕不育的生殖免疫学试验,(2)补体依赖细胞毒性试验和精子固定试验的原理:在补体的作用下,精子与抗体结合后不能前进;特点:该方法只能检测作用于精子尾干的精子抗体,特异性强,灵敏度低,假阴性率高。(3)免疫珠结合法原理:包被有抗人免疫球蛋白抗体的聚丙烯酰胺可以结合到与精子抗体结合的精子表面,这种免疫珠可以在相差显微镜下随精子前进而移动。特点:该方法可靠,但灵敏度难以确定,无法定量测定。(1)不孕症的生殖免疫学试验(4)酶联免疫吸附试验(ELISA)是不孕症的初步筛查试验;灵敏度高,重复性好。人抗精子抗体酶联免疫试剂盒,1。不孕症的生殖免疫学检测。抗透明带抗体(AzpAb) 1。透明带具有抗原性,
8、在育龄妇女排卵过程中,透明带被反复破坏和吸收,机体处于抗原刺激的敏感状态,产生透明带蛋白;2.AZPAB对生殖的影响抑制精子吸附和穿过透明带;干扰植入;影响卵细胞的发育和生长。不孕症的生殖免疫学检测。AzpAb检测方法(1)ELLSA和BA-ELLSA法:(2)透明带沉淀反应,(3)放射免疫测定,(4)间接免疫荧光试验,(5)被动血凝法,(6)精子-透明带结合或穿透试验,(2)反复自然流产的免疫学检测,(1)封闭抗体(1)。定义:它是一种通过刺激母体免疫系统产生的IgG抗体,如人类白细胞抗体(HLA)、滋养层和淋巴细胞交叉反应抗原(TLX)。2.分类:抗人类白细胞抗原抗体和抗TLX抗体;抗Fc
9、受体抗体;抗基因抗体;抗冷b细胞抗体。复发性自然流产的免疫学检测。检测方法(1)补体依赖性细胞毒性试验女性血清中的封闭抗体与男性外周血淋巴细胞结合,在补体的作用下导致细胞死亡,并通过台盼蓝染色对结果进行评价。(2)单向混合淋巴细胞反应阻断试验丝裂霉素处理后,在分别含有抗体血清和女性血清的培养条件下,将男性淋巴细胞与女性淋巴细胞混合。用3H-胸苷掺入法检测细胞增殖水平,用阻断效率表示结果。反复自然流产的免疫学检测,(3)流式细胞术分析阻断抗体原理:采用竞争法原理,抗体型或小牛血清中的抗CD3、CD4和CD25抗体与测量管中的抗体竞争结合雄性细胞;当抗CD3、CD4和CD25的阻断效率大于1%时为
10、阳性。流式细胞术,2。复发性自然流产的免疫学检测。抗磷脂抗体(APLA) 1。定义:它是一个具有不同基因的自身抗体家族,可分为两类:狼疮抗凝剂(LAC)和抗心磷脂抗体(ACA)。2.抗心磷脂抗体的检测方法(ACLA)是最常用的方法;2.反复自然流产的免疫学检测;3.在两对夫妇中,人类白细胞抗原-1抗原的检测通常通过血清学方法进行;人类白细胞抗原检测通常通过混合淋巴细胞培养来鉴定。(4)透明带抗体和抗精子抗体的检测见第29章第二节。(2)反复自然流产的免疫学检测,(5)血型和抗血型抗体的测定1。常见血型不合引起的同种免疫性疾病(1)ABO血型不合引起的同种免疫性疾病;(2)同种免疫疾病与2)Rh
11、血型不相容;2.诊断主要基于实验室特异性抗体试验。生殖系统感染免疫学试验,(1)支原体试验1。定义:它是最小的原核生物,没有细胞壁,能在无生命的培养基中生长和繁殖;2.分类:16种,5种对人类有致病性(1)肺炎支原体(2)解脲支原体(3)人型支原体(4)生殖支原体(5)发酵支原体,支原体示意图,3。生殖器感染的免疫学检测。检测方法(1)病原体培养采用间接培养法(2)血清学试验(1)特异性血清学检测方法:补体结合试验(2)非特异性血清学检测方法:肺炎支原体浓缩试验、支原体培养基、3。生殖器感染的免疫学检测。抗原检测酶联免疫吸附法、间接免疫荧光法和反向间接血凝法直接检测分泌物和体液中的支原体抗原,
12、具有较高的特异性和敏感性。(4)核酸检测、基因探针、聚合酶链反应等方法;(3)种系感染的免疫学检测;(2)衣原体检测的定义:衣原体是一种能通过细菌过滤的原核微生物,具有独特的发育周期,专门从事细胞内寄生。分类:沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体。衣原体、种系感染的免疫学检测,检测方法(1)寻找抗原(1)鸡胚分离培养;2)细胞分离和培养;3)包涵体涂片检查;4)衣原体抗原的酶联免疫吸附试验或荧光检测;5)金标法快速检测衣原体。衣原体包涵体,种系感染的免疫学检测,(2)抗体免疫荧光,(3)特异性核酸SCCA,(1)连接酶链式反应,(2)转录介导的扩增试验,(3)聚合酶链式反应,(4)实时荧光聚合
13、酶链式反应,(4)种系肿瘤的免疫学检测,(1)种系肿瘤的常见免疫学检测指标,(1)血清糖蛋白肿瘤标记物,(1)鳞状细胞癌抗原,(2)CA-125 (3)CA15-3 (4)CA19-9 (5)癌胚抗原(CEA) (6)前列腺特异性抗原(2)胎儿-胎盘蛋白肿瘤标志物(1)甲胎蛋白(AFP) (2)人种系肿瘤的免疫学检测3酶肿瘤标志物1碱性磷酸酶(ALP)胎盘ALP常被用作宫颈癌和上皮性卵巢癌的肿瘤标志物。 (2)乳酸脱氢酶用于检测卵巢上皮性和生殖细胞肿瘤。(3)端粒酶与细胞衰老、肿瘤发生、发展和分化有关。种系肿瘤的免疫学检测(2)种系肿瘤免疫学指标的检测(1)酶联免疫吸附试验(ELISA) (2)化学发光酶免疫分析(cleia) (3)电化学发光免疫分析(eclia) (4)时间分辨荧光免疫分析(trfia) (5)液体芯片技术(5)种系内分泌功能的免疫学检测(1)激素1。绒毛膜促性腺激素2。雌三醇3。胎盘催乳素(hPL) 4。垂体催乳素。孕酮6。胎儿纤连蛋白(fFN) 7。卵泡刺激素和黄体生成素,5。生殖系统内分泌功能的免疫学检测,(2)激素受体1。雌激素受体和孕激素受体。黄体生成素受体和卵泡刺激素受体。本章总结了抗精子抗体和抗透明带抗体是免疫因素导致不孕的重要因素。封闭抗体缺乏、透明带抗体
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