中药成分分析的研究生长点.ppt

1、色谱联用技术 中药成分分析研究“生长点”,赵丹丹 药物分析,药分,现代中药分析方法的连续化、自动化、最优化、智能化等特征已成为中药成分分析科学发展的必然趋势，它推动了一种分离手段和一种检测手段相结合组成的多种联用技术的诞生。,概述,高分离性能的色谱与高鉴别能力的分析仪器联用，在进样方式、分离模式、检测手段等方面具有独特的优越性，提高了分析的准确度、灵敏度和选择性。色谱联用分析技术已成为中药成分分析学科领域中最重要和最基本的研究手段和方法，成为中药成分分析研究的新的“生长点”。,液质联用,毛细管电泳 质谱联用,高效液相 荧光检测法,气质联用,色谱联用技术,高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS）

2、,高效液相色谱-质谱联用技术具有高分离能力、高灵敏度、和极强的专属性等特点。随着串联质谱技术和高分辨质谱技术的迅猛发展, 质谱在中药成分分析、中药指纹图谱研究等方面得到了广泛的应用, 占高效液相色谱法的9. 4%, 其中90% 以上均为联用单重四级杆质谱检测器, 与离子阱、飞行时间和三重四级杆等高级质谱检测器联用相对较少。,LC-MS的难点:MS要求较高的真空度,LC流动相为液体有一定的压力，因此联用时的关键是接口技术的研制与发展。,（1）高选择性/高灵敏度 对选择的离子进行检测（SIM） 灵敏度为ppb级或者更低 通过质谱，分子量或特定的离解反应进行定性分析更加准确。 （2）适用化合物范围广

3、泛 低或非挥发性，极性与离子性化合物 热不稳定性化合物,特点：,梁明金等用LC-MS 法对川芎有效部位中藁本内酯和亚丁烯邻苯二甲内酯等22种化学成分进行了研究与指纹图谱分析，通过测定不同产地和不同批次的川芎药材样品，利用NIST谱库分析样品，参照相对峰面积分析确定了指纹图谱中的16个共有峰。,液质联用,毛细管电泳 质谱联用,高效液相 荧光检测法,气质联用,色谱联用技术,气相色谱-质谱联用（GC-MS）,GC-MS可同时完成待测组分的分离和鉴定，特别适用于多组分混合物中未知组分的定性定量分析、化合物的分子结构辨别、化合物的分子量测定和元素组成分析。对可挥发性未知成分与微量成分的结构分析更是具有独

4、到之处。,但是， GC-MS的应用范围有限，因为所研究的药物样品必须气化，故难以用于极性、热不稳定和大分子化合物的测定。,液质联用,毛细管电泳 质谱联用,高效液相 荧光检测法,气质联用,色谱联用技术,毛细管电泳-质谱联用（CE-MS）,CE-MS 联用技术集毛细管电泳的柱效高、消耗时间短、消耗缓冲液少、可自动化、污染少等优点和MS的高灵敏度、专属性强于一体，可对复杂成分进行分离和鉴定，且在每次分析时都可同时得到迁移时间、分子量和碎片特征信息，是一种对复杂样品既可定性分析又可定量分析的强有力手段。,目前常见的与质谱连接的接口有与单四极杆质谱连接的接口、与离子阱串联质谱连接的接口及与电喷雾飞行时间

5、质谱连接的接口等。当前，CE-MS法最大的问题是方法的重现性不好且分析成本高。,陈军辉等建立了快速定性分析黄连中生物碱类化合物的高效毛细管电泳-电喷雾飞行时间质谱（HPCE-ESI-TOF-MS）联用分析方法。使用未涂层石英毛细管，以50mmol/L 醋酸铵-0.5%甲醇溶液(用氨水调pH=7.2) 为运行缓冲液，分离电压为25KV；鞘液组成为50%甲醇-49.5% 水-0.5% 醋酸，鞘液流速为4L/min ；质谱选用正离子模式，碰撞电压为100V。结果通过各色谱峰紫外光谱和质谱可测得精确分子量。该法简便、快速，是黄连中生物碱类化合物快速分离、鉴别的有效方法。,液质联用,毛细管电泳 质谱联用,高效液相 荧光检测法,气质联用,色谱联用技术,高效液相色谱法- 荧光检测法（HPLC-FLD）,高效液相色谱法结合荧光检测法具有的较高的灵敏度, 检出限非常低。同时, 由于其只能适用于可发出荧光的物质或成分的检测, 可以避免不发荧光的物质、成分的干扰, 因此具有良好的选择性, 这成为荧光检测的独特优点,但适用性较差。,例：荧光检测高效液相色谱法测定 茶叶中的五种菊酯类农药残留,采用梯度洗脱后荧光检测 ex为221nm em为320nm,随着分析科学的不断发展，色谱联用技术已成为一种常规应用的现代分析检测技术。色谱联用技术具有较高的灵敏度、选择性及广泛