仪器分析（大连理工大学） 5.5 毛细管电泳分析的应用.ppt

1、05:49:14,第五章毛细管电泳,5.5.1 离子化合物的分析 5.5.2 在生物化学中的应用 5.5.3 在手性化合物分离中的应用,第五节高效毛细管电泳的应用,capillary electrophoresis, CE,Application of HPCE,05:49:14,5.5.1 离子化合物的分析,1.阳离子分析 迁移方向和电渗流方向一致； 4.5 min内分离了24种金属离子； 阳极进样，阴极检测； 具有很高的灵敏度。,05:49:14,2.阴离子分析,阴离子电泳方向和电渗流方向相反、速率接近，分析时间长、效率低。 质量小、电荷密度大的离子如：SO42-，Cl-，F-等，电泳速率

2、大于电渗流，阳极端流出，在阴极端无法检测。 加入电渗流改性剂，十六烷基三甲基溴化胺等，使电泳方向和电渗流方向一致，可在3.1 min内分离36种阴离子。 阴极进样，阳极检测。,05:49:14,5.5.2 在生物化学中的应用,检测体液或细胞中某些代谢产物的分析。 尿液中的氨基酸含量作为临床诊断糖尿病的辅助手段。 采用毛细管区带电泳方式，在11min内分离17种药物。,05:49:14,采用MEKC模式，鉴定违禁药物，效果优于HPLC法。,05:49:14,氨基酸与蛋白质分析,采用MEKC模式，在25min内分离了23种丹酰化氨基酸； HPCE可取代传统的氨基酸分析仪。 问题：吸附和检测。,05

3、:49:14,蛋白质分析,05:49:14,核酸分析及DNA测序,重要分析手段。 图为酶解的双螺旋DNA限制性片段的分离。,05:49:14,5.5.3 在手性化合物分离中的应用,合成获得单一手性化合物相当困难。在528种手性合成药物中，61种以单一对映体形式销售，其他为外消旋体。检测分析也相当困难。研究热点。 R- 型反应停是安眠药，S-型致胎儿畸形。 HPCE分离分析手性化合物的方法：加入手性选择剂， 形成配合物的稳定常数有差异，结合HPCE的高效率。 常用手性选择剂：环糊精及其衍生物，手性冠醚，手性表面活性剂（氨基酸衍生物，胆酸钠，牛磺脱氧胆酸及其钠盐，低聚糖等天然手性表面活性剂）。,0

4、5:49:14,手性化合物分析,利用手性冠醚的CZE模式分离,利用手性胶束的MEKC模式分离,05:49:14,手性化合物分析,Regan等利用CE研究了生物技术制备BCH-189（抗爱滋病药物）过程中的某些反应，如其中的有效成分（+）-BCH-189是在胞苷脱氨酶催化下经生物转化方法合成的，转化过程持续51h，可采用CE法分析监测转化过程中手性对映体转化（分离的手性选择试剂为二甲基-CD）。,对映异构体随时间转化过程的HPCE分析监测谱图,05:49:14,新进展,（1）微型化 整体化学分析系统（TAS）及TAS微型化 在硅片上光刻出矩形槽作为毛细管，理论塔板数105/m。 （2）联用仪器 CE-MS。 （3）阵列毛细管凝胶电泳 应用于人类基因DNA测序； 510万个基因，30亿个碱基对，目前最有效的DNA序列分析仪，10h/次；可同时电泳24个试样；速度1200碱基对/h，提高速度！ 100支毛细管阵列电泳；速度280碱基对/(h支)。,05:49:14,请选择内容,结束, 第六章,5.1 毛细管