第十章 巴比妥及苯骈二氮杂卓类镇静催眠药物的分析课件

1、第十章 巴比妥及苯骈二氮杂卓类镇静催眠药物的分析,1,PPT学习交流,巴比妥类和苯骈二氮杂卓类药物是一类临床常用的催眠镇静药。由于这类药物应用广泛，容易因不合理使用而引起中毒，因此，需要对本类药物的原料、制剂进行分析。,2,PPT学习交流,第一节 巴比妥类药物分析一、巴比妥类药物的结构与性质,巴比妥类药物母核为巴比妥酸,5,5二取代的巴比妥类药物 1,5,5三取代的巴比妥类药物 C2位硫取代的硫代巴比妥类药物,3,PPT学习交流,5,5-取代的巴比妥类药物,5,4,PPT学习交流,5,PPT学习交流,6,PPT学习交流,7,PPT学习交流,C,C,N,C,N,H,O,O,O,H,3,C,C,H

2、,3,1,5,5-取代的巴比妥类药物,己琐巴比妥（药典未收载）,5,1,8,PPT学习交流,硫代巴比妥类药物,硫喷妥钠,H,C,C,C,O,N,O,N,C,S,N,a,C,2,H,5,C,H,3,C,H,2,C,H,2,C,H,C,H,3,9,PPT学习交流,巴比妥类药物的基本结构分为两部分： 一部分为：共性部分，为巴比妥酸环状结构 另一部分：个性部分，即R1、R2取代基，区别各种巴比妥类药物,10,PPT学习交流,巴比妥类药物的物性： 性状：一般为白色结晶或结晶性粉末，具有一定的熔点 溶解性：游离巴比妥类药物微溶或极微溶于水，易溶于乙醇及有机溶剂,相反，钠盐容易溶于水，而不溶于有机溶剂, 与

3、碱液共沸时水解开环,11,PPT学习交流,巴比妥类药物的性质 1.弱酸性,1，3二酰亚胺基团,12,PPT学习交流,具有弱酸性（pKa为7.38.4）,与强碱的成盐反应：,C,O,N,H,C,N,C,O,O,H,R,1,R,2,+ N,a,O,H,C,O,N,H,C,N,C,O,O,N,a,R,1,R,2,+ H,2,O,加酸酸化后，析出游离的巴比妥类药物，可测定熔点或进行化学反应,13,PPT学习交流,2. 水解反应,+ 2Na2CO3,C,HCOONa,R,1,R,2,+2NH3,C,O,N,H,C,N,C,O,O,H,R,1,R,2,+ 5N,a,O,H,红色石蕊变蓝,1，3二酰亚胺基团

4、,14,PPT学习交流,3、易与重金属离子反应,硫喷妥钠 +,绿色,铜吡啶试液,吡啶,合适的pH溶液中,15,PPT学习交流,与钴盐的反应：,醋酸钴、硝酸钴、氧化钴,有机碱：异丙胺,16,PPT学习交流,4、与香草醛（Vanillin）的反应,活泼,BP（2005）用于鉴别戊巴比妥,17,PPT学习交流,5. 具有紫外特征吸收,A、H2SO4溶液(0.05mol/L),B、pH9.9缓冲溶液 ，发生一级电离，最大吸收240nm,C、pH13 NaOH溶液，5,5二取代巴比妥类药物有二级电离，最大吸收255 nm ，1,5,5三取代巴比妥类药物不发生二级电离，最大吸收仍为240nm,18,PPT

5、学习交流,特例： 硫喷妥,酸性溶液,碱性溶液,255nm，随碱性增强，消失,19,PPT学习交流,二、鉴别试验 （一）丙二酰脲类反应 主要用于苯巴比妥、异戊巴比妥及其盐、司可巴比妥钠的鉴别。,20,PPT学习交流,1.与银盐的反应,C,O,N,C,N,C,O,C,R,1,R,2,O,N,a,A,g,+,N,a,H,C,O,3,N,a,N,O,3,+,C,O,N,H,C,N,C,O,C,R,1,R,2,O,N,a,+,A,g,N,O,3,+,N,a,2,C,O,3,21,PPT学习交流,N,a,N,O,3,+,C,O,N,C,N,C,O,C,R,1,R,2,O,A,g,A,g,A,g,N,O,3

6、,+,C,O,N,C,N,C,O,C,R,1,R,2,O,N,a,A,g,22,PPT学习交流,2.与铜盐的反应,23,PPT学习交流,特例： 含硫巴比妥类药物显绿色，硫喷妥钠与铜盐反应显绿色。,与铜盐的反应可以用于鉴别、区别巴比妥类和硫代巴比妥类药物,铜吡啶试液要现用现配,硫喷妥钠 +,绿色,铜吡啶试液,吡啶,24,PPT学习交流,（二）熔点的测定 原理： 巴比妥类药物可直接用药典方法测定熔点 钠盐，利用游离巴比妥类药物与其钠盐溶解性质差异， 测定析出的游离巴比妥药物的熔点。 巴比妥类的钠盐酸 游离巴比妥类药物 过滤 洗涤 干燥 测熔点,25,PPT学习交流,（三）利用特殊取代基或元素的鉴别

7、反应 1.利用不饱和取代基的鉴别试验 司可巴比妥钠,与碘、溴试液发生加成反应，使溴试液褪色 与高锰酸钾发生氧化反应 把紫色高锰酸钾还原为棕色的二氧化锰,丙烯基,或溴液,26,PPT学习交流,2.利用芳环取代基的鉴别试验苯巴比妥及其钠盐 硝化反应,27,PPT学习交流,与亚硝酸钠-硫酸的反应 含有苯环取代基，可与亚硝酸钠-硫酸反应，生成橙黄色产物，并随即转成橙红色。 特点：用于区分苯巴比妥与其它不含芳环取代的巴比妥类药物分离,28,PPT学习交流,与甲醛-硫酸的反应 苯巴比妥与甲醛-硫酸反应，生成玫瑰红色环。反应产物结构不明。 方法为:取本品约50mg，置试管中，加甲醛试液l m1，加热煮沸，冷

8、却，沿管壁缓缓加硫酸0.5m1，使成两液层，置水浴中加热，接界面显玫瑰红色。 特点：用于区分苯巴比妥与其它不含芳环取代的巴比妥类药物分离,29,PPT学习交流,3. 硫元素的鉴别试验 硫喷妥钠 例：硫喷妥钠,特点：用于区别硫代巴比妥与其它的巴比妥类药物,30,PPT学习交流,（四）红外分光光度法 采用标准图谱对照法,31,PPT学习交流,三、特殊杂质检查 （一）苯巴比妥的特殊杂质检查,32,PPT学习交流,1.酸度 目的：中间体的乙基化反应不完全时，会与尿素缩合产生苯基丙二酰脲，酸性较苯巴比妥强，能使甲基橙指示剂显红色， 检查方法：在一定量苯巴比妥供试品水溶液中，加甲基橙指示剂，不显红色即酸性

9、物质合格。,33,PPT学习交流,2.乙醇溶液的澄清度 目的：控制杂质苯巴比妥酸 原理：利用药物与杂质溶解性质的差异进行检查 （杂质苯巴比妥酸在乙醇溶液中溶解度小） 方法:取本品1.0g，加乙醇5m1，加热回流3min，溶液应澄清，则为合格。,34,PPT学习交流,3. 中性或碱性物质 目的：检查中间体的副产物2-苯基丁二酰胺、2-苯基丁二酰脲或分解产物。 原理；利用杂质和主成分在氢氧化钠试液中的溶解性质差异，用提取重量法测定杂质含量 在氢氧化钠试液：杂质不溶，而主成分可溶 在乙醚中：杂质可溶 用醚提取杂质后称重，测定其限量。,35,PPT学习交流, 方法:取本品1.0 g，置分液漏斗中，加氢

10、氧化钠试液lOml溶解后，加水5ml与乙醚25ml，振摇lmin，分取醚层，用水振摇洗涤3次，每次5m1，取醚液经干燥滤纸滤过，滤液置1O5恒重的蒸发皿中，蒸干，在105干燥1小时，遗留残渣不得超过3。,36,PPT学习交流,（二）司可巴比妥钠的特殊杂质检查,37,PPT学习交流,1.溶液的澄清度 司可巴比妥钠在水中极易溶解，水溶液应澄清，否则表明含有水不溶性杂质。 特点：新沸过的冷水溶解样品，目的是为了除去水中二氧化碳。,和司可巴比妥钠作用，析出司可巴比妥,38,PPT学习交流,2.中性或碱性物质 原理：利用杂质和主成分在氢氧化钠试液中的溶解性质差异（杂质不溶，而主成分可溶于氢氧化钠试液），

11、用乙醚提取杂质后称重，测定其限量。 要求：1g 供试品中乙醚提取物干燥后遗留残渣不超过3。,39,PPT学习交流,四、含量的测定方法 （一）银量法 原理：此类药物在适当的碱性溶液中，可与重金属离子反应，定量地形成盐。,终点指示：电位法指示（Ag电极为指示电极，饱和甘汞电极为参比电极）自身指示,反应摩尔比：11,溶剂系统：甲醇+3%无水碳酸钠（85年版改进）,40,PPT学习交流,适用范围：2005年版药典采用银量法测定苯巴比妥及其钠盐、异戊巴比妥及其钠盐以及它们的制剂。 特点：操作简便，专属性强，此类药物的降解产物和其他可能存在的杂质不和硝酸银反应 缺点：受温度影响较大，滴定终点不易观察,41

12、,PPT学习交流,方法的改进： 中国药典(1963,1977年版)采用在碳酸钠溶液中硝酸银直接滴定法，以所生成的沉淀30秒内不消失为终点。 中国药典（1985，1995，2000年版）改进了这种直接滴定目视判断的方法，沿用甲醇及3%无水碳酸钠作为溶剂，并采用银-玻璃电极系统电位法指示终点,42,PPT学习交流,注意事项： 测定时无水碳酸钠溶液要临用新配。 银电极在临用前要用硝酸浸泡12分钟，再用水淋洗干净后使用。 AgNO3滴定液应新鲜配制 终点指示：电位法指示（Ag电极为指示电极，饱和甘汞电极为参比电极自身指示）,43,PPT学习交流,（二）溴量法 原理：对5位取代基中含有双键的巴比妥类药物

13、，利用结构中所含的双键能和溴定量地发生加成反应的特点，采用溴量法测定 方法 司可巴比妥钠原料及其胶囊的测定,44,PPT学习交流,I22Na2S2O32NaINa2S4O6,+B,r,2,（,定量过量）,C,O,N,H,C,N,C,O,C,H,C,H,2,C,H,2,C,H,3,(,C,H,2,),2,C,H,C,H,3,O,N,a,C,O,N,H,C,N,C,O,C,H,C,H,2,C,H,2,C,H,3,(,C,H,2,),2,C,H,C,H,3,O,N,a,B,r,B,r,Br22KI2KBrI2,45,PPT学习交流,注意事项： 配制硫代硫酸钠滴定液时，要用新沸冷水配制 硫代硫酸钠滴定

14、液要放置1个月后，过滤标定后用。否则，要现用现标定 用基准重铬酸钾标定硫代硫酸钠滴定液 溴滴定液（0.1 mol/L）的配制： 取溴酸钾3.0 g与溴化钾15 g，加水适量使溶解成1000 ml，摇匀,KBrO35KBr6HCl3Br26KCl3H2O,46,PPT学习交流,操作中要防止溴和碘的逸失 空白试验可减少溴和碘逸失带来的误差 含量测定方法为：容量法中的回滴定法,47,PPT学习交流,（三）紫外分光光度法 原理：,48,PPT学习交流,1、直接测定的紫外分光光度法 将供试品溶解后，根据溶液的pH，在相应的最大吸收波长处，直接测定对照品和供试品的吸收值，计算含量。,49,PPT学习交流,

15、 吸收系数法,50,PPT学习交流,对照法,51,PPT学习交流,例：注射用硫喷妥钠的含量测定（2005年版药典收录） 具体方法如下:取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量(约相当于硫喷妥钠0.25 g)，置5OOml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，量取此溶液用0.4%氢氧化钠液定量稀释制成每lml中约含5g的溶液;另取硫喷妥对照品，精密称定，加0.4%氢氧化钠溶液溶解并定量稀释制成中约含5g的溶液。用lcm吸收池，于304 nm波长处分别测定吸收度，以0.4%氢氧化钠溶液作空白，根据每支的平均装量计算，即得。,52,PPT学习交流,每lmg的硫喷妥相当于1.09lmg的CllH17N2

16、NaS 测定结果用下式计算:,式中:Au,AS分别为供试品和对照品的吸收值 CS为硫喷妥对照品的浓度,mg/ml D为稀释体积（ml），500100=5000 1.091为硫喷妥钠和硫喷妥的分子量比值,53,PPT学习交流,注射用硫喷妥钠的含量为,54,PPT学习交流,2、提取分离后的紫外分光光度法 当供试品中存在干扰物质时，可用提取分离方法排除干扰后，再用紫外分光光度法测定 提取原理：巴比妥类药物具有弱酸性，在三氯甲烷等有机溶剂中易溶，而钠盐在水中易溶。将供试品酸化后得三氯甲烷提取液。 再用碱液从三氯甲烷提取液提取巴比妥类药物。调节碱提取液的pH值，选取相应的测定波长。,55,PPT学习交流

17、,（四）高效液相色谱法 用于制剂和体液中巴比妥类药物含量测定 例：在体内药物分析中的应用,苯巴比妥、苯妥英及卡马西平的血药浓度测定 （五）电泳法 例：尿样中巴比妥和苯巴比妥的测定 （六）气相色谱质谱法,56,PPT学习交流,第二节 苯骈二氮卓类药物 一、典型药物的结构特征和主要化学性质 （一）结构特征 含氮杂原子、六元和七元环双环并合而成，其中1,4-苯并二氮杂卓类药物是目前临床应用最广泛的抗焦虑、抗惊厥药。 如：地西泮、硝基地西泮、氯氮卓、三唑仑、氯硝西泮和奥沙西泮等，其中，除了氯氮卓外，均为地西泮的衍生物。,57,PPT学习交流,地西泮 阿普唑仑 奥沙西泮 氯氮卓,58,PPT学习交流,(

18、二)主要理化性质 1、具有弱碱性 和某些有机碱沉淀剂反应产生沉淀 用非水溶液滴定法测定含量 2、具有紫外吸收： 药品溶解于硫酸后在365nm紫外光下可显不同颜色的荧光。,59,PPT学习交流,3、C7位上有氯原子取代 4、强酸性中可以水解 在强酸性溶液中可以水解，形成相应的二苯甲酮衍生物，水解产物呈现的某些特性也可以供鉴别或含量测定。,60,PPT学习交流,二、鉴别试验 （一）化学鉴别 1、沉淀反应,具有碱性,氯硝西泮稀盐酸溶液,盐酸氟西泮水溶液,碘化铋钾试液,橙红色沉淀,放置后颜色变深,不变,61,PPT学习交流,2、硫酸-荧光反应 苯并二氮杂卓类药物溶于硫酸后，在紫外光(365nm)下，呈

19、现不同颜色的荧光，可供鉴别。,62,PPT学习交流,（二）特征基团反应,1、氯化物的鉴别反应 本类药物大多为有机氯化合物，氧瓶燃烧法破坏，生成HCl，以5%氢氧化钠溶液吸收，硝酸酸化，显氯化物反应。,63,PPT学习交流,2、水解后的重氮化-偶合反应,地西泮，C1位氮原子上是甲基取代，水解产物没有芳伯氨基,64,PPT学习交流,（三）紫外分光光度法 中国药典(2010年版)规定： 氯氮卓加盐酸溶液(91000)制成 7g /m1，在245 nm和308 nm的波长处应有最大吸收。 地西泮加0.5%硫酸的甲醇溶液，稀释制成5g /ml，在242、284和366 nm的波长处应有最大吸收。 242 nm，吸收度约为0.51 284 nm，吸收度约为0.230 （四）薄层色谱法,65,PPT学习交流,三、特殊杂质的检查 1、地西泮有关物质的检查 TLC、高低浓度对比法 原料药和片剂,66,PPT学习交流,2、氯氮卓中有关杂质检查 SP 、BP 用薄层色谱法来检查控制有关杂质 中国药典2010版以“HPLC”及“溶液澄清度”检查控制有关杂质,67,PPT学习交流,四、含量测定 （一）非水溶液滴定法 1、非水碱量法 本类药物多为弱碱性，在水溶液