动物实验基本技术研究生课课件.ppt

1、毒理学实验一般包括动物试验技术，毒物室2014年09月11日，第一节，动物试验前准备第二节，实验动物的逮捕和固定第三节，实验动物的麻醉第四节，给试验品的方法第五节，各种检查标本的采集方法，第六节实验动物的眼科检查第七节尸体检查和器官标本采集原则和检查方法第八节实验外科的基本操作技术第一节动物实验室必须与实验动物处于同一水平。3.饲养室应符合实验动物的生活习性及国家实验动物设施的各种标准。2 .购买实验动物，1 .必须购买具有实验动物生产供应许可证的机构生产的繁殖实验动物，并要求获得该实验动物的质量合格证。2.从外地购买动物，要考虑运输中各种因素对实验动物的影响，并查阅运输检疫证明。3.购买的动

2、物要经过3 7天的隔离检疫，观察。第三，实验动物编号和标记方法；(1)染色方法：1，单色染色法：每组l0只以下的动物或一个茄子实验不超过40只的情况下适用。实验动物：老鼠、鼠标。常用染发剂：3-5苦味酸溶液，可染成黄色。方法步骤：(1)染色原则：从左到右，从上到下。(2)左前腿是L号，左腹部2号，左后腿3号。(3)两只耳朵后面4次，背中间5次，后腿等6次。(4)右前腿7号，右腹部8号，右后腿9号。(5)尾根是10号。(6)额部20次，双色染色法：每组不超过100只。(。实验动物：老鼠、鼠标。常用的染发剂：(1)3-5苦味酸溶液可染成黄色。用作“个”位数。(2) 0.5%中性红或洋红溶液可染成红

3、色。作为“10”位。方法步骤：(1)用两种茄子颜色同时染色显示。(2)苦味酸(黄色)染色标记为一位数，一位数染色标记方法与单色染色方法相同。(3)用品红色(红色)染色标记为10位数，(4)左前腿10号，左后腿20号，左后腿30号，双耳后40号，等50号，后腿等60号，右前腿70号，右前腿80号，(原则是左耳代表第10位，右耳代表第1位。(阿尔伯特爱因斯坦，美国电视电视剧，耳垂，耳朵)实验动物：兔子、狗、猪，(3)招牌法通常是动物的脖子、耳朵、脚或实验动物：狗、猴子2.用左手拇指和食指快速准确地抓住老鼠的两只耳朵后面和脖子等皮肤，抬起老鼠。3，翻转左手手掌，用左手手掌和中指钳住鼠标等皮肤，使整个

4、鼠标成直线。4.用左手无名指压鼠背部皮肤，小指压鼠尾根。5.松开抓住鼠标尾巴的右手拇指和食指。牙齿方法包括根、腹腔注射、胃管等，第二，松鼠的捕获矫正：，方法步骤：4-5周内大鼠、方法和鼠标。如果酒量大：1，请先戴上防护手套。2.用右手拇指和食指抓住老鼠尾巴中间，抬起老鼠，放在老鼠饲养箱面具上。3.按左手，夹在大老鼠的躯干背上，施加一些压力，向头目滑行。4.用左手拇指和食指抓住老鼠两只耳朵后面的头颈皮肤，用其馀三个手指和手掌抓住老鼠等皮肤，进行矫正。第三，豚鼠抓握修正，设备：老鼠饲养箱口罩L罩。方法步骤：1，首先用左手轻轻锁定，按住豚鼠等。2.沿着肩胛上的皮肤、拇指和食指环扎脖子。3.用右手轻轻

5、托住臀部，就能抓住豚鼠。抓豚鼠的时候一般不要抓腰和腹部。否则肝脏会破裂，导致死亡。4.纠正兔子的抓握：(1)方法1: 1步骤：1，右手抓住兔子脖子的毛发和皮肤，轻轻举起兔子。2.用左手托住兔子的屁股。(b)方法2:设备：兔子修正框架1。步骤：1，打开校准台的盖子，抓住兔子放到架子上，迅速关闭校准台的盖子。2.右手抓住兔子耳朵，把头拉到保定台的栓上，矫正兔子的脖子。3.兔子挣扎的话，用手在背后轻轻摸摸，安静点。5，抓住和固定狗，用特别的长手柄狗头钳抓住狗的脖子，按在地上，助手用绳子固定四肢和嘴。闭嘴时注意松弛，确保动物正常呼吸。第三节实验动物的麻醉，动物麻醉是消除动物手术疼痛，便于实验操作，保证

6、动物安全，为手术创造良好条件。动物全身麻醉是4:1。第一期：出现随机兴奋期，运动和运动不平衡。2.第二期：无意识的兴奋期，在仪式中，直到规则的自动呼吸开始时完全丧失。3.第3期：外科麻醉机，4 .第四期：进入进修麻醉机、牙齿时期，麻醉已经严重过量。麻醉方法和麻醉剂，麻醉方法：全身麻醉和局部麻醉通过吸入、注射(静脉、皮下、肌肉、腹腔)、口腔、胃管等麻醉动物。常用麻醉剂：乙醚(吸入)、奥巴比妥钠、黄土钠、氯胺酮(静脉)、普鲁卡因、利多卡因麻醉剂，注射前要加热到动物的体温水平，第四节是给试验品的方法，实验动物常用的给药方法为口服、注射、吸入等1，口服自动口服药物：2。胃药3360是借用器械，将药物直

7、接注入动物胃的方法。牙齿方法可以精确控制剂量，但操作不当会导致动物死亡。(1)大鼠胃管：方法步骤：1，将胃针连接到注射器，吸入一定量的药液。2.操作前，粗略测量从嘴到胃的距离，估计胃针插入深度。3.用左手抓住动物，向上抬起头。3、右手针，把上面针的前端放在动物嘴里，沿着上腭插入喉咙，沿着后壁轻轻向下推，注入胃针，就能沿着食道滑入动物的胃里，此时没有抵触感。(阿尔伯特爱因斯坦，美国电视电视剧)4。用右手食指慢慢地向下压针螺栓，把注射器的药液倒入动物的胃里。剂量：鼠标约0.1-0.5ml10g体重。最大体积为1.0毫升/老鼠约1-2毫升体重，最大体积为4.0毫升/注意：在胃管过程中不要错误插入支气

8、管。(2)兔胃管，原理：将药液直接注入兔胃。记载：兔子开口器，14号胃管，1个注射器，生理盐水，烧杯，石蜡油。步骤：1，将兔子放入补偿架，助手用手轻轻按兔子的背，以避免兔子的挣扎。2.填饱肚子的人用左手拇指和中指挤压兔子的双颊，挤压下巴，被动地张开兔子的嘴。3，右手在一边的嘴角插入和固定嘴。4.用石蜡油浸泡的胃管通过开口器的孔插入，向前推约15厘米，就可以向上爬。，5，插管时，将胃管的另一端浸入水中，确保没有气泡，将注射器连接到胃管的另一端，轻轻拔出注射器，确认胃液是否插入，如果胃确认了，可以用注射器通过胃管注入药液。胃管营养量：80-150毫升。注意：填饱胃的时候，不要错误地插入支气管。(2

9、)约1，皮下注射：原则：向皮下结缔组织注入药液，通过毛细管、淋巴管吸收到血液循环中。记载：1个1m1注射器，生理盐水，烧杯，酒精，碘酒，棉球。方法步骤：(1)注射部位：颈部等、腋窝、腹侧、后腿皮下(2)注射量：0.1ml0.3ml10g体重。2 .皮内注射，牙齿方法用于观察皮肤血管通透性变化或皮肤反应。注射部位：动物背部脱毛，用针平放在皮肤内，注射药液后，在皮肤表面打小泡，暂时停止，拔注射器。3 .肌肉注射药物原理：向动物的肌肉组织注入药液，通过毛细血管吸收到血液循环中。记载：1个1毫升注射器，生理盐水，烧杯，酒精，碘酒，棉球。注射部位：一般选择肌肉丰富、大血管不通过的臀部或大腿外侧，再抽血就

10、可以注射。4 .腹腔注射，原理：将药液注入老鼠腹腔。记载：一个注射器，生理盐水，烧杯，酒精，碘，棉球。方法步骤：(1)用左手抓住老鼠，抓住保定，使老鼠腹部朝上，老鼠的头部略低于尾巴。(2)右手拿着注射器，在下腹部靠近腹背线的地方扎了针，开了个洞。(。5 .静脉注射药(1)大鼠尾静脉注射原理：将药液注入大鼠尾静脉。记载：1个1m1注射器，生理盐水，烧杯，金属笼或大老鼠，酒精，碘酒，棉球。方法步骤：(1)将大老鼠放在金属黑木启司或鼠标固定器中，通过金属黑木启司或大鼠标固定器中的孔拉出鼠标尾部。(2)用左手抓住老鼠尾巴的中下部，用75酒精棉反复擦尾巴。(3)打针的时候，用左手拇指和中指抓住老鼠尾巴的

11、两侧，用食指从下面抬起尾巴，用无名指抓住尾巴的末端。(4)右手拿4号注射器，使针头与静脉平行(小于30度)。(5)在老鼠尾巴下的14处注射，仔细观察，发现如果没有抵抗，就会出现白色血细胞，血管被刺，可以注射药物。(6)拔下注射器后，用干棉球按压注射部位药L，2min，防止出血。注射量：鼠标0.05m10.1 m110g体重。大鼠1.0-2.0 m1100g体重，(2)兔耳边缘静脉给药原理：兔子矫正架，一个注射器，生理盐水，烧杯，酒精，碘，棉球。方法步骤：(1)将兔子放在补偿帧补偿上。(2)酒精消毒，揉搓血管，使兔子的耳边静脉充满。(3)用左手食指和中指抓住兔子耳边静脉的根部，用拇指收紧静脉的远

12、端，将无名指和小指铺在耳廓下。(4)右手拿注射器，针端斜面向上，针从离心端插入血管，释放静脉忧虑端的压力，抽血的话注射，拔针后用棉球止血。(3)狗静脉注射，注射部位：前腿静脉，后腿小银静脉，6 .脑内注射：7。椎管内注射：牙齿方法主要为脑脊液8。关节内注射：9 .淋巴囊注射可多次采血。2.眼眶静脉采血：经常用于大老鼠、仓鼠的日常血液检查。微量的采血。3.眼球采血：血量比较多，大老鼠，仓鼠4。多用于腹主动脉采血。经常用于大老鼠、仓鼠，动物麻醉后进行，用针在腹主动脉的分叉处与血管平行刺破，采血量大。5.心采血：6。兔耳浅静脉或贵重动脉，颈动脉采血7。狗在前腿静脉，后腿银静脉采血。8.猴子可以在手指

13、末端、脚后跟、后腿皮下静脉、颈静脉进行采血。猪小型猪是耳大静脉、后腿静脉、鼠标各种采血方法的最大采血量，尾剪1-2毫米。眼球采血：0.1-0.6ml/次心脏采血：0.5-0.6ml/次断头采血：0.8-1.0ml/次眼眶静脉采血：0.2-0.3ml/次大鼠，豚鼠，2，体液采集，1。胸水采集2。复仇采集3。消化液采集：主要是唾液胃液胆汁胰液4。尿样采集5。骨髓液采集6。动物精液采集7。乳胶采集、尿液采集、代谢场膀胱法压迫：牙齿方法适用于兔子、猫、狗等大型动物。输尿管插入法、膀胱插管法、膀胱穿刺法、剖宫产尿法、反射排尿法：应用于鼠标。三，采粪，大，鼠标：使用代谢肠兔：大量使用代谢肠犬、猴子、猪：采

14、集自然排出的粪便。第六节实验动物的安死术，实验动物的死刑，应根据实验动物的伦理要求和动物福利法，按照人道原则处死实验动物。第一，“安乐死”的概念：安乐死是指以人道的方式处决动物的过程。在处决动物的过程中，尽量减少动物的恐慌和不安，使动物安静而无痛苦地死去。第二，采用安射术是必须遵守的标准。采用眼射术必须遵守的标准。1 .死时没有恐惧和痛苦。2.在最短的时间内失去意识，导致快速死亡。牙齿方法可靠，可重复。4.对操作员安全。使用的方法必须符合研究要求和目的。情绪对观察者和操作员的影响最小。7.对环境的影响最小。8.所需的机械设备简单、便宜，易于操作。9.处死动物的地点必须相距很远，与动物室分开。眼

15、斜术的一般方法，颈椎脱位法是实验动物的颈椎脱位，切断脊髓死亡，是大老鼠最常用的死刑方法。空气栓塞法常用于处死兔子、猫和狗。兔子，猫是20-40毫升，狗是80-150毫升。用过量麻醉处死老鼠、豚鼠、兔子，常用于吸入乙醚或在腹腔注射巴比妥钠。二氧化碳吸入法使实验动物吸入大量C02等气体，中毒死亡。断头死刑法、颅骨死刑法、第7节尸体检查及器官标本收集原则和检查方法、尸体的外部检查技术、尸体内脏器官收集技术、尸体内脏器官检查技术、第8节实验外科的基本操作技术、术前无菌技术手术准备的基本操作技术术后动物管理和观察、1、术前准备、1。手术室的要求和手术室的准备位置及设计原则，手术室的设备等2。动物准备3。手术器械、物品、敷料准备、2、无菌技术：对微生物和感染途径的一系列预防措施。包括灭菌、消毒法、操作规