病毒学肝炎病毒2.ppt

1、,肝炎病毒 (Hepatitis Virus),乙肝病毒生物学性状,致病性与免疫性,肝炎病毒概论,防治原则,主要内容,微生物学检测法,写给某著名肝病专家的,一 封 信,我是某重点大学的一名女大学生，在一次 体检时偶然发现了“乙肝 对这个 “ 沉重的打 击 ” 我深为恐惧。虽然现在肝功能正常，毫无 症状，但害怕将有一天会被乙肝病毒吞没，因 而痛苦万分。我害怕会把这可怕的病传染给别 人，也生怕父母知道了会伤心，只能把这一切 痛苦深深埋在自己的心里。救救我吧！,病毒性肝炎是以肝细胞发生变性、坏死，以单核细胞和淋巴7天连锁酒店细胞浸润为主的炎症。,甲型肝炎病毒（hepatitis A 乙型肝炎病毒（h

2、epatitis B 丙型肝炎病毒（hepatitis C 丁型肝炎病毒（hepatitis D 戊型肝炎病毒（hepatitis E 庚型肝炎病毒（hepatitis G 输血传播病毒（transfusion,virus，HAV） virus，HBV） virus，HCV） virus，HDV） virus，HEV） virus，HGV） transmitted virus, TTV）,五种肝炎病毒比较,病例：黄蓉, 32岁, 南方医科大学食堂厨师。因发热、 厌食、肝区疼痛来院就诊。,主诉：2周前发热后全身乏力、腻油食, 肝区疼,痛难忍, 近日关节痛, 皮肤有荨麻疹。,查体: 手臂有小片的荨

3、麻疹, 肝大右肋下3cm, 压 痛(+), 质地稍硬, 脾可触及边缘, 现妊娠3个多月。,实验室检查: 碘反应+, 硫酸锌浊度20, GPT,250；HBsAg(+)，抗-HBs()，HBeAg(+)，抗- HBe(-)，抗-HBcIgM(+)。,乙型肝炎病毒,60% 10% 3000万,受过HBV感染 HBsAg携带者（1.2亿） 慢性肝炎患者,100万/年 急性肝炎患者,35万/年,死于肝癌及肝硬化,75150万女性HBsAg携带者通过 母婴传播使60100万新生儿感染,我国感染现状,全世界慢性HBV感染者的分布状况,1963年布兰博格(Blumberg) 在研究人 类血清蛋白多型性时，发

4、现澳大利亚土著人血清中存在一种特殊7天连锁酒店的抗原，称为“澳大利亚抗原”。随后发现这种抗原是HBV的表面抗原。 1970年Dane证实了在病人血清中存在HBV颗粒。,乙肝病毒的发现,HBV生物学性状,1. 形态与结构 电镜下可见三种不同形态的颗粒： 大球形颗粒(完整病毒体)：直径42nm，Dane颗粒。 小球形颗粒：直径22nm，过剩衣壳，含HBsAg。 管形颗粒：小球形颗粒“串联而成”，长100500nm，内无核酸，具有HBsAg相同的抗原性。,病人血清标本,小球形颗粒 大球形颗粒 管形颗粒,球形,双层衣壳,外衣壳(包膜)： 双层脂质,HBsAg,内衣壳(核衣壳):,HBcAg+HBeAg

5、,核心: 双股未闭合环状DNA+DNA聚合酶,2.基因组及编码产物,HBV DNA的大小为3215bp ，是一未完全闭合双链环状DNA，正链长度约为负链的50%100%。,DNA多聚酶: 逆转录酶聚合酶功能; 可作为抗HBV复制药物的靶点。,s,x,c,p,负链含有S、C、X、P 4个开放读码框; 读码框之间相互重叠。,S区：S、PreS1、PreS2基因,HBsAg+PreS1+PreS2（抗原）,C区：C基因和前C基因， HBcAg+HBeAg P区：P基因，DNA多聚酶 X区：X基因，HBxAg,反式激活肝细胞癌基因的转录，与肝癌发生、发展有关,3.复制,有逆转录和前基因组形成过程,侵入

6、：PreS1 PreS2,装配与释放 复制 逆转录 闭环和超螺旋 前基因组的形成,4.抗原组成,外衣壳蛋白HBsAg，PreS1及PreS2抗原 表面抗原(HBsAg)：三种不同(颗粒)形式，HBV感染的主要标志；滴度越高，传染性也越强。制备疫苗最主要成分；抗-HBs为乙肝恢复的标志, 对HBV具有免疫力。 HBsAg有四种亚型adr, adw, ayr, ayw; 抗原表位a共同; d/y 和 w/r 互相排斥。 PreS1及PreS2抗原具有与肝细胞表面受体结合的表位，抗原性比HBsAg更强；抗-PreS1及PreS2能阻断HBV与肝细胞结合而起抗病毒作用。,4.抗原组成,内衣壳蛋白 HB

7、cAg, HBeAg 核心抗原(HBcAg): Dane颗粒核衣壳表面; 外被HBsAg（外衣壳）覆盖，故血清中很 难检出。抗原性强, 具有杀伤性T细胞表位。 抗-HBcIgM表明HBV在体内复制, 消失表示康复或慢性化; 抗-HBcIgG为非保护性抗体，低滴度提示既往感染；高滴度提示急性感染。,e抗原(HBeAg): 由PreC及C基因共同编码，可溶性(分泌)蛋白质, 仅见于HBsAg阳性的血清中, 是HBV复制和血清具有高度传染性的指标。 抗-HBe可通过CDC清除受染的肝细胞，有一定保护作用。抗-HBe阳性则表示传染性小，病毒复制不活跃。抗-HBe出现于HBV急性感染的恢复期，持续时间较

8、长。,4.抗原组成,5.动物模型与细胞培养,细胞培养：无,动物模型：黑猩猩,鸭、土拨鼠、地松鼠,HBV DNA转染系统(筛选抗病毒药物) S基因转染系统(制备疫苗),6.抵抗力,对热、低温、干燥、紫外线抵抗力很强 不能用70%乙醇灭活 37活性维持7天，-20保存20年 0.5%过氧乙酸、5%氯酸钠和3%漂白粉 敏感,强,二、致病性与免疫性,患者,血液,潜伏期(30-160天),传 染 源,无症状 HBV 携带者,尿液 精液 唾液 乳汁,急性7天连锁酒店活动期 慢性活动期,1.传播途径,血液、血制品： 微量污染血经微小伤口即可感染,性传播及密切接触传播,母婴传播,母婴传播,胎盘剥离时微量血,液

9、漏至胎循环中,产前或产程中胎儿,吸入母亲的血液、 羊水、阴道分泌物 哺乳等密切接触,HBsAg（+）：40% HBsAg（+）HBeAg（+）：83%,2.损伤肝细胞机制,肝细胞 损害,免疫病 理损伤,肝特异性 脂蛋白 （LSP）,型超敏反应：病毒抗原 进入肝细胞，刺激免疫系统产 生病毒特异性抗体；肝细胞膜 自身结构发生了改变，暴露的 LSP 诱 导 宿 主 产 生 自 身 抗 体(抗-LSP)。这些抗体和肝细 胞膜上的相应抗原结合，形成 免疫复合物，继而激活补体， 诱发CDC，激活巨噬细胞、K 细胞引起ADCC效应，从而引 起肝细胞的损害。,型超敏反应,抗 - HBV 抗 体 与 抗 原结合

10、形成的免疫复合物 未能被及时清除，沉积于 肾小球基底膜或关节滑液 囊等部位，激活补体系统， 导致型超敏反应，引起 关节炎、肾小球肾炎等。 如果沉积在肝内小血管， 可导致肝毛细管栓塞，引 起肝坏死，临床上的重症 肝炎。,型超敏反应：乙肝病毒侵入肝细胞内增殖时，受染,细胞膜表面有大量的HBsAg或HBcAg表达，同时肝细胞膜,受损暴露出LSP，从而使受染肝细胞为免疫系统所识别，,引起迟发型超敏反应及Tc直接杀伤靶细胞，TD释放淋巴,因子，增强和激活其它T细胞，引起非特异性杀伤，K细胞,发挥ADCC作用，NK细胞发挥自然杀伤作用，导致肝细胞,损害。,免疫耐受,HBV感染者特异性细胞免疫水平 和抗体水

11、平处于较低或完全缺乏,无症状乙肝病毒携带者 或慢性肝炎,临床表现,无症状携带者,急性肝炎,慢性肝炎,重症肝炎,宿主受HBV感染的肝细胞数量不多， 宿主的免疫应答处于正常水平时,常表现为急性乙型肝炎,宿主的免疫应答水平较低时,表现为慢性干果网乙型肝炎,当宿主对HBV无免疫应答时,表现为HBV携带状态,宿主受HBV感染的肝细胞数量众多， 宿主的免疫应答超过正常水平时,常表现为重症肝炎,()急性乙肝,早期症状是疲乏不适，或有轻度,的胃肠道紊乱，约有10的患者发生,血清病，如肾小球肾炎、关节痛等。,当典型的肝炎症状出现时，血清病消失，,转氨酶升高。,肝细胞能合成、分泌、储存多种酶。当 肝细胞变性、坏死

12、，则酶进入血流，使血清 中酶含量增高。由于谷丙转氨酶在肝脏中含 量最高，肝细胞损害时在血清中最早出现， 故临床上常以谷丙转氨酶增高作为肝细胞损 害和炎症急性活动的指标，对病情估计和预 后有一定的参考价值。,发病第周，恶心、呕吐、厌食、 右下腹痛最明显，约有半数患者出现,黄疸。,急 性 黄 疸 病 人,肝细胞分泌的胆汁,将红细胞的残骸胆,红素清除出血液循环，,从毛细胆管引入肠道，,排出体外。所以当肝有,疾患时，便会发生胆红,素代谢障碍，表现为血,中胆红素增多。由于胆,红素与弹性蛋白有较强 的亲和力，临床表现为 含弹性蛋白的巩膜、皮,第周或第三周症状 逐渐消退，但体力完全恢,肤黄染，出现黄疸。,复

13、则需数月。,有0.20.5黄疸型乙型肝炎患者 可发展为急性暴发性肝炎，表现为起 病10日以内出现黄疸迅速加深，肝脏 迅速缩小，有出血倾向，腹水迅速增 多，出现肝性脑病、凝血病和体液电,解质失衡，死亡率高。另一少见的情 况是急性乙肝发展为亚急性肝坏死， 其中一部分患者可能进展到坏死性肝 硬化。,因感染HBV 而饱受痛苦 的妇女,()暴发性肝炎,约有10急性肝炎出现持续抗原血症，全身症状或有或无。,一部分人为轻微 的、非进行性的、非 损害性的慢性迁延性 肝炎，临床表现为食 欲不佳，反复出现疲 劳和消化道症状，有 时肝区不适，转氨酶 轻度升高，一般在12 个月内消退。,另一部分人则发展为进行性的、组

14、织学上呈损害性的慢性活动性肝炎，除上述症状明显加重以外可伴有蜘蛛痣、肝掌、肝病面容，转氨酶反复波动等，以后可能逐步进展为肝硬化或肝癌。,()慢性肝炎,病毒变异与免疫逃逸,DNA复制的逆转录过程中，,DNA聚合酶缺乏校正功能,变异可发生在S、C、P、X任一区域,点突变、缺失、插入、重排,导致乙肝慢性化,HBV与原发性肝癌有密切关系,目前已有大量证据：,HBsAg携带者较无HBV感染者发生肝,癌的危险率高217倍;,新生土拨鼠感染WHV, 3年后100发,生肝癌, 未感染者无一发生;,HBxAg是致癌的启动因子。,肝癌组织检测, 约50含X基因片段，,三、微生物学检查法,2. HBV DNA的检测

15、,方法：核酸杂交技术和PCR 药物治疗疗效的考核指标,1. HBV抗原抗体的检测：“两对半”,方法： ELISA常用于临床 临床意义：乙肝诊断; 判断传染性; 判断预后; 筛选献血员; 流行病学调查,3. HBV DNA多聚酶检测 判断病毒复制的指标,乙型肝炎的临床表现与血清学反应,窗口期,窗口期,乙肝“两对半”试验的结果分析 HBsAg HBeAg 抗-HBs 抗-HBe 抗-HBc 结果分析 HBV感染或无症状携带者 急性或慢性乙肝，或无症状携带者 急性或慢性肝炎(传染强,“大三阳”） 急性感染趋向恢复（“小三阳”） 既往感染过恢复期 既往感染过恢复期 既往感染或“窗口期” 既往感染或接种

16、过疫苗,四、防治原则,1、主动免疫乙肝疫苗,血源疫苗 新生儿 （阻断母婴传播）,基因工程疫苗 高危人群（血透、肾 移植、传染病院）,注射3针（0、1、6方案） 抗体阳转率80.396.2,好,2、被动免疫 高效价HBIg,用于紧急预防,一周内注射有效,核苷类似物：迅速抑制HBV复制,拉米夫定、泛昔洛韦 阿昔洛韦、阿糖腺苷,联合治疗慢性HBV感染势在必行,干扰素,IFN-的疗效最好,3、治 疗,无症状慢性HBsAg携带者需要看医生吗？,能结婚吗？,无症状慢性携带者在临床上往往是指，血清中 HBsAg持续阳性个月以上而无肝炎症状及体征、肝功能正常者。,发现单项HBsAg阳性者，应在半个月至个月 后

17、复查，同时查抗-HBe、 7天连锁酒店抗-HBs、HBeAg及ALT。 如ALT增高，HBsAg复查阳性者可进一步检测HBV DNA和DNAP等。如ALT明显增高，应住院治疗。 如果正常，相隔个月到年要找医生检查一次， 一旦发现肝功能异常就需治疗。,能否结婚的关键是看其是否具有传染性。 单项HBsAg阳性者和其对象在结婚前都要检 查HBeAg和抗HBe。,（）抗HBe阳性或抗HBs阳性的HBsAg 携带者传染性低，对周围人群也不构成明显 威胁，可以考虑结婚。,HBsAg、抗 HBs、抗HBc,抗HBs阳性,都是阴性,喜喜,结婚,0、1、6方案 注射乙肝疫苗,六个月后,足够保护性抗体,（）HBeAg阳性的HBsAg携带者有传染性，则需普查对象的血，如：,抗HBe阳性或抗HBs阳性的HBsAg携带者传染性低，不影响谈恋爱；但当发现恋人HBeAg、HBsAg阳性时，在恋爱中应注意一切生活行为，如不要Kiss，不要共用牙刷毛巾，要分餐吃饭等，一般不会传染。不要因担心被感染上HBV而轻易分手。,孕妇在产前检查时发现乙肝表面抗原,阳