中药制剂检测技术中药制剂的卫生学检查.ppt

1、第五章中药制剂卫生学检查技术，第一节微生物限度检查法第二节无菌检查法第三节热源检查法第四节细菌内毒素检查法，感化老师编写，第一。各种非常规灭菌剂必须实施微生物限度检查法。无菌制剂要依法接受无菌检查。3.静脉注射用注射剂无菌、热源、细菌内毒素检查，第五章中药制剂的卫生学检查，中国药典规定：1，基本知识，(1)基本概念微生物限度检查法界检查非规定灭菌剂及原料，辅料的微生物污染程度的检查方法。非规定灭菌剂主要指口服剂，一般外溶剂。(2)检查项目1盐菌量(细菌数、真菌数、酵母数)2控制菌检查(包括大肠埃希菌、大肠杆菌群、沙门氏菌、铜、假单胞菌、金黄色葡萄球菌、梭菌、白念珠菌等)，3严格防止二次污染。中

2、国的药品生产清洁水平是什么？标准要求是什么？教室交互、(2)试件抽样、保存和检验量按批号随机抽样，样品量是检验量的3倍。每个样例布局必须至少包含两个最小铺装层单位。验收量是指每次验收所需的供给(G、ml或cm2)。固体和半固体制剂的检查量为10g是。液体制剂10毫升；膜剂为100cm2 (4个以上)。贵重药品、微量包装药品的检查量可以适当减少。要求检验沙门氏菌供给品，检查量为20g或20ml，第一节微生物限度检查法，第一节微生物限度检查法，(3)用准备试验液所需的适当方法准备第一液体。将试验品10毫升pH7.0无菌氯化钠-蛋白质缓冲液100毫升，混合到1336010。水溶性液体剂可用作混合供应

3、品原液的试液。第一节微生物限度检查法，第二固体供应品：试用品10g pH7.0无菌氯化钠-蛋白质缓冲液定量用100ml混合匀浆机或其他适当方法1:10，如有必要，加入适量无菌聚山梨醇80，适当加热45以下的水箱，使试用品均匀分布。第一节微生物限度检查法，3以特殊方法准备的非溶性供应品膜剂，按试验品肠溶剂或结肠溶剂、原型气雾剂、喷雾、试用品贴纸、制剂、制剂、制剂、制剂、制剂、制剂、制剂、药典规定运行。第一节微生物限度检查法，4 .抑菌活性供应品：采用培养基稀释法、离心沉降集菌法、薄膜过滤法、中和法等，消除抑菌活性。注：如果需要在试液制剂中提高温度，请将温度均匀加热到45以下，时间不得超过30分钟

4、。(4)检验条件培养温度：细菌和控制菌培养温度为3035，真菌、酵母菌培养温度为2328。语音对比：无菌技术的可靠性确认阳性对比：测试物质是否妨碍控制细菌生长，培养条件是否合适，3、细菌、真菌、酵母数量，1节微生物限度检查法，(1)培养基的适用性检查，(2)检查方法的验证，(3)检查方法，(4)检验方法：通过检验用培养基和对照培养基的比较，以培养菌的生长状态或特征评估检验用培养基是否满足检验要求。，第一节微生物限度检查法，(1)培养基的适用性检查，1。菌种(5种)为5代(从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌为0代)大肠埃希菌(Escherchia coli)金黄色葡萄球菌(Staphylococcu

5、s aureus)枯草芽孢杆菌(Bacillus)黑木耳(Aspergillus Niger)，第一节微生物限度检查法，(1)培养基的适用性检查，第一节微生物限度检查法，(2)。菌液在营养肉汤或营养池培养基中1824小时培养接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物。接种白色念珠菌的新鲜培养物培养2448小时，从改良马丁培养基到改良马丁琼脂培养基。上述培养基以0.9%无菌氯化钠溶液制成，每毫升代表50100 CFU(“Colony Forming Units”的缩写，菌落形成单位，所含菌落数)的菌显液。第一节微生物限度检查法，2 .菌液在改良接种黑木耳的新鲜培养物的马丁琼脂斜面培

6、养基上培养57天，加入含有35毫升0.05%聚山梨醇80的0.9%无菌氯化钠溶液冲洗孢子。然后将孢子悬浮液吸入无菌试管，用0.9%无菌氯化钠溶液制作每毫升50100cfu的孢子悬浮液。保存菌液准备的菌液最好当天使用。在室温下放置时，应在2小时内使用。保存在28里，24小时内可以使用。黑曲霉孢子悬浮液可以保存为28，在经过验证的储存期间使用。第一节微生物限度检查法，3 .适用性检查为大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌各50100cfu注入无菌平皿，立即倒入营养琼脂培养基，每实验菌2个平盘，混合，凝固，3035培养48小时，计数并行。将白念珠菌、黑木耳分别注射到50100cfu

7、，注入无菌平板后，立即倒入玫瑰钠琼脂培养基，将每个实验菌的2个平板同时搅拌、凝固，并加入2328，培养和计数72小时。取白色念珠菌50100cfu，分别注入无菌平皿，立即倒入酵母浸泡粉末葡萄糖琼脂培养基，平行准备两个信誉，搅拌，凝固，2328，培养72小时，计数。用相应的对照培养基代替皮检培养基进行上述实验。第一节微生物限度检查法，4 .结果判断同时满足以下两个茄子条件，判定培养基的适用性检查符合规定。也就是说，菌落形态大小必须与对照培养基的菌落一致。第一节微生物限度检查法，(2)计数法的验证，1。菌种和菌液的制备等培养基的适用性检查。2 .验证方法验证实验至少进行3次独立并行实验，并分别计算

8、各实验菌各实验的回收率。可与供应试验品的细菌、真菌及酵母菌数同时进行。第一节微生物限度检查法，2 .验证方法，(1)实验组：1ml最低稀释等级试验液50100cfu实验菌(2)菌液组：测定添加的实验菌数(3)供应品比较组：规定的定量供应试验液(4)；如果实验组的细菌回收率都不在70%以下，计算方法是可靠的。在一次实验中，如果实验组的细菌回收率低于70%，就必须消除供应品的抑菌活性，重新进行方法验证。第一节微生物限度检查法，(3)检查方法：平皿法和薄膜过滤法，1。平皿法适用于没有明显抑制作用的制剂。注：平盘法计数时要进行语音对比，均随菌生长而渡边杏。第一节微生物限度检查法，细菌数报告规则：细菌，

9、酵母平均菌低于300cfu，真菌平均菌低于100cfu的稀释级，应选定为细菌数报告(两位有效数字)的依据。平均最高的菌落数乘以稀释倍数，报告1g、1ml或10cm2供应品中包含的细菌数。每个稀释级板仅在未生长菌或最低稀释级板中生长菌，但如果平均菌小于1，则用1乘以最低稀释倍数报告菌数。第一节微生物限度检查法，2 .薄膜过滤法一般应用于可溶性细菌制剂。过滤器：孔直径应小于0.45米，直径通常为50mm必须是。每个滤膜每次清洗量为100毫升。每个滤膜的总过滤量应渡边杏超过，为防止滤膜上的微生物受损，应渡边杏超过1000毫升。操作程序：第一节微生物限度检查法，规定：每个过滤器的真菌数量不得超过100

10、cfu。菌数报告原则：用等于1g或1ml供应品的菌数报告菌数。如果滤膜中没有滋生细菌，则报告细菌数为1个(每个过滤器过滤1g或1ml以供应试用品)或1乘以最小稀释倍数。语音控制：以相同的方法操作试验稀释剂1毫升。阴性对照中渡边杏菌生长。第一节微生物限度检查法，(4)注意事项，1所有设备必须严格灭菌。在无菌条件下完成工作。4.灭菌的试管和玻璃瓶每次打开和关闭都需要火焰灭菌。5.不要用手摸标本和灭菌的器材内部，用嘴吸或吹渡边杏。4.控制菌检查，第一节微生物限度检查法包括大肠埃希菌、大肠杆菌群、铜、假单胞菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、梭菌和白色念珠菌检查。其中大肠埃希菌、大肠杆菌群是口服药物的控制菌

11、之一。铜、假单胞菌、金黄色葡萄球菌是外用药品和眼窝的控制菌。第一节微生物限度检查法，(1)控制菌检查用培养基的适用性检查，1。菌种(6种)大肠埃希菌CMCC(B) 44102金黄色葡萄球菌CMCC(B) 26003 B型副伤寒沙门氏菌CMCC(B) 50094，第一节微生物限度检查法，2。菌液将大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、B型副伤寒沙门氏菌、铜、假单胞菌的新鲜培养物接种到营养肉汤或营养琼脂培养基上。接种生梭菌的新鲜培养物在黄乙醇酸盐液体培养基中培养2448小时。接种白色念珠菌的新鲜培养物在马丁肉汤培养基或改良马丁琼脂培养基中培养2448小时。用0.9%无菌氯化钠溶液制作含1ml的细菌数为500

12、1000cfu的菌悬浮液。3 .适用性检查项目：有关促进增长能力抑制能力指示能力的具体方法，请参阅中国药典2010年版附录。第一节微生物限度检查法，(2)控制菌检查方法的验证，成品培养基，脱水培养基或按处方配制的培养基都要检查。验证方法：按照规定的量，将试液和10100cfu实验菌放入增菌培养基中，根据相应的控制菌检查法进行检查。采用薄膜过滤法时，应以规定的量将试验液、过滤、洗涤、实验菌添加到最后的清洗液中，过滤后，注入蒸菌培养基或取出滤膜，连接到蒸菌培养基上。结果判断：上述实验中检测出实验菌后，根据牙齿供应液制备法和控制菌检验法对试验品进行控制菌检查。第一节微生物限度检查法，(3)检查方法，

13、1。大肠埃希菌(Escherichia coli)、试验品检验、第一节微生物限度检查法、结果确认、试验线接种验证IMViC实验反应为或。，第一节微生物限度检查法，2 .大肠杆菌群(Coliform)，第一节微生物限度检查法，结果判断和报告：根据大肠杆菌群的检测官数，根据下表报告1g或1ml供应品中的大肠杆菌群数。表示大肠杆菌群的检测。表明未检测到大肠杆菌群。第一节微生物限度检查法，3 .沙门氏菌，第一节微生物限度检查法，溴化十六烷基三甲基琼脂培养基，判定未检测到牙齿菌，4。铜绿脓杆菌(铜绿假单胞菌)，铜绿假单胞菌5。金黄色葡萄球菌，第一节微生物限度检查法，6。克氏菌，含有庆大霉素的哥伦比亚琼脂

14、培养基，第一节微生物限度检查法，7。供应白色念珠菌试验品的细菌数、真菌数、酵母菌数均不符合牙齿品种的规定，应在同一样品组中随机抽样，单独再试验两次，作为3次结果的平均值全部报告。供应试用品的细菌数、真菌、酵母菌数、控制菌三种茄子检查结果均符合牙齿品种项目的规定，判定供应品符合规定。如果其中一个不符合牙齿品种项目的归属，则提供试用品不符合规定。5.微生物限度检查标准，第一节微生物限度检查法，口服给药剂在检测大肠埃希菌时渡边杏。局部给药剂在检测控制菌金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌时渡边杏。鼻及呼吸机吸入给药剂不能检测大肠埃希菌，阴道，尿道给药剂也不能检测梭菌和白色念珠菌。含有动物组织(包括器官提取物)和

15、动物类原药材料粉(蜂蜜、王浆、动物角、胶质除外)的口服给药剂每10g或10ml检测沙门氏菌，渡边杏。真菌，长螨虫变成不合格论。第一，基本知识，(1)基本概念无菌检查法是药典中要求无菌的药品、医疗器械、原料、辅料及其他品种是否无菌的检查方法。(b)接受检查的各种注射剂、吸入喷雾剂、眼溶剂、可吸收止血剂、手术、烫伤、严重创伤的局部用药等，第二节无菌检查法，第二节无菌检查的人和环境，第二节无菌检查法，无菌检查的人：微生物专业知识，日常检查还需要监测实验环境。3，培养基的制备和检查，2节无菌检查法，1培养基的种类和准备无菌检查用培养基主要包括黄乙醇酸盐液体培养基(好氧细菌，盐酸菌培养用)，改良马丁培养基(真菌培养用)，选择性培养基，营养肉汤培养器，营养琼脂培养基，0.5准备好的培养基应保存在225，避光的环境中。培养基存放在未密封的容器中，通常在3周内使用。在密封容器里保管，一般在一年内使用。2培养基的适用性检查应符合商业销售的