遗传育种技术.pptx

1、实验三花粉的贮藏和生活力的测定要求，目的和正常条件下花粉在雌蕊萌发的能力是花粉的生活力。 花粉生活力的测定在杂交工作中很重要，特别是亲本花期不同，需要从外来采集花粉作为亲本时，花粉需要经过长时间的贮藏运输过程，杂交前应检查花粉生活力，应用无生活力的花粉不致导致杂交工作失败从生产上看，在选择相互授粉的品种时，也应该考虑品种的花粉发芽能力，花粉发育不全的品种花粉发芽势低。 不适合授粉品种本实验的主要目的是掌握花粉贮藏和花粉生活力的测量的方法。 材料和工具的材料：桃子和苹果树的花粉。 工具：显微镜、天平、玻璃罩、凹式载玻片、培养皿、干燥机、试管、滴瓶、蒸馏水、白凡士林、蔗糖、氯化钙元素、琼脂、汽油、

2、-苯酚、碳酸纳金属钍、过氧化氢等。 实验内容及方法花粉贮藏：花粉生活力试验：花粉贮藏：管口塞为棉花或橡胶塞，贴上写有品种名称的标签条。 花粉瓶放入甩干机内，将花粉在空气相对大气湿度低的条件下(一般为040% )保存以减少呼吸作用，可在低温(04)的黑暗场所储藏。 摘下刚开的花，取花药放入培养皿，干燥室内花药破裂，将花粉放入指形管，花粉生活力试验：花粉发芽法和染色法，花粉发芽法培养基的制作和接种，520%蔗糖(葡萄糖)，12%琼脂，蒸馏水。 加热煮沸约40度也不凝固，用玻璃棒一点点接触培养基，将针(解剖针)接种载玻片凹陷处，沾少量花粉。 轻轻震动，将花粉均匀撒在培养基上，放入铺有湿棉的培养皿中，

3、或者反过来放入培养皿中，贴上标签条，将记载了处理、种类、播种日的培养皿放入20个恒温箱中进行培养。制作培养基，在培养基上放置载玻片，将花粉撒在培养基上，明确记载了标签条恒温培养，花粉生活力试验：花粉发芽法和染色法、花粉发芽法的观察数，在显微镜下每隔一定时间进行一次检查(花粉发芽早、数小时内发芽，晚的需要24小时以上)，花粉发芽时，花粉发芽的标准为花在一定方向上花粉生活力试验：花粉发芽法和染色法、染色法过氧化酶测定法，原理：有生活力的花粉含有活跃的过氧化酶。 该酶催化剂利用过氧化物可以氧化各种多酚和芳香胺使其变色，从颜色就能知道花粉有无活力。联苯胺、a-萘酚、对萘氧基联苯胺(紫红色)、花粉生活力

4、试验：花粉发芽法和染色法、染色法碘元素-碘化钾元素染色法，原理：正常的花粉积累淀粉多，反常的花粉少。 由此可以用化学物质染色，根据显色反应间接地测定花粉的正常与否和花粉的生活力的差。 通常，正常花粉用I-KI染色时呈蓝色，但发育不良畸形花粉不蓄积淀粉，用I-KI染色时呈黄褐色。 花粉生活力试验：花粉发芽法和染色法、染色法氯化三苯四唑(TTC )法，原理：有生活力的花粉在呼吸作用过程中有氧化还原反应，无生活力的花粉实验了这种无反应的四果树的有性杂交技术，要求目的和果树的有性杂交是创造果树新型的主要方法之一材料和工具的材料：桃子。工具：大头针定径套、剪刀、卡片、透明纸袋、授粉器或毛笔、细棉纱或回形

5、针、干燥机、指管、棉花、酒精(70% )、红涂膜剂。有性杂交技术桃树杂交桃的花器结构和开花习性，通常花萼5枚、花瓣5枚、雌蕊1枚，雄蕊多为三轮附生，花梗短，花托为杯状，花萼、花瓣和雄蕊生于花托，雌蕊和雄蕊长度因品种而异，桃花芽为纯花芽，1年生桃的大部分品种由于自花能果，在杂交前必须脱雄。 杂交技术亲本植株和授粉花枝的选择和处理树龄以1015年生最好，发育良好，生长期内新梢长度可达5060厘米，叶片健康无病虫害的最好选择长果枝上的花，其次是中果枝、多复芽充实的枝条坐果好， 产于树冠中部和上部的花比树冠内部和下部的花可靠性和坐果好，一般的杂交技术的脱雄和袋的脱雄通常在开花的12天前，即骨朵儿达到最

6、大，花瓣未破裂时进行。 如果骨朵儿内有虫子或个别花药破裂，请不要去除。 为了避免去雄后的花自然杂交，去雄后应立即隔离袋子，在袋子中留出适当的间隙，使花的生长良好，将袋子从上往下放，将袋子的口用回形针或细麻线缝在结果枝上，挂牌。 袋子在水果枝整体的中央采用“袖筒式”，袖筒的大小为27.5厘米9.0厘米，也有一张报纸做8袋，一张花使用纸袋的。 杂交技术花粉采集和保存采集父本花粉的花在骨朵儿期，花开放花粉未从花药中撒落时采摘花，带入室内光滑的纸上采摘花药，气温上升花粉撒落时采集到花粉瓶中，标明品种和采集期。 花粉瓶放在甩干机里。 为了加速花药的开裂，可以将花药放入培养皿内，直接放入干燥器中。 杂交技

7、术授粉通常在脱雄后12天的雌蕊成熟期进行，授粉的最佳时间为上午9点11点。 授粉时，先解开茄克衫袋，用授粉器把花粉涂在柱头上，授粉结束后立刻隔离茄克衫，以免其他花粉掉落。 袋授粉后，雌蕊柱头萎缩，花瓣散落，子房开始膨胀时(710天后)，去除纸袋，使幼果发育成一盏茶。杂交后的记载和管理、表1-1有性杂交结果记载表、实验五化学突然变异染色体倍及其鉴定、目的和要求了解人造的诱发多倍体植物的原理、方法及其在植物育种上的意义。 观察多倍体植物，鉴别植物染色体数目的变化和植物其他器官的变异。 材料玉米(2n=20 )、水稻(2n=24 )的种子。 在人造的诱发的四倍体玉米和二倍体玉米的果穗、玉米粒、花粉、

8、叶子。 洋葱或大蒜球茎。实验器材和药品器具：显微镜、载玻片、玻璃罩、培养皿、大头针定径套、刀片、吸管、吸水纸、微尺度。 对药品： 0.1%和0.025%秋水仙碱溶液、1mol/L HCL溶液、石炭酸品红色溶液进行了改良(处方：参照实验指导材料电子版)。 实验说明见实验指导材料电子版，实验步骤(1)多倍体植物诱导玉米2n=20 (或大麦2n=18，水稻2n=24 )种子浸泡在0.1%秋水仙碱溶液中24小时。 用自来水冲洗23次。 将发芽种子转移到0.025%秋水仙碱溶液浸湿的培养皿中。 加入20孵化机，培养发芽。 48小时后取苗。 用自来水慢慢冲洗幼苗。 把处理过的苗栽在大田和钵里。 在云同步期

9、播种未处理的玉米种子作为对照。 给予田地好的管理。实验步骤(2)多倍体植物鉴定1 .观察四倍体玉米、二倍体玉米表皮细胞气孔大小(1)在四倍体玉米叶背面中央部开切口，切口部分用尖锐的大头针定径套夹住，撕裂薄层下表皮，注入载玻片水滴，使之平整，防护玻璃罩(2)用与上述同样的方法制作二倍体玉米表皮贴片，作为对照。 (3)镜检比较了保护四倍体、二倍体气孔和细胞球的大小，用螺旋测微器测定记载了其大小。 实验步骤(2)多倍体植物鉴定2 .比较4倍体玉米、二倍体玉米的花粉粒大小观察(1)从4倍体、二倍体玉米株上分别采集花粉。 (2)将采集的花粉分别浸泡在45%冰冰乙酸中。 (3)用吸管分别取一滴花粉粒混悬剂

10、，移至载玻片上。 (4)滴加碘化钾元素溶液，盖上盖片，制成花粉粒制薄片。 (5)镜检四倍体及二倍体玉米花粉粒大小。 (6)用微尺测量其大小并记载。 目的和要求学习秋水仙碱诱导园艺植物染色体加倍的操作技术，掌握染色体倍性鉴定的常用方法。 材料和工具的材料：黄瓜种子和幼苗。 用具：秋水仙碱、二甲基矾(DMSO )、聚乙烯管二醇(PEG )蒸馏水、小吸管、50ml量筒、100ml塑料瓶、卷尺、放大镜等。 说明秋水仙碱极毒，有效浓度为0.1%1%，0.2%最为有效。 常萌或发芽的种子、幼苗或生长旺盛的茎尖作为诱变材料。 二甲基铜矾(DMSO )改善了胞质膜的渗透性，促进了植物对秋水仙的吸收。 聚乙烯管

11、二醇(PEG )提高了细胞球的渗透压，并有利于细胞球吸收秋水仙。 因此常被用作秋水仙碱诱导的增效剂。 方法和分步制剂配制0.2%和0.5%的秋水仙碱：先用少量酒精溶解秋水仙剂，然后定量或直接用冷蒸馏水配制。 为减少1.5%DMSO、突然变异滴苗：材料： 2片真叶刚吐出(双叶一心)试剂处理： 0.2%秋水仙1.5%DMSO、0.5%秋水仙、0.5%秋水仙1.5%秋水仙的滴下和蒸发，可将脱脂棉放在着力点上，滴下后复盖遮光罩。 连续处理五天。 20天后，对存活株和变异株进行了修订。 每项处理至少有50股。 变异浸种：材料：未催芽种子试剂： 0.2%秋水仙碱、0.2%秋水仙碱1.5%DMSO、0.5%秋水仙碱、0.5%秋水仙碱1.5%DMSO方法：浸渍(用湿布包裹种子)。 每项处理至少有50股。 然后播种到营养盆