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文档简介

1、血清制备,实验目的和要求,初次应答和再次应答抗体产生的规律； 影响机体免疫应答强度的因素。 制备牛血清白蛋白（BSA）的抗血清； 熟悉佐剂的制备和动物免疫的常用方法； 了解抗体检测常用方法。,在免疫学实验中,为制备抗体通常以抗原性物质给动物注射,经一定时间后,动物血清中可产生大量特异性抗体，这种含有特异性抗体的血清称免疫血清。 抗体的产生通常与抗原的质和量、动物种类以及接种途径有密切关系。,实验原理,抗原的性质异物性 与机体亲缘关系越远，组织结构的差异越大，异物性越强。,实验原理,影响因素,抗原 化学性质 物理性状 分子量 结构复杂性 分子构象 容易接近性 宿主 遗传 年龄、性别与健康状况 抗

2、原进入机体方式 数量、途径、间隔时间、次数、佐剂,实验设计,动物的选择 佐剂 免疫方案,佐剂的概念,与抗原一起或预先注入机体时可有效增强免疫应答的强度或改变免疫应答的类型的非特异性免疫增强剂,佐剂的作用,增强抗原的免疫原性； 增强机体对抗原刺激的反应性； 改变抗体类型； 引起或增强迟发性超敏反应。,佐剂的种类：,1. 微生物及其产物（分枝杆菌、短小棒状杆菌、 百日咳杆菌及脂多糖） 2. 多聚核苷酸-(po1y1：C)，(po1y A：U) 3. 无机物-明矾及氢氧化铝 4. 脂质体，ISCOMs及CpG,弗氏佐剂(Freund adjuvant) 不完全弗氏佐剂: 石蜡油加羊毛脂或吐温80组成（1：2）。 2. 完全弗氏佐剂 不完全佐剂中加入分枝杆菌(死卡介苗),免疫方案,10只小鼠,第1周,8只 小鼠 第一次 免疫,小鼠眼眶取血制备血清,6只 小鼠 第二次 免疫,第2周,第3周,2只,2只,6只,佐剂制备,完全乳化,1mLBSA,1ml完全 福氏佐剂,搅拌10min,初次免疫,乳化物滴于水中经久不散 用1ml注射器12# 针头吸出完全乳化的抗原0.5ml 用4 # 针头双后足垫和背部皮下接种，每处约0.1-0.2ml 放回小鼠，贴好标签，注明班别 注：保留剩下的乳化完全的抗原待下周用,采集阴

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