机能学学生设计性实验 苦瓜提取物对血糖的影响

1、,苦瓜提取 物对血糖 的影响,立项背景（研究现状、趋势、研 究意义等）,高血糖的定义 高血糖对机体的影响 苦瓜（Momordica charactia L.Gourd） 苦瓜素和P-胰岛素,返回,返回,返回,苦瓜含有甾体皂甙如苦瓜素，类胰岛素肽类和生物碱，这些物质赋予苦瓜降血糖活性。苦瓜素刺激胰岛素的释放和阻碍血流中葡萄糖的形成，该功能可能在糖尿病特别是非胰岛素依赖型糖尿病治疗中起到巨大的作用。该降血糖功能归功于两种物质：,苦瓜素 胰岛素,（1）苦瓜素一种苦瓜果实的乙醇提取物中获得的结晶物质。苦瓜素在控制剂量50mg/kg的情况下降低了实验兔子总数42%的体内血糖。苦瓜素显示出胰腺和外胰腺作用

2、，并有轻微的止痉挛和抗胆碱功效。 （2）P-胰岛素（或v-胰岛素，因其为植物胰岛素）。其在结构上为大分子多肽构型，而药理学上与牛胰岛素相近。P-胰岛素由两条由二硫键联结的多肽链组成。对糖尿病患者的P-胰岛素的皮下的和肌肉给药具有降血糖作用，其作用高峰期和牛胰岛素的2小时后不同，出现在4-8小时后,苦瓜降糖物质,返回,实验动物 健康雄性Wistar小鼠，相同月龄 数量： 135 只 体重：18g22g 主要仪器： 血糖仪，血糖试纸，小鼠固定器，注射器(1ml,2ml,5ml)，容量瓶（100ml），天枰。,主要试剂和药品: 生理盐水 四氧嘧啶（由美国sigma公司提供，准确称取270mg，用生理

3、盐水定容至60ml，即4.5mg/ml。注射量为0.1ml/kg） 苦瓜提取物(市场通售的粗制品和精制品各30g，分别用蒸馏水定容至100ml，注射量为0.3g/kg) 弗氏完全佐剂(60mg/kg) 链脲佐菌素(175200mg/kg),实验方法,一、四氧嘧啶高血糖大鼠模型制备： 1、 实验准备 将135只小鼠饲养（条件为普通级，自由饮水，除实验应激外无其他不良刺激）三天后，禁食12h。 2 、分组 抽取120只小鼠随机分为6组，每组20只。前5组为实验组，后一组为对照组，并进行预实验 。 3 、余下15只继续以普通条件饲养，为之后实验备用,3.造模方法：实验组预先注射链脲佐菌素和弗氏完全佐

4、剂，再按照0.1ml/kg分别腹腔注射四氧嘧啶【4】，对照组注射等量的生理盐水，第一天注射总量的55% ，第二天注射总量的45%注射完后恢复进食【5】。造模后在日照时间10h以上的阳光充足的条件下饲养5天。注意观察和记录小鼠的精神状态，体重，饮水量，食量以及大小便情况。 4. 血糖测定 造模5天后，小鼠尾部静脉取血（取血前禁食12小时），按血糖仪说明书的方法测定小鼠的空腹血糖浓度。 5. 造模成功指标 上法测定的血糖浓度大于11mmol/L6, 为造模成功的型糖尿病小鼠。,二、苦瓜提取物的降血糖实验： 1.筛选上一实验步骤实验组中血糖值在10-25mmol/L的小鼠45只，按血糖水平随机分配为

5、一个高血糖模型对照和2个剂量组（模型组，苦瓜提取物粗品组，苦瓜提取物精品组），每组15只。之前余留的15只普通条件饲养小鼠分为正常组，共4个小组。,2.对照组，粗品组和精品组给予0.3g/kg的苦瓜提取物注射，模型组注射等量的生理盐水。注射0.5h后按下表指标进行试验和观察：,120只普通级饲养，自由饮水,三天后，禁食12h,20,20,20,20,20,20,注射链脲佐菌素和弗氏完全佐剂,按照0.1ml/kg分别腹腔注射四氧嘧啶,注射等量的生理盐水,第一天,第二天,按照0.1ml/kg分别腹腔注射四氧嘧啶,注射等量的生理盐水,日照时间10h以上的阳光充足的条件下饲养5天观察和记录小鼠的精神状

6、态，体重，饮水量，食量以及大小便情况,小鼠尾部静脉取血（取血前禁食12小时），按血糖仪说明书的方法测定小鼠的空腹血糖浓度,第一组,第二组,第三组,第四组,第五组,第六组,返回,上一步骤中抽取的45只高血糖小鼠,正常小鼠,苦瓜提取物粗品组,苦瓜提取物精品组,高血糖模型对照组,正常组,15,15,15,15,给予1ml/kg的粗品苦瓜提取物注射,给予1ml/kg的精品苦瓜提取物注射,注射等量生理盐水,给予1ml/kg的精品苦瓜提取物注射,尾尖取血测定各组小鼠血糖值,在4小时后测定小鼠的空腹血糖浓度，并记录数据,返回,观察指标：,观察各组小鼠注射苦瓜提取物前后的血糖浓度数值。,数据的收集及处理方法： 通过仪器测量血糖值，取同一组别实验所测血糖平均值，不同组别间的对比。计算P值（统计学P0.05意义的计算）。,预期结果： 1. 正常组血糖基本无变化。 2. 模型组血糖基本无变化。 3. 苦瓜提取物粗品组和精致苦瓜提取物组血糖均明显降低。,参考文献： 1. 苦瓜的营养价值素食网.引用日期2012-11-18. 2. 霍宇，谢金鲜 广西中医学院学报 2010年02期 3.夏柯 四川大学 苦瓜甙A的含量分析和苦瓜籽总甙体外抗病毒活性研究 .引用日期2012-11-18. 4. 陈建国 梅松等