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文档简介
1、,研究背景:,芒果苷具有广泛的药理活性,如抗氧化,抗炎等,芒果苷对治疗糖尿病,降血脂,免疫调节以及抗肿瘤治疗有很好的应用前景。但由于其溶解性和跨膜通透性均很弱,生物利用度低, 制约了芒果苷药理作用的发挥,为了改善其不足,提高生物利用度,通常在其结构基础上添加基团或者是制备成其单钠盐的形式,即芒果苷衍生物。,芒果苷化学结构式,芒果苷生物转化,芒果苷衍生物合成方法,微生物转化法,步骤多,副产物多,污染严重,条件苛刻。,条件温和、反应类型多样、无污染、成本低、副产物少 ,能定位反应。,化学合成法,有机溶剂耐受菌:一类新的能与有害影响因素竞争并能在有机溶剂中茁壮生长的微生物,实验研究步骤,采集土样,耐
2、有机溶剂菌的筛选,建立耐有机溶剂菌库,底物复筛,分析,采集土样,初筛,以15%的叔丁醇为筛选压力。,转接,稀释涂布,划线单离:,富集与冻存:,筛得耐有机溶剂菌落以及菌株形态(部分):,共筛得59株耐有机溶剂菌,分别有20株G+, 39株G- 。菌株以杆状为主,有6株球状。,底物复筛:,菌种的活化,发酵产酶,TLC 及HPLC分析,转化,薄层检测:,展层剂: 正丁醇:水:乙酸 5: 4 : 1,对照 NJ-8-2 NJ-3-2,转化产物,高效液相色谱分析:,对照,菌株NJ-8-2,芒果苷衍生物10%,芒果苷,芒果苷,对照:,条件:30%甲醇、流速1.0ml/min、波长316nm。,实验小结:,成功筛选出59株耐叔丁醇的菌株。 对这些菌株进行了转化实验,筛选出2株有可能催化芒果苷生物合成芒果苷衍生物的菌株。,展望,在本实验的基础上还可以展开以下研究: 进一步验证所得的菌株能够催化芒果苷合成芒果苷衍生物; 确认该芒果苷衍生物的结构
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