临床微生物学尿培养操作规范PPT课件.ppt

1、临床微生物学尿液培养操作规范，中国医学会检验医学分会，临床微生物学尿液培养操作规范，尿液标本采集及送检实验室检查结果观察报告，尿路感染，尿路感染，概念：证候分类：上尿路感染(如肾盂肾炎)，下尿路感染(如膀胱炎)，前列腺感染也可发生于男性，不同部位同时感染也很常见。感染人群：各年龄段，易患女性，男女比例为1尿路感染，症状：发热、尿频、尿急、排尿困难和耻骨上压痛。临床表现可能因患者的年龄和健康状况而异。诊断方法：细菌学检查，主要致病菌可能因尿路感染原因不同而不同(表1)，表1尿路感染原因及常见致病菌1。尿液样本的收集和运输。采集指征：(1)尿路感染的典型症状；(2)肉眼脓尿或血尿；(3)尿常规检查

2、显示白细胞或亚硝酸盐阳性；(4)无其他局部症状的不明原因发热；(5)留置尿管患者出现发热；(6)膀胱排空功能受损；(7)术前泌尿系统疾病。1.尿液样本的收集和运输。2.收集方法：使用抗生素前，注意避免污染。(1)清洁中段尿：睡前最好少喝水。起床后用肥皂水清洗会阴。女性应该用手分开大阴唇。男性应翻转包皮，仔细清洗，然后用清水冲洗尿道口周围区域；开始排尿，排干前面的尿液，约10-20毫升中间的尿液直接排入一个特殊的无菌容器，立即送去检查，并在2小时内接种。它简单易操作，最常用时容易污染环境。应该指导病人正确保管。1.尿液样本的收集和运输；2.收集方法：(2)耻骨上膀胱穿刺：用无菌注射器直接穿过膀胱

3、经皮肤消毒吸尿是评价膀胱内细菌感染的“金标准”,患者难以接受主要用于厌氧菌培养的尿液标本的收集或难以保留标本的婴儿。2.收集方法：(3)直接导尿：会阴按常规方法消毒后，通过尿道将导尿管直接插入膀胱，可减少尿样污染，准确反映膀胱感染。然而，细菌有可能从下尿道进入膀胱，从而导致二次感染。首先，收集和运输尿样。二、收集方法：(4)儿童收集袋：无自控能力的儿童很难避免会阴部菌群污染造成的假阳性，因此只有在检测结果为阴性时才有意义。如果检测结果为阳性，应结合临床实践进行分析。如有必要，可通过耻骨上膀胱穿刺或导管插入术收集尿液进行复查。(1)尿液样本的收集和运输；(2)收集方法：(5)留置导管：首先对导管

4、外部进行消毒，并用注射器穿刺导管，按照无菌操作方法吸收尿液，防止与消毒剂混合。1.尿液样本的收集和运输。收集容器：(1)应由惰性材料制成；(2)清洁、无菌、有盖、密封、防漏；(3)不含防腐剂和抑菌剂；(4)宽口、宽底、50毫升容积(5)盖子容易打开。1.尿液样本的收集和运输；4.标本运输：及时检查和接种，室温保存时间不得超过2 h(夏季保存时间应适当缩短或冷藏)；4.冷藏保存时间不得超过8小时，但应注意冷藏标本不能用于淋病奈瑟菌培养。2.样本接受。1.申请表受理：除患者基本信息外，还应包括标本采集时间、采集方法、是否使用过抗生素、申请表是否完整。2.样品验收：(1)样品标识是否与二、标本验收，

5、三。不合格标本处理：(1)申请表信息不完整者，应尽量联系临床医生；(2)标识不一致的样品、检验不合格的容器、检验时间超过规定时间的，应注明原因，退回，并要求重新保留和记录。3.实验室检查1。直接涂片检查：不需要常规涂片检查。对于疑似被淋病奈瑟菌、念珠菌属感染的标本。或者结核分枝杆菌，可以用无菌吸管吸取5-10毫升尿液，放入无菌试管中，以3 000-4000转/分钟的速度离心30分钟。倾析上清液，革兰氏染色或抗酸染色后取沉淀涂片进行显微镜检查。3。实验室检查。细菌培养：(1)普通培养：轻轻旋转采集标本的容器，混合均匀，取1升带定量接种环的尿液，涂在接种血平板和麦康凯平板(或中国蓝平板)上，353

6、7培养1824小时，观察结果。导尿、耻骨上膀胱穿刺和抗生素治疗患者应增加10 l接种量。(2)特殊培养：对于怀疑感染苛养菌的患者，应采用耻骨上膀胱穿刺或导管插入术采集样本，并应种植巧克力板，在5% CO2中培养48小时。检查淋球菌和结核分枝杆菌感染时，不必进行定量培养，而是离心后取尿沉渣进行培养，以提高阳性率。(3)实验室检查；(2)细菌培养；(3)当普通培养物无菌生长18-24小时时，所有培养基应继续培养24小时。4.结果观察和报告。1.结果观察和评价：(1)菌落计数：计数平板上的菌落数，如果接种量为1 l，将菌落数乘以103；如果接种量为10升，将平板菌落数乘以102，即每毫升尿液中的细菌

7、数(CFU/毫升)。如果菌落生长过多，无法准确计数，报告105 CFU/毫升。结果观察和报告1。结果观察与评价：(2)结果评价：正常情况下，肾向膀胱排泄的尿液是无菌的，但膀胱内的尿液经尿道排泄时，会被下尿道正常菌群污染，产生细菌。因此，需要正确评价不同方法获得的尿液标本的培养结果，从而有效指导临床合理治疗。一般来说，清洁尿液样本中的单个菌落数为105 CFU/毫升可能是一种感染。5104CFU/ml可能被污染，需要根据具体情况进行评估。表2不同方法收集的尿样培养结果评价；4.观察和报告结果；2.阴性培养结果报告：培养48小时后没有菌落生长，这意味着阴性。如果您接种了1升尿量的疫苗，您应该报告“

8、培养48小时，菌落计数为103 cfu/ml”；应接种10升尿量，应报告“培养48小时，菌落计数102 CFU/毫升”。4.结果观察和报告。阳性培养结果报告：无意义阳性培养结果报告：纯培养报告“禾本科植物生长，菌落计数：CFU/毫升”；混合菌生长报告“禾本科细菌和禾本科细菌的混合生长”。显著阳性培养结果报告：报告菌落计数、细菌种类名称和标准抗微生物药敏试验结果。附录：1。尿液培养标本的接种：细菌污染、定量接种、定量接种方法的合理评价：直接划线法和倾注平板法。直线接种法的关键是保证接种量的准确性。可以使用1升或10升定量接种环。方法是校准接种环，并在垂直方向上握住它，使环刚好浸入尿液表面(尿液不

9、能接触环上方的环柄)，然后取尿液进行接种。在没有定量接种环的实验室中，可以用无菌的5 l微量移液管吸取尿液并将其加到平板上，然后用接种环来排列接种。将平板上的菌落数乘以200，即每毫升尿液中的细菌数(CFU/毫升)。附录：2 .尿液培养试验培养基的选择：无平板适用于尿液培养附录3。尿液培养结果评价：菌落总数为105菌落单位/毫升仅是诊断尿路感染的一般标准。对于一个实验室来说，它太松散，被滥用和浪费，太严格和漏诊。与临床医师密切合作，根据不同情况制定不同的解释标准：尿液培养中的菌落计数会受到多种因素的影响，即使菌落数很少，对某些患者也有明显的临床意义。因此，对于5 104 CFU/毫升的菌落数，在“标准”中被认为没有意义的阳性结果不应随意丢弃。如有必要，应根据患者的具体情况或联系临床医生后决定是否进行细菌鉴定和药敏试验。判断结果时应注意：(1)抗生素处理抑制了细菌的生长；(2)尿液稀释，尿液比重为8。5，细菌生长受阻。(4)尿频时，细菌在膀胱内停留时间短，菌落数减少。(5)标本中混入的尿道口消毒剂影响细菌繁殖，菌落数少；(6)不同种类的细菌具有不同的生长率、不同的营养需求和不同的菌落数。一些文献推荐革兰氏阴性菌的菌落数为105菌落单位/毫升，而革兰氏阳性菌的菌落数为104菌落单位/毫升。附录：4。尿液培养试验中的常见错误：(1)将尿样接种