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文档简介
1、高一生物第12章生物实验的基本技术教育方案第一节细胞学实验技术【解题指导】例1通过显微镜观察洋葱根尖细胞球的有丝分裂,在各时期的细胞球内染色体变化看情况中,我们发现,目镜物镜的合理组合a目镜(24X )、物镜(10X,NA0.25 )b目镜(5X )、物镜(40X,NA0.65 )c目镜(10X )、物镜(40X,NA0.65 )d目镜(24X )、物镜(40X,NA0.65 )解决这个问题是镜像亮度的问题。 镜像亮度与物镜开口率(NA )的平方成正比,与总倍率成反比。 因此,在总倍率相同的情况下,为了增加物像亮度,应该使用高镜口率(NA )的物镜与低倍目镜一致,应该根据该原理选择c。例2观察
2、显微镜时,(1)视野明亮(2)视野不圆(3)对光的视野出现窗、树影等物体现象(4)看不见视野的图像(5)分析图像结构不完整,可能发生这些个现象的原因,提出排除方法。(1)视野亮度耀眼,可能的原因:反射镜直射强光源光照射到通光孔的上缘。 排除方法:用平面镜使光源倾斜;移动镜子。 (2)视野不圆的原因:遮光器或转换器转不到头上快门或转换器的螺丝动作。 排除方法:将两者转动到头(弹簧片入槽)拧紧螺钉。 (3)对光的视野中出现其他物像,可能是因为镜筒过高或过低,只要调节镜筒就能消除。 (4)视野中看不到图像,但操作不注意,低倍镜头可能横向偏移。 排除方法:将低倍透镜对准通光孔。 (5)图像结构不完整的
3、原因是由于材料的折射性不使用光,应该调整光圈使透明度一致。例3由于某显微镜磨损,低倍镜上的倍率看不清楚,但高倍物镜仍能看到40倍。 实验台的哪种材料可以测量低信号镜的倍率? 说明测定方法。(实验台有显微镜、目镜微光栅、物镜微光栅、光栅、放大镜)为了解决这个问题,可以使用测微器测量技术进行测量。 用实验台的显微镜和微尺度进行测量。 目镜微比例的每个网格的实际长度根据物镜的倍率而不同,因此能够在相同的目镜下测量变换高度(40X )、低倍物镜下的视场直径,倍率与视场直径成反比,因此能够通过下式的校正运算求出低倍镜的倍率。高倍镜倍率/低倍镜倍率=低倍镜视野直径/高倍镜视野直径例4-1黄粉岬幼虫的尾部4
4、5节之间扎入针,用毛细血管血淋巴14mL,用毛细血管生理盐溶液1520mL,用血球校正板校正细胞球数(区别脂质颗粒、组织东鳞西爪和细胞球),校正血淋巴球浓度后记入下表。 每30分钟重复1次(针刺部位以一体节为前进),每60分钟重复1次(针刺部位以一体节为前进)。(1)将相关数据填写在下表中时间间隔(最小)长血淋巴(a )毫升生理盐溶液(b )毫升细胞球数(数25个中方眼)细胞球密度(个/毫升)03060(2)将细胞球密度的变化曲线化,回答以下问题计数时如何处理纱线细胞球? 一言以蔽之。给出修正细胞球密度的公式。用一句话回答为什么血盖片比一般的玻璃罩厚。注意:针刺幼虫时,食指和中指夹住头部,大拇
5、哥夹住尾部以免活动。 针刺不要太深,也不要动。 请不要让虫子死亡,头部脏器的细胞球和垃圾进入血淋巴。 虫子死了就是要不得。 中所述)分析这个问题用血球订正数极订正数的方法进行操作,把得到的数据列入表中。 根据描绘函数曲线的原理,以时间间隔为横轴,以细胞球密度(个/mL )为纵轴进行绘制曲线。 计数时,对压线细胞球以“数上线不数下线,数左侧线不数右侧线”的原则进行处理。 修正细胞球数的方法:每mL混悬剂的细胞球数=80个单眼细胞球总数/8040010000稀释倍数血液保护片比通常的保护玻璃厚是为了复盖修正数板上的修正数室槽。【坚固的练习】1 .一位同学在观察洋葱根尖细胞球有丝分裂制片时,出现了两
6、次错误。 第1次的解离时间为2min,第2次为60min。 请拿出实验结果说明原因。 第一次因为原因被观察到。 第二次,所以。2 .如果照明一盏茶,在显微镜视野内能看见洋葱鳞茎表皮细胞无色的细胞贴壁,但看不到液泡,因此,要能显示细胞质与液泡的界面,此时a是凹面镜,放大光圈b是凹面镜,缩小光圈c是平面镜,放大光圈d是平面镜,缩小光圈3 .在显微镜视野中观察玻璃标本,当物镜微标尺与目镜(5X )微标尺在0点重合时,当物镜环境微标尺的80格与目镜微标尺的55格也重合时,目镜微标尺的长度为m 观察和测定某种植物的细胞球尺寸,如果其长度为7胞,该细胞球的实际长度为m。4 .将给定的叶子的下表皮撕裂,在显
7、微镜下观察,描绘了保护细胞球和表皮细胞的特征。 随机取5个视野,修正气孔数,取其平均值,修正气孔密度(个/cm2)。 (低倍物镜的视野直径为1.5mm,目镜统一用为10倍)第二节物理学和化学分析技术【解题指导】例1叶绿体中色素的提取和分离:(1)提取分离叶绿体色素,可采用方法。(2)用毛细管在滤纸上画滤液的细线时,越细线越好,这可以避免。(3)叶绿体b为黄绿色,层折的位置在滤纸条上。(4)实验尽量在通风的地方进行,实验后一定要洗手。提取分离叶绿体中的色素可以用纸色谱分析法。 在单点点画线的情况下,越细越好,能够避免色素带彼此的部分重叠,能够得到高分离效果。 色谱分析法后,滤纸条上自上而下有4条
8、色素带。 该实验使用苯、丙酮等有毒化学药剂,实验时要通风,实验后洗手确保安全。例2在鸡血DNA的粗提和鉴定实验中,(1)为什么用NaCl溶液分离DNA? (2)为什么用乙醇纯化DNA? (3)为什么甲基绿色能鉴定DNA?DNA在NaCl溶液中具有一定的溶解度,随NaCl溶液的溶解度变化而变化。 当NaCl的质量浓度为0.14M/L时,DNA的溶解度最低。 利用这一原理,可以促进溶解在NaCl溶液中的DNA的析出。 DNA不溶于乙醇,而细胞球中的一些物质溶于乙醇。 该原理可以用于进一步提取更纯粹的DNA。 DNA遇到甲基绿就染成青绿色。 因此,甲基绿可以作为鉴定DNA的特定试剂。例3用纸电泳法分
9、离血清蛋白。 已知血清蛋白质中含有5种蛋白质,按照分子量从小到大的顺序排列成白蛋白a、1、2、球蛋白。 提问:(1)阳离子电泳后,滤纸上会出现多少条乐队? 离点样线最远的是什么蛋白质? 我说明那个原因。 (2)对各部分蛋白质的百分比进行修正,请说明修正方法。解:阳离子电泳后,滤纸上应出现5条乐队。 由于分子量小的蛋白质,在电场中游泳的速度快,也就是迁移率大。 因此,离点样线最远的是白蛋白a,是1、2、球蛋白的顺序。 校正各蛋白质的百分比,通过比色法测定,在分光光电比色校正上对各乐队进行比色,波长为580nm600nm,记录各自的光密度。 然后,用光密度的总和T=A 1 2 的各光密度值,计算各
10、部分蛋白质的百分率。清蛋白A%=A/T100; 球鸡蛋清1%=1/T100其他蛋白质依次类推。【坚固的练习】5 .在实验台上放置天平、100mL烧杯、培养皿(6个)、红墨水、I2-KI溶液、苏丹溶液、缩二脲试剂、显微镜、刀具、大头针定径套、小麦种子、菜豆种子、蓖麻种子(把这些个种子分成两半的问题:(1)绘制并说明培养皿中各种材料各部分的结构名称。(2)测定各类种子发芽所需吸水量(g水/g种子),并注明实验过程。(3)测定各种种子的潜在发芽势(% ),标明实验过程。(4)各种种子贮藏有机物的特征是什么? 根据是什么?6、研磨叶肉细胞后,放入离心管中离心,细胞贴壁和核物质在管底沉淀,这些个沉淀物为
11、P1,上清液为S1。 在别的管中加入S1进行离心分离,分离出椭圆体或球形粒子P2和上清液S2。 再将S2放入别的离心管中进行离心,分离棒状粒民P3和上清液S3。 再在别的离心管中加入S3进行离心,分离上清液S4和含有粒状小体的沉淀物P4。 S4中只含有溶于水的物质。 (参照下图)。请从AE中选出正确答案并填写下述各问题。a p1b p2c p3d p 4接口(1)存在合成蛋白质的结构。(2)DNA含量最高的是。(3)含有将3)co2和H2O合成为C6H12O6的反应所必需的酶催化剂的是。(4)含有将葡萄糖分解为酒精的反应所必需的酶催化剂的是。7 .用碘元素液、乙醇、苏丹溶液、盐酸液、氢氧化纳金
12、属钍溶液、硫酸铜溶液、氯化钾元素溶液、冰乙酸品红色溶液、亚甲基蓝溶液、丙酮等药品,小麦面粉块用纱布包裹,清水洗涤后,如何证明纱布中的面筋是蛋白质,清洗后的白色浆糊为淀粉8 .把花盆横放在回转盘上,当回转盘以最大速度旋转时,花枝向哪个方向生长? 你说明那个理由吗?9 .用小刀切下数十只荧光发光器,干燥成粉末状,平分后分别放入两个小玻璃瓶,一点一点地加入水混合后,可以看到玻璃瓶出现鹅黄色荧光,荧光消失15分钟。 此时,再向一个玻璃瓶中加入ATP溶液,向另一个玻璃瓶中加入葡萄糖溶液,观察到加入ATP溶液的玻璃瓶中出现荧光,而加入葡萄溶液的瓶中没有出现荧光。 以上现象说明(1); (3)。第三节微生物
13、培养技术【解题指导】例1显微镜一台,革兰氏染色用具一套,血球订正数板一套,吸管,烧杯,天平,微尺度一套,试管,吸水纸,混合二甲苯,沥青胶。 进行以下实验,回答问题。(1)请设定、判断成形球团矿样品a的实验。这个样品中可能含有什么样的生物细胞球? 这个成型粒子样品a中的生物细胞球含量是多少? (个/g )如果这些成型粒子都是生物细胞球组成,那么,我们来计算一下每个细胞球的重量吧(要求导出实验过程、使用器材、测量的数据、修正公式、结果等)有材料c,请革兰氏染色。 判断这种细菌的形态? 染色结果怎么样?要画这个细胞球的形态图吗? (要求同上)分析(1)实验中提供的样品a是市售的干性生酵母。 定量样品
14、a用定量无菌水稀释后,用革兰氏染色法鉴定其菌的类型,显微镜下鉴定其菌的形态。 实验结果显示克呈阳性,形态说明该样品可能是酵母菌。 通过显微测定,用血细胞校正数板测定了样品a的细胞球含量(个/g )和每细胞球的重量(g/个)。 (2)材料c是短杆菌。 革兰氏染色后,在油镜下观察细胞球的形态,制作了其细胞球的形态图。例2将酵母液10mL在适当温度下培养,不同时间内等量均匀取样4次,分别测定样品中酵母菌的数量和pH值,结果如下表所示。 请分析回答(1)表中的样本的采样优先顺序为。(2)对酵母菌来说,该培养液100mL的环境负荷量量是个。(3)在第5次均匀采样中,样品中的酵母菌数为760个/mm3。
15、得出这个结果的理由是。(1)根据样品菌数,先行菌数越少,取样顺序越是2、4、1、3。 (2)培养10mL的培养液中菌数为1210个/mm3,环境负荷量量为1.21107。 (3)培养液中的营养物质不断消耗,pH值减少,部分酵母菌因营养不足死亡并解体。【坚固的练习】有材料A1和A2。 A1是接种后在32下培养10小时的样品,A2是接种相同菌种后培养12h的样品,假定接种后该菌种细胞球开始指数成长(即,12482n,其中n表示细胞分裂的次数),请通过实验测定该微生物分裂所需的时间(以g表示,单位为min )要求: (1)判断该生物细胞球是什么;(2)记录重要的计量资料,写出修正公式。 (3)写出测
16、量所需的主要设备器材。注:材料为培养的啤酒酵母。11 .如果有一定浓度的细菌混悬剂b,不使用血球数量极,请用摆在实验台上的材料c测定该细菌混悬剂的浓度。 在试卷上写上测定过程和测定结果(b是细菌培养液,c是已知浓度的鸡血)。12 .有平板培养材料d。 请对此进行革兰氏染色,指出形态及革兰氏染色结果。 这种材料有自主运动(本征运动)吗? 怎么能简单地判断呢? 如果可以运动的话,请判断这种菌鞭毛类型。 (要求写实验的过程和结果)第四节植物解剖与大姨妈测定技术【解题指导】例1有两张无标签条切片标本,根据以下观察切片1 :横截面为圆形,纸管束排成一行,木质部和麻纤维相对排列,维管束有形成层,有髓,初生
17、木质部为外始式,次生麻纤维部有纤维、微管和伴细胞球。切片2 :横截面圆形,木质部,韧皮部相对排列。 维管束星散在排列,无形成层,无明显髓和表层。写出切片属于哪种植物,属于哪种器官。切片1切片2解切片1为孪生子叶植物根的结构,切片2为单子叶植物茎的结构。例2考虑了证明光合作用需要CO2的实验,向两个试管中加入蓝色的BTB溶液(酸性条件下为黄色,碱性条件下为蓝色),向管内注入CO2,溶液全部变成黄色。 在1号管内放入绿色的水草,放置在阳光下,在2号管内也放入绿色的水草,用黑纸包起来。 之后,1号管内的BTB液变蓝,2号管内的液体保持黄色。 因此,本实验可以证明光合作用需要CO2。也有人认为这个实验不严格,如何改良上述实验装置,能更严格地说明光合作用所需的CO2吗? 的双曲馀弦值。不在应该增加1
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