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文档简介

1、课题3:制作泡菜并检测亚硝酸盐含量,专题1 传统发酵技术的应用,你知道哪些蔬菜能制作泡菜吗?,在我国四川、东北、湖南、湖北、河南、广东、广西等地民间均有自制泡菜的习惯。,四川泡菜:味道咸酸、口感脆生、色泽鲜亮,湖北泡菜,广东泡菜,韩国自制泡菜,一、乳酸菌,乳酸菌是发酵糖类主要产物为乳酸的一类细菌的总称。,1.生物类型:原核生物,2.种类:常见有乳酸链球菌和乳酸杆菌 (用于制酸奶)。,乳酸链球菌(球状),乳酸杆菌(杆状),3.分布:,在自然界分布广泛,空气、土壤、植物体表、人或动物肠道内部都有,4.繁殖类型:,分裂生殖(无性生殖),5.代谢类型:,异养厌氧型,(乳酸菌耐盐,最适pH=5,为发酵中

2、的先锋队),6.泡菜原理:,思考1:为什么含有抗生素的牛奶不能发酵 为酸奶?,(抗生素能够杀死或抑制乳酸菌),思考2:泡菜制作中的亚硝酸盐对人体有害吗?,二、亚硝酸盐,自然界中,亚硝酸盐分布广泛,蔬菜、咸菜、豆粉中均含有。,亚硝酸盐为白色粉末,外观与食盐相似,有咸味,易溶于水,可作食品添加剂。,亚硝酸盐为强氧化剂,能够把血液中携带氧的低铁血红蛋白转变为高铁血红蛋白,从而导致缺氧性中毒症状。,1.危害:,一般不会危害人体健康,膳食中的绝大部分亚硝酸盐随尿排出。,0.30.5g时,会引起中毒,总量达到3g时,会引起死亡。,亚硝酸盐,pH=3,温度适宜,一定微生物的作用,亚硝胺,(致癌物质),2.我

3、国卫生标准规定:亚硝酸盐的残留量 肉制品中不得超过30mg/kg, 酱菜中不超过20mg/kg, 婴儿奶粉中不得超过2mg/kg,原料加工,修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状,加调味料装坛,加盐,盐水冷却,泡菜盐水,发酵,成品,测定亚硝酸盐含量,三、制作过程,检查方法:坛口向上,压入水中,看坛内壁有无渗水现象。,无裂纹、无砂眼,坛沿深、盖子 吻合好,火 候 好,蔬菜处理,将鲜菜修整、洗涤、阳光下晾晒,到菜表皮萎焉时收下,切分成条状或片状。,配制盐水,清水与盐按4:1的比例配制好后煮沸冷却。,盐的作用:调味,抑制微生物生长,所以盐含量过低会造成细菌污染。,煮沸(目的):消毒,冷却:是为了不影响乳

4、酸菌的生命活动。,装坛发酵,将泡菜坛洗净,并用热水洗坛内壁两次。 将经过处理的蔬菜混合均匀,装入泡菜坛内,装至半坛时放入蒜瓣、生姜及其他香辛料,继续装至八成满,再徐徐注入配好的盐水,使盐水没过全部菜料,盖好坛盖。向坛盖边缘的水槽中注满水。并注意发酵过程中补充水。,坛沿注满水是为了保证坛内乳酸菌的发酵所需的无氧环境。,腌制条件,温度不能过高 食盐含量不能过低 腌制时间不能过短 细菌污染大量繁殖后,亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10d后,亚硝酸盐含量开始下降。,泡菜发酵的阶段,泡菜在发酵期间,由于乳酸菌的发酵作用,发酵产物乳酸不断累积,因此可以根据微生物的活动情况和乳酸积累量,将泡菜发酵过程分为三个

5、阶段。,蔬菜刚入坛时,蔬菜表面带入的微生物,主要是以不抗酸的大肠杆菌和酵母菌等较为活跃,它们产生较多的乳酸、酒精、醋酸和二氧化碳等,二氧化碳以气泡从水槽内放出,逐渐使坛内形成嫌气状态。,发酵产物中除乳酸外,还有其他,如乙醇、CO2等称异型乳酸发酵,发酵前期:,特点:还有一点点氧气,微生物(大肠杆菌,酵母菌)发酵,产生代谢产物,二氧化碳排出,形成无氧环境,为后面乳酸菌发酵提供条件,乳酸含量逐渐增加,抑制微生物生长繁殖。,由于前期乳酸的积累,pH下降,嫌气状态的形成,乳酸杆菌代谢相对活跃,乳酸的积累量可达到0.6%0.8%;乳酸积累pH达3.53.8.大肠杆菌、酵母菌、霉菌等的活动受到抑制。这一期

6、为完全成熟阶段,泡菜有酸味且清香品质最好。,发酵中期:,特点:乳酸菌逐渐占据优势,其他发酵微生物受到抑制,乳酸积累增多,在此期间乳酸含量继续增加,可达1.0%以上。当乳酸积累达1.2以上时,乳酸杆菌的活性受到抑制,发酵速度逐渐变缓甚至停止。,发酵后期:,此阶段泡菜酸度过高、风味不协调。,特点:乳酸含量过高,抑制乳酸菌活动,乳酸菌减少。,少(有O2乳酸菌活动受抑制),少,增加(硝酸盐还原菌的作用),最多(乳酸抑制其它菌活动),积累、增多、pH下降,下降(硝酸盐还原菌受抑制,部分亚硝酸盐被分解),减少(乳酸继续积累,pH继续下降,抑制其活动),继续增多,pH继续下降,下降至相对稳定(硝酸盐还原菌被

7、完全抑制),思考:,1、加入白酒有什么作用?,白酒可抑制泡菜表面杂菌的生长,它也是一种调味剂,可增加醇香感。,2、用水封闭坛口起什么作用?不封闭有什么结果?,水封闭坛口起着使坛内与坛外空气隔绝的作用,空气中21是氧气,这是最简易的造成无氧环境的方法。这样,坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌生长,蔬菜会腐烂。,3、为什么泡菜坛内有时会长一层白膜,这层白膜是怎么形成的?,形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液营养丰富,其表面氧气含量也很丰富,适合酵母菌的繁殖。,4、为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜?,有些蔬

8、菜,如小白菜和萝卜等含有丰富的硝酸盐。当这些蔬菜放置过久时发生变质(发黄、腐烂)或者煮熟后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐,危害人体健康。,1、测定亚硝酸盐含量的原理,在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,再与N-1萘基乙二胺盐酸盐结合生成玫瑰红溶液。 将经过反应显色后的泡菜待测样品与标准液比色,即可估算出样品中的亚硝酸盐含量。,亚硝酸盐+对氨基苯磺酸 重氮盐,酸性,重氮盐+ N-1萘基乙二胺盐酸盐,玫瑰红溶液,四、亚硝酸盐含量的测定,3、操作流程,2、方法:比色法,(1)配置溶液,对氨基苯磺酸溶液(4mg/mL)溶于盐酸(避光保存),N-1萘基乙二胺盐酸

9、盐溶液(2mg/mL) (避光保存),亚硝酸钠溶液(5ug/mL),提取剂:氯化镉、氯化钡增加亚硝酸盐的溶解度,氢氧化铝乳液除去色素等杂质,得到澄清溶液,氢氧化钠溶液中和乳酸,(2) 配制标准显色液 用移液管吸取0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL亚硝酸钠溶液(相当于1ug,2ug,3ug,4ug,5ug和7.5ug亚硝酸钠),分别置于50mL比色管中,再取1支比色管作为空白对照。 并分别加入2.0mL对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置35分钟后; 再分别加入1.0mL N-1萘基乙二胺盐酸盐溶液,加蒸馏水至50mL,混匀; 观察亚硝酸钠溶液颜色的梯度变化(玫瑰红色逐渐加深)。,(3)制备样品处理液,样品处理液的制备,(4)比色,样品(滤液)加入比色管,显色反应:先加对氨基苯磺酸 ,后加 N-1萘基乙二胺盐酸盐,比色:显色后与标准显色液对比,找出颜色最相近的记录对应亚硝酸盐含量,测定反应原理总结,酸化:对氨基苯磺酸溶于盐酸中,显色:重氮盐+ N-1萘基乙二胺盐

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