实验三 发酵罐使用及灭菌.ppt_第1页
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文档简介

1、实验三 培养基的制备、实罐灭菌 及接种培养技术,一、实验目的： 学会反应器实罐灭菌，掌握无菌接种技术，掌握培养方法。二、实验原理： 发酵罐能够提供微生物生长的适宜环境。三、实验器材 发酵罐，带灭菌培养基等。,L1523发酵罐操作流程,1、发酵前准备工作 1) 把进气过滤器、补料瓶、及可能用到的各种插针在高压锅内灭菌。 2) 打开水、电、空压机 3) 打开发酵罐总电源 4) 校正PH电极。之后插入发酵罐内 5) 将提前配好的培养基放入罐内，并加入消泡剂。,四、操作步骤,2、发酵过程,1) 灭菌, 插入所需电极，调整消泡电极高度，关闭罐盖上所用接口(确认无任何软管连接)。 启动搅拌，设定转速在30

2、0-500 r/min。 设定温度setp1的值为“0”，使夹套进水。保持约2分钟后，再改回培养温度。 打开排气。 设定灭菌菜单，确认后启动灭菌模式，开始灭菌。 具体方法见后,A到95时，系统出现提示，此时关小排气(关闭 后，回 旋1/3圈)，按“OK”。 B当温度达到121时，较正PO2零点。 C降温到100时，系统出现提示。此时，在火焰保护下接好进气插针，并通入压缩气体。 D到达培养温度后，设定好转速、通气量后。此时校正PO2的100%。,2）接种,3）补料,4）取样,补料时在火焰保护下插针，需加酸时禁止采用HCl (对不锈钢有腐蚀性),通过蒸汽灭菌罐底取样口取样,5) 放料,放料前，务必先要关闭温度和转速，确认面板显示“OFF”,接种可采用两种方法： 一是采用火焰保护，二是用蠕动泵流加。,3、清洗,4、关机 在关闭电源前，确认温度和转速处于“OFF”状态。电源关闭后，及时关闭冷却水。发酵罐在不使用的情况下，一般保持一定体积的清水。,在不开罐的情况下，放入水，加大转速即可。废水可以

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