支 原体 PPT课件.ppt

1、支原体 Mycoplasma,第18章,支原体 缺乏细胞壁、呈高度多形性、可通过除菌滤器、能在无生命培养基中生长繁殖的最小的原核细胞型微生物,第一节 概述,柔膜体纲,支原体目,肺炎支原体，人型支原体，生殖支原体，穿透支原体，发酵支原体，梨支原体,解脲脲原体,支原体分类,支原体科,无胆甾原体科,螺原体科,支原体属,脲原体属,一、生物学性状,（一）形态 菌体大小0.30.5 m 无细胞壁 高度多形性：球、杆、丝状和分枝状等 Giemsa染色较好，染成淡紫色；G-,（二）结构 细胞膜内外两层为蛋白质及糖类，中层为脂类（磷脂为主），胆固醇位于磷脂分子之间，对维持细胞膜的完整性有作用，凡作用于胆固醇的物

2、质，如皂素、毛地黄甙、二性霉素B等均能破坏细胞膜致其死亡 特殊的顶端结构： 黏附宿主上皮细胞表面， 与支原体的致病有关,（三）培养特性 营养要求高于一般细菌：10%20%人或动物血清以提供胆固醇与其它长链脂肪酸，多数还需添加酵母浸液、组织浸液、核酸提取物和辅酶等 pH：适宜7.68.0（7.0易死亡），但解脲脲原体最适pH5.56.5 兼性厌氧，大多寄生性支原体在37、微氧环境（含5%CO2和90%N2）中生长最佳 繁殖方式多样：二分裂繁殖外，还有分节、断裂、 出芽或分枝等方式,固体培养基： 27天长出直径约10600m的典型的“油煎蛋”样菌落：低倍镜下见菌落呈圆形，中心致密隆起，深入琼脂，外

3、周由颗粒包绕 液体培养基： 清亮，用颜色变化单位 （color changing unit, CCU）表示,需用放大镜/低倍显微镜观察,支原体典型菌落,支原体与细菌L型的异同点,不同点,缺乏细胞壁，形态多样，能通过滤菌器 固体培养菌落呈荷包蛋样或颗粒状 临床表现相似间质性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等,相同点,（四）抗原结构（自学） 补体结合试验可检测糖脂类抗原 ELISA试验可检测蛋白质类抗原 血清抗体可用生长抑制试验（growth inhibition test, GIT）和代谢抑制试验 （metabolic inhibition test, MIT）以鉴定,（五）抵抗力 对化学消毒剂敏感，

4、对结晶紫、醋酸铊、亚 碲酸钾有抵抗力 对影响细胞壁合成的抗生素如青霉素类天然耐受，但对干扰蛋白质合成的抗生素如多西环素、交沙霉素等敏感,二、致病性与免疫性,（一）主要致病机制 黏附素：黏附呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞 生物被膜：抗吞噬作用并形成多种耐药性 毒性代谢产物：神经毒素、磷脂酶C、核酸酶、过氧化氢和超氧离子均能引起宿主黏膜上皮细胞或红细胞的病理损伤 脂蛋白：被免疫细胞识别后释放促炎细胞因子而引起组织损伤 其它：穿透支原体黏附并侵入CD4T细胞引起免疫功能损伤,（二）所致疾病 支原体存在广泛，多不致病 肺炎支原体引起原发性非典型性肺炎 解脲脲原体、人型支原体和生殖支原体可引起泌尿生殖系统感

5、染和不育症 穿透支原体和发酵支原体为艾滋病的辅助致病因素,（三）免疫性 体液免疫：膜蛋白的抗体包括IgM、IgG和sIgA，sIgA在局部黏膜表面阻止支原体感染 细胞免疫：主要是特异性CD4Th1细胞分泌细胞因子活化巨噬细胞而清除支原体感染,第二节 主要致病性支原体,0.20.3m，高度多形性: 球形、球杆状、棒状、分枝状和丝状； 初次分离应在含血清和新鲜酵母浸出液的培养基中，一般10天左右长出菌落；多次传代后生长加快，菌落呈“油煎蛋”状； 能发酵葡萄糖，不能利用精氨酸与尿素； 对美蓝、醋酸铊、青霉素不敏感,一、肺炎支原体,一、生物学性状,（一）致病性 主要经飞沫传播，大多数发生于夏末秋初，5

6、15岁青少年发病率最高 含特殊的顶端结构：P1表面蛋白(170kDa)和P30 (32kDa)为主要的黏附蛋白，使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮 肺炎支原体具有超抗原作用，能刺激炎症细胞在感染部位释放大量的淋巴因子(TNF-、IL-1、IL-6)引起组织损伤,二、致病性与免疫性,（二）所致疾病 原发性非典型性肺炎 临床以咳嗽、发热、头痛、咽痛和肌肉痛为主，有时并发支气管肺炎，个别病人发生呼吸道外并发症，如皮疹、心血管和神经系统症状,（三）免疫性 血清特异性IgM、IgG及sIgA和致敏的淋巴细胞 呼吸道局部黏膜产生的sIgA对防止再感染有较强保护作用 出现IgE介导的I型超敏反应，促使哮喘病急性发

7、作,（一）分离培养 痰或咽拭子接种在SP-4培养基，培养12周，挑选可疑菌落，经形态学、糖发酵、溶血性、血细胞吸附试验进行初步鉴定，进一步鉴定需用特异性抗血清做GIT与MIT实验,三、微生物学检查法,（二）血清学检查 冷凝集试验 用病人血清与人O型血RBC或自身RBC混合，4过夜时可发生凝集，而在37时这种凝集又解离，但仅50左右的患者才出现阳性，此反应为非特异性 快速诊断 ELISA：P1和P30 mAbs 检测支原体 PCR：从痰标本中检测16S rRNA或P1基因,预防： 肺炎支原体减毒活疫苗和DNA疫苗在动物实验中有一定的预防效果，但无上市产品 治疗： 大环内酯类、喹诺酮类药物,四、防

8、治原则,二、解脲脲原体,形态：0.50.3 m，单个或成双排列 固体培养：48h后长出直径1530m “油煎蛋”状菌落;最适pH为5.56.5 生化反应：分解尿素，不分解糖类和精氨酸 抵抗力：对1:2000醋酸铊不敏感 抗原：多带抗原（MB-Ag）是其主要膜抗原，将解脲脲原体分为2个生物型，14个血清型,一、生物学性状,（一）致病机制 黏附于宿主细胞表面，吸取脂质和胆固醇，引起细胞膜损伤 产生毒性代谢产物如NH3，对宿主细胞有急性毒性作用 分泌IgA酶，降解IgA1，黏膜免疫功能受损 磷脂酶损伤宿主的细胞膜 脲原体脂质相关膜蛋白(LAMPs)加重局部阻止炎症损伤、导致宿主细胞损伤或凋亡、引起自身免疫病,二、致病性与免疫性,（二）所致疾病 非淋菌性尿道炎、前列腺炎、附睾炎等泌尿生殖道疾病，与自然流产、早产、死胎和男性不育有关,病原体检测 接种液体培养基，分解尿素产碱，酚红指示剂由橘黄色变为红色；再取0.2 ml培养物转种于固体培养基，在5%CO2和90%N2的环境中经37培养2448h，用低倍镜观察菌落，进一步鉴定需用特异抗血清做GIT与MIT,三、微生物学检查法（自学）,核酸检测 PCR方法：检测尿素酶基因、多带抗原（MB-Ag）基因和16SrRNA基因 此法快速、特异，适宜于大批量标本检测,加强宣传教育，注意性卫生，切断传播途径 大环内酯类、喹诺酮类、多西