第五章、放射性核素示踪技术.ppt

1、第五章 放射性核素示踪技术 放射性核素示踪技术是利用放射性核素及其标记化合物作为示踪剂，应用射线探测方法来检测它的行踪，以研究示踪剂在生物体系或外界环境中运动规律的核技术。放射性核素示踪技术是实验核医学中最重要的实验核技术之一，促进了学科的交叉和渗透，贯穿于整个核医学中，也被经常应用于基础医学、临床医学等各个学科。,一、基本原理 放射性核素示踪实验的原理基于两个方面： 相同性，即放射性核素及其标记化合物和相应的非标记化合物具有相同的化学及生物学性质，在生物体内的变化相同； 可测量性，即放射性核素能发出各种不同的射线，可被放射性探测仪器所测定或被感光材料所记录。,二、主要特点 1.灵敏度高：灵敏

2、度可达10-1410-18 g水平，因而对研究体内或体外实验系统内的微量物质具有特别重要的价值。 2.检测方法简便。 3.合乎生理条件：引入高比放射性示踪剂，不会改变体内或体外系统的正常生理平衡，实验结果接近正常生理状态物质的变化。 4.能定位和定性。比如利用RAG可检测示踪剂在组织、细胞内的分布情况等。,三、基本类型、方法及注意事项 (一)类型： 1、整体（体内）示踪实验：将标记物引入完整的机体，从体外或取标本观察标记物的去向，以了解示踪剂在机体内的运动规律，主要用于研究物质在体内的吸收，分布、代谢和排泄过程。 2、离体（体外）示踪实验：指从整体中分离出来的组织或细胞等简单系统进行的实验。多

3、用蛋白质、核酸等的转化规律以及某些精细结构的功能研究。,3.双标记示踪实验：其原理就是将两个研究对象包括两种分子或是一种分子的两种形态或是一种分子的两个部分，分别带上示踪原子，通过采用相应的测量方法，分析两种标记原子的量，观察它们经过运动转化前后比值的变化，判断该两种观察对象的运转规律。,(二)实验方法及应注意的问题 1、标记物的选择： 射线类型：体内示踪实验宜选用射线发射体，如131I、99mTc；离体示踪或取样进行离体测定的研究则多选用射线或低能射线发射体，如3H、14C及125I等。 半衰期：体内示踪实验一般选用短半衰期核素，体外示踪实验可用半衰期长的放射性核素。 放化纯度：必须经过纯化

4、鉴定、放化纯度95%。,比活度：根据示踪实验灵敏度要求选择适当的比活度，整体示踪实验时，标记物的引入基本不改变该物质的体内含量，同时要求能经得起体内的稀释，使放射性测量的统计误差在允许范围内。 标记位置的选择：物质转化的示踪研究要求采用定位标记示踪物，而目标记物在代谢过程中应稳定、不脱落。当研究的目的只是观察标记物的去向，而不管其代谢产物，就不需要严格定位的标记物。,2、选择合适的测量方法：通常根据选用的核素发射的射线种类确定用何种方法测量。如固体闪烁测量，液体闪烁测量、放射自显影等方法。双标记要用双标记方法测量。 3、示踪剂量的估算 示踪剂量的估算不能用简单的公式来估算，应该综合考虑。 稀释

5、作用：放射性核素标记化合物进入机体后，一般要求放射性活度在整个实验过程中，经稀释后所制得的放射性样品不能低于本底计数。,组织的浓聚作用：由于某些放射性核素有亲某种组织的特性，有的放射性核素进入机体后不是完全均匀被稀释，而可能选择性地蓄积到某些器官、组织而浓聚。如131I进入体内后，有30%或更高可被甲状腺摄取，给予剂量时就要考虑这个特异性。 实验周期及安全剂量：根据试验周期长短，实验分析方法，给予途径等进行安全剂量估算。,4、示踪剂引入途径：根据实验类型和目的，对整体动物实验可采用静脉、腹腔、皮下及肌肉注射，或口服、灌胃等。 5、放射性样品的制备：样品的制备是为测量服务的，测量的形式主要有三类：取标本在体外测放射性；制成不同水平的切片作放射自显影；从体外测整体内的放射性。因此样品制备就要适应不同测量类型。,6、数据处理：放射性示踪实验结果可根据不同目的选用不同参数表示，概括为以下几种。 整个脏器的总放射性活度：主要用于研究物质分布的实验以反映各脏器的相对分布量。 放射性含量：dpm/mg组织或ml体液、dpm/mg蛋白或DNA等。用以反映不同组织浓集某种物质的能力。 比活度：dpm/mmol或mg化合物。主要用于研究内源性物质的动态分布或代谢。,相对比活度：用于反映组织中某物质的来源及组织与血液交换的速率，可排除血液中比活度不恒定的影响。 四、示踪实验中的同位素效应