实验三 家兔Hb、RBC脆性测定及影响PPT.ppt

1、1,实验三 1、血红蛋白的测定(比色法) 2、红细胞脆性的测定 3、影响血液凝固的因素,2,血红蛋白的测定（P80） 1 目的 掌握比色法测定动物血红蛋白含量的方法。 2 实验原理 血红蛋白的量与血液颜色呈正相关,3,3 主要材料 家兔、沙里氏血红蛋白计、0.1N盐酸 4 方法与步骤 4.1 清洗：血红蛋白吸管、比色管； 4.2 将0.1N盐酸加入比色管中至刻度“2”处； 4.3 加样：用血红蛋白吸管取血20L，加入盐酸中，并利用上层盐酸将吸管内壁洗涤2-3次（避免起泡）； 4.4 酸化10min以上； 4.5 比色； 4.6 读数： 绝对数：每100mL血液中血红蛋白的克数； 相对数：,4,

2、5 注意事项 5.1 血红蛋白吸管和比色管要清洁； 5.2 取血要准确； 5.3 避免比色管内起泡； 5.4 蒸馏水要逐滴加入，防止过量； 5.5 酸化时间不能少于10min； 5.6 在自然光下比色，比色无刻度一方朝外。,5,红细胞脆性的测定（P82） 1 目的 学习测定红细胞渗透脆性的方法，理解溶液渗透压在维持细胞正常形态中的作用。 2 原理 红细胞膜对低渗溶液的抵抗力，称为RBC渗透脆性。 用低渗NaCL溶液的浓度表示：最小抵抗、最大抵抗,6,3 实验动物：家兔 4 方法与步骤 4.1 溶液配置 表2 不同浓度NaCl溶液配制,7,4.2 制备抗凝血：柠檬酸钠抗凝血。 4.3 加抗凝血：

3、每只试管加1滴，轻轻混匀。 4.4 静置1h 4.5 观察结果 4.5.1 未溶血试管： 出现分层现象，下层红色浑浊，上层为无色透明。 4.5.2 不完全溶血试管： 出现分层现象，下层红色浑浊，上层为淡红色透明。 4.5.3 完全溶血试管： 无分层现象，完全淡红色透明。,8,6 注意事项 6.1 试管要洁净、干燥； 6.2 配液要准确； 6.3 加血量要一致，1D； 6.4 轻轻倾倒试管2-3次混匀，避免机械溶血； 6.5 静置时间保证1h，防止中途人为振动； 6.6 在光线明亮处观察结果。,9,影响血液凝固的因素（P88）,1 目的 以凝血时间为指标，了解影响凝血的因素。 2 原理 血凝是一

4、个酶促过程，有多种凝血因子参与，分为内源性和外源性凝血两个途径。,10,3 动物：家兔 4 方法与步骤 4.1 家兔的麻醉、保定与手术 33%乙醇溶液，6mL/kg，耳缘静脉注射。 4.2 试管准备 4.3 颈动脉采血 4.4 记录凝血时间,11,5 实验结果 表1 血液凝固及其影响因素,12,6 注意事项 6.1 采血过程要尽量快，以减少计时误差； 6.2 每支试管口径大小及采血量要相对一致； 6.3 液体石蜡管内多余石蜡应尽量弃除； 6.4 判断凝血的标准要一致，一般以倾斜试管 达30-45时试管内血液不见流动为准。,13,表1 不同浓度NaCl溶液配制,表2: 血液凝固及其影响因素,14,实验报告撰写格式有要求,15,家兔Hb、RBC脆性测定及影响血凝因素的观察,1 实验相关信息及目的 2 材料 2.1 动物 2.2 主要药品： 2.3 主要仪器： 3 实验方法：简述或按生理实验指导书ab页介绍方法进行1 4 结果 4.1 家兔Hb、RBC脆性测定：见表1。,表1:家兔Hb、RBC脆性测定,4.2 家兔血凝时间的测定：见表2。,表2：不同因素对家兔血凝时间的影响,5 讨论,5.1 家兔Hb测定结果与对照比较，其值?，原因：,5.2 家兔RBC脆性测定结果与对照比较，其值?，原因：,5.3 家兔血凝时间测定结果表明，时间长短