十七、艾滋病机会性感染及性病实验室检查.ppt

1、2020/7/18，楚润卓，1，艾滋病机会感染和性病实验室检查，中国医科大学一元检查和楚润卓，2020/7/18，楚润卓，2，讲座内容，1，机会感染病原学检查2 1，病毒取新鲜尿液、唾液、子宫分泌液、肝脏活检或尸检标本、外周血白细胞等，将标本接种到胚胎肺二倍体前代细胞株，培养24h后染色，就能看到包涵体，细胞病变需要26周才能看到。病毒的分离可以证明CMV感染的存在，但不一定能证明疾病和病原学有关。1，病毒感染CMV感染，2020/7/18，楚润卓，6，抗体检查补体联合测试(CF)，间接血凝测试(PHA)，免疫荧光测试(IF)，免疫印迹测试(IIS)，1，病毒感染CMV感染，2020/7/18

2、，冷浊，7，IgM阳性，告诉患者当前感染或CMV感染活动时间。IgG阳性显示过去感染或潜伏感染。据调查，如果IgG抗体举重增加了4倍或4倍以上，最近就出现了CMV感染。严重艾滋病患者的血清抗CMV抗体可能是阴性，因此，艾滋病患者的CMV血清学检测阴性不能排除CMV感染。2020/7/18，楚润卓，8，抗原检查早期抗原免疫荧光检查(DEAFF):将肺泡灌洗液、血液白细胞、尿液沉积物、活检或尸检样品接种到纤维细胞上，24小时后用荧光标记的单克隆抗体直接测定CMV和蛋白质。1，病毒感染CMV感染，2020/7/18，冷浊，9，CMV白细胞抗原血症检查，该方法在症状出现前检测CMV病毒，定量预测和区分

3、CMV活动期和无症状感染。抗病毒治疗的效果和感染中枢神经系统的艾滋病患者脑脊液白细胞中CMV的测定结果与白细胞或血浆中CMV DNA扩增结果一致。这种方法既能抑制早期免疫，又能诊断艾滋病患者的活动性CMV感染，简单、快速、敏感。2020/7/18，闰德，10，免疫组织检查，将外周血白细胞用抗CMV单克隆抗体进行免疫组织染色，可迅速诊断。免疫荧光检查标本的CMV早期抗原提示阳性时CMV活动性感染。1，病毒感染CMV感染，2020/7/18，冷浊，11，CMV核酸检测和定量CMV DNA和mRNA提取外周血白细胞，血浆，血清中CMV DNA，集PCR可用于诊断活性型MCV感染。1，病毒感染CMV感

4、染，2020/7/18，冷浊，12因此，Rasmussen等利用外周血白细胞的CMV DNA含量判断艾滋病患者的视网膜炎是否是由CMV感染引起的。但是用PCR方法检测CMV DNA也不能判断患者是否为活性、无症状、潜伏期，因此不能正确评价疾病的进行过程和药物治疗的效果。2020/7/18，云桌，13，形态检查标本涂层，金莎和赖氨酸染色，镜检查可见多核巨细胞和核内酸性捕获体。1，病毒感染HSV-1和HSV-2感染，2020/7/18，冷浊，14接种4896小时后，细胞肿胀，变圆，细胞融合等细胞病变现象和特征性核内包涵体被发现，可以诊断。1，病毒感染HSV-1和HSV-2感染，2020/7/18，

5、冷浊，15，免疫学检查HSV抗原检查主要采用HSV特异性单克隆抗体，用免疫荧光或ELISA方法直接检测患者组织或分泌物细胞中的HSV抗原。HSV抗体检查是临床上最常用的检测HSV感染的手段，但是艾滋病患者通常会有假声反应。1，病毒感染HSV-1和HSV-2感染，2020/7/18，冷诊，16 HSVPCR在林爽诊断困难的情况下也起作用。例如，HSVDNA可以通过PCR在艾滋病患者的玻璃体液和皮肤粘膜损伤中检测出来。1，病毒感染HSV-1和HSV-2感染，2020/7/18，楚云德，17，诊断HHV-6和HHV-7感染培养：可以采取患者的血液、唾液、体液或疱疹液。李晟病毒抗体：间接免疫荧光法或E

6、LISA法检查。但是健康人口中血清抗HHV-6和抗HHV-7抗体阳性率均超过85%，因此血清学检查的临床意义不大。分子生物学方法：分子杂交或PCR方法直接从标本中检测病毒核酸。1，病毒感染HHV-6，HHV-7和HHV-8感染，2020/7/18，楚润德，18，血清HHV-8潜伏蛋白抗体血清抗HHV-8可溶性抗原，1，使用病毒感染HHV-6，HHV-7和HHV-8感染，2020/7/18，楚润德，19 PCR方法从标本中检测病毒核酸，方法敏感准确。血清学检查应用了很多ELISA法，在发病2个月内对李晟IgG和IgM抗体进行了调查，具有诊断价值。1，病毒感染V-Z感染，2020/7/18，楚润卓

7、，20，间接荧光抗体检查(IFA)和酶联免疫检查(EIA)最理想的EB病毒血清学检查成分是VCA-IgG，EA李晟检测EB病毒的核酸经常使用冷冻节和石蜡切片的原位交配实验，细胞显液的交配，点交配，Southern印迹交配等1，病毒感染V-Z感染，2020/7/18，冷浊，21，2，细菌感染等，感染医院和社区的细菌常见的细菌包括金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌、肺炎链球菌、假单胞菌、肠杆菌、流感嗜血杆菌和分枝杆菌。特别是正常免疫人口很少感染的细菌(如结核杆菌等)，经常引起艾滋病患者的机会性感染。2020/7/18，楚闰德，22，铜，假丹波菌(P. aeruginosa)，革兰的声音，长

8、度不同，片段母。生长温度2542。氧化酶阳性。硝酸盐减少，尿素分解，精氨酸酶阳性。2020/7/18，楚云卓，23，铜锈菌(P. aeruginosa)，2020/7/18，楚云卓，24，标本直接检查涂层染色显微镜检查蛋黄培养基显示为浅黄色(阿尔伯特爱因斯坦，Northern Exposure美国电视剧，用新型分枝杆菌特异性抗原检测，或用频率脉冲电子捕获基液色谱检测细菌中的“硬脂酸结核”，用李晟RNA或DNA探针进行杂交实验，或用PCR等方法进行标本的新型，2，细菌感染非核菌，2020/7/18，冷浊，26，龟兹菌体为多胎性，细长或短粗菌体，幽灵菌为强酸性，旧培养物逐渐失去抗酸性。这种菌是快速

9、生长菌，培养要求不高，在穴位培养基和麦康凯培养基上都长得很好。通常13天内生长直径12毫米的菌落。菌落表面光滑湿润，有光泽，有光泽，乳白色或浅黄色。2，细菌感染非核真菌，2020/7/18，云卓，27液体培养基中的菌体分离。这种菌是快速生长型菌，5天内就长出了肉眼可见的菌落。菌落柔软、柔软、奶油状，菌落也可能出现半球形、蜡状的分裂叶，经常出现深色、粗糙、中心堆积的菌落。孔雀绿色培养基中，菌落可能是绿色的，玉米粉琼脂培养基中，菌落呈粗糙致密的电缆形状。光滑的菌类周围有宽的网状。2，细菌感染非核菌，2020/7/18，云卓，28，真菌感染卡氏肺孢子虫感染，病原学检测可以在患者痰，支气管肺泡灌洗液，

10、肺活检组织中找出卡氏肺孢子虫。常用的染色方法是六甲胺银(GMS)染色。内质网染成棕色，囊壁可以看到特征性的括号状结构。甲胺蓝(TBO)染色：胞囊壁是深紫色的，没有特征括号的结构。荧光染色法：胞囊呈浅青色光晕，胞大弧状结构清晰可见。2020/7/18，冷浊，29，特异性DNA检查采用原位杂交技术和PCR方法，可检测血液、痰、支气管肺泡灌洗液、肺活检组织的卡氏肺孢子虫DNA敏感性高，特异性强，PCR可检测10个拷贝的靶DNA。真菌感染卡氏肺孢子虫感染，2020/7/18，润德，30，直接道浦经检查分离培养：标本为沙氏葡萄糖蛋白琼脂和发色培养基，3037培养2448小时，非典培养基出现乳白色，光滑，

11、中等大小的菌落，和，真菌感染白僵菌感染，2020/7/18，润卓，31乳胶凝集实验：即新型银球菌乳胶凝集实验，检测患者CSF或血清中新型银球菌胶囊多糖抗原，其特异性和敏感性均高，可以简便快速地诊断银球菌脑膜炎。分离培养：采用自动微生物系统和API验证。，真菌感染新隐球菌感染，2020/7/18，楚润德，32，2020/7/18，楚润德，33，2020/7/18，楚润德，34产生的孢子囊长达500米以上膨胀的典型分生孢子柄和攀援史是真菌的特征。真菌感染曲霉感染，2020/7/18，楚云德，35，2020/7/18，楚云德，36，2020/7/18，楚云德，37分离培养：马尔尼菲青霉素组织病理学检

12、查：单核巨噬细胞系统以外的组织经常发生化脓性反应。单核对吞噬细胞系统器官中的肉芽肿性反应。巨噬细胞内外有酵母状菌体，圆形，椭圆形，香肠状，水平间距。真菌感染马尔尼菲青霉素感染，2020/7/18，闰德，42，外周血涂层徐氏，金莎，高碘酸染色：小卵原出芽细胞(经常聚集在巨噬细胞内)，在林爽标本中可见的大厚壁细胞。分离培养：荚果组织细胞菌属于双相菌，25萨堡弱培养基(SDA)为真菌状，血琼脂37培养可变成酵母状，约30%的菌株在25SDA可见的特征大分生孢子，直径814米，表面有手指状突起，另一株为椭圆形牛，真菌感染荚果组织细胞菌感染，2020/7/18，冷浊，43，荚果组织细胞菌，25培养，2020/7/18，冷浊，44，荚果组织细胞菌(未发芽)球壁破裂后，内生孢子向外游去。每