动物细胞融合与单克隆抗体.ppt

1、植物组织培养和动物细胞培养的比较,细胞的全能性,细胞增殖,固体培养基,液体培养基,蔗糖 植物激素,葡萄糖 动物血清,植物体,细胞株、细胞系,快速繁殖、培育无病毒植株,获得细胞或细胞分泌蛋白,1.植物体细胞杂交和动物细胞融合共同的优点是什么？_,2.白菜（2N=20）、甘蓝（2N=18），那么由白菜甘蓝通过植物体细胞杂交形成“白菜甘蓝”。思考下列问题： （1）“白菜甘蓝”是否可育？为什么？ （2）“白菜甘蓝”含有多少染色体？属于几倍体？ （3）“白菜甘蓝”可以看成一个新物种吗？ （4）“白菜甘蓝”在形态上表现为_；其根本原因是_ （5）植物体细胞杂交形成“白菜甘蓝”的两个关键环节是什么？_,克服

2、远缘杂交不亲和障碍,可育,38，,四倍体,可以,双亲性状,含有双亲的全部遗传物质,用纤维素酶和果胶酶去壁、原生质体的融合,含有同源染色体，且染色体组是偶数，可减数分裂产生正常配子，受精作用便可产生后代,动物细胞工程,动物细胞融合与单克隆抗体,2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体,2.2.2.1 动物细胞融合（细胞杂交）,1.动物细胞融合的概念：,动物细胞融合指_或_动物细胞结合形成_的过程。,两个,多个,一个细胞,诱导动物细胞融合的方法：,物理法:离心、振动、电激、化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法:灭活的仙台病毒,2.动物细胞融合过程：,诱导,细胞膜穿通,细胞膜融合,细胞核融合，形成单核杂种细

3、胞,动物细胞融合,杂种细胞,愈伤组织,杂种植株,植物细胞A,植物细胞B,原生质体A,原生质体B,植物体细胞杂交,去壁,原生质体融合,植物组织培养,物理法,化学法,生物法： 灭活的病毒,常用方法,植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较,原生质体的融合 植物组织培养,动物细胞融合,膜的流动性 植物细胞的全能性,膜的流动性,物理法、化学法,物理法、化学法、灭活的病毒,获得杂种植株,主要用于制备单克隆抗体,2.2.2.2 单克隆抗体,阅读教材思考下列问题： （1）.抗体由什么细胞产生？传统方法从哪里分离得到抗体？这样得到的抗体有什么特点？为什么呢？,答：,效应B细胞（浆细胞）,血清,产量低、纯度低、特异性

4、差,多种病原体的刺激下，机体会分化出多种效应B细胞，由于每个效应B细胞只能分泌一种特异性抗体，所以体内抗体种类多达上百万种，纯度自然就比较低了。,设计方案： 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖,杂种细胞,根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的 实验方案:,1、单克隆抗体制备过程,细胞融合、筛选,克隆足够数量的、能产生特定抗体的杂交瘤细胞,单克隆抗体,诱导其融合的方法有哪些？,（1）为什么用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合？,思考：,（2）单克隆抗体制备过程中应用哪些细胞 工程技术手段？依据的原理分别是？,（3）制备过程为何要经过两次筛选？,因为B淋巴细胞具有分泌

5、特异性抗体的能力，而骨髓瘤细胞具有在体外培养条件下大量增殖的本领，所以由某种B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞，能够在体外大量繁殖，并且产生特定的单克隆抗体。,思考（1）,思考（2）,单克隆抗体,技术 原理,动物细胞融合,膜的流动性,动物细胞培养,细胞增殖,？,？,抗原,效应 B细胞,筛选,筛选,杂交瘤细胞,A型细胞 B型细胞,【堂堂清】,1.单克隆抗体的优点是_,特异性强、灵敏度高、可大量制备,2.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的原因是 _,每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体,3.产生抗体的细胞是_ 产生单克隆抗体的细胞是_,效应B细胞（浆细胞）,杂交瘤细胞,4.杂交瘤细胞的特

6、点: _,既能无限增殖，又能分泌特异性抗体,5.首次筛选是为了获得_ 第二次筛选时为了获得 _,杂交瘤细胞,既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,【例1】.下列关于利用细胞工程技术制备单克隆抗体的叙述，不正确的是 A给小鼠注射抗原，是为了获得能产生相应抗体的B细胞 BB细胞与骨髓瘤细胞混合培养，是为了获得融合细胞 C杂交瘤细胞进行体外培养，是为了获得单克隆抗体 D杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎,【例2】（多选）下列在现代生物科技的应用中，需要进行检测与筛选的是 A对植物的愈伤组织进行诱变处理，培育作物新品种 B将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，制备单克隆抗体

7、C利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜甘蓝” D将抗虫基因导入植物细胞，培育具有抗虫特性的新植株,ABCD,【单克隆抗体的应用】,作为诊断试剂,优点：,举例：,准确、高效、简易、快速,定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病 早早孕诊断试剂盒,用于治疗和运载药物,单独使用：,结合使用：,主要用于治疗癌症,“生物导弹”,组成 作用方式 优点,【反向思考】 单克隆抗体的应用是很广泛的，仔细思考后，你能发现这些应用都是建立在什么基础之上吗？,答：都是建立在单克隆抗体的特点上，及特异性强、灵敏度高这一特点上。,【例3】产生专一抗体的杂交瘤细胞，通过大规模培养，就可以获取大量的单克隆抗体下列有关这项技术的分析，错误的是 A单克隆抗体的最