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文档简介
1、一、实验目的 1了解鱼类疾病的主要症状; 2掌握寄生虫标本的装片方法。 二、实验内容 1原生动物染色涂片的制作 2血液涂片的染色 3寄生虫的装片,实验六 寄生虫标本的装片和血液涂片的染色,三、主要仪器及试材 1显微镜,解剖用具等。 2蒸馏水、鱼用生理盐水,70%酒精、10%甘油酒精、福尔马林、肖氏液、90%酒精甘油、海氏苏木精,聚乙烯醇、中性树胶等。 3活鱼,标本瓶。,四、实验方法与步骤,1原生动物标本的收集(盖片涂片法) 涂片涂层向下浮于固定液面2min涂层向上浸没于固定液中30min50%酒精1h自来水水洗5min*2,涂片染色:放进海氏苏木精溶液中24h,自来水水洗5min*2 脱水:蒸
2、馏水酒精 50%70%80%90%95%*2100%*2二甲苯*2。 在每阶段停留5min,但在95%和100%酒精及二甲苯中停留10min。涂片由100%酒精转移到二甲苯时,如果出现乳白色液,表明片子脱水不彻底,要换新的100%酒精重新脱水。 酒精和染液回收,不要装错瓶子!,封片:取一清洁干燥的载玻片平放桌上,滴一滴中性树胶于载玻片中央,迅速镊取在二苯中的涂片,涂片面向下放于已滴中性树胶的载玻片上封固。 要迅速,防潮。,中性树胶,(1)水化:由70%的酒精中挑取压得平整、姿态正常的标本退至50%酒精自来水蒸馏水,每一阶段约1015min。 (2)染色:硼砂洋红经24h自来水蒸馏水每一阶段约1015min。 (3)脱水透明:自50%酒精70%80%90% 95%*2100%*21/2纯酒精+1/2二甲苯二甲苯*2 ,每一阶段需停留1015min。 (4)封片:虫体透明后,挑取虫体迅速放在已滴有中性树胶的载玻片上,用针拔正,盖上盖玻片即可,2吸虫、绦虫、棘头虫的整体染色:,3.血液涂片的染色: 已干燥的血液涂片甲醇干燥35min 晾干吉姆萨染液染色30min 中性水(蒸馏水和自来水各半)1min 晾干镜检 也可染色后的涂片用二甲苯透明,中性树胶封固(今天不用做)。,实验报告,1.每人1张完好的草鱼肠袋虫涂片的永久装片、1张血液涂片(不封固)和1张寄生虫永久装片。 2.绘
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