《转基因动物技术》PPT课件.ppt

1、Transgenic Technology，Definition transgenic Technology refers to the genetic engineering of an organism so that its genomic DNA is altered to、transgenic technique gene knock out gene knock in gene knock down gene trapping mouse、rabbit、rat、sheep、pigthe 2007 nobel prize in physiology or medicine is aw

2、arded for their discoveries of principles for introducing specific gene modifications in mice by，Oliver smithi es Martin j . Evans Mario r . cape cchi，evanss work 3360 the es cells，stem cell me Embryonic stem cell，ES，somatic 北京市黄新科技北京市大学生物技术转换平台，25健康科学驱动器研究手册，ny 10 USA，一，靶标载体，指定突变技术，STRATAGENE，Agile

3、nt Technologies Loxp位置：locus of crossing-over(x)in P1 site :Cre-LoxP系统的特性，Cre重组酶是动态可逆的过程，在两个LoxP位置之间进行重组，可以分为三种茄子情况2。两个LoxP点位于一条DNA链上，但相反的方向，Cre重组酶可以反转两个LoxP点之间的顺序。3.如果两个LoxP点分别位于两个不同的DNA链或染色体上，Cre酶可以介导两个DNA链的交换或染色体易位交换。两个loxp网站的相反方向，、cre、loxp、loxp、gene、gene、promoter“第二分子开关”FLP/frt系统与Cre/loxP系统一起，可以

4、更精确地控制基因表达、时间控制和组织特异性表达，Cre的表达还可以通过在启动子中引入特定配体的组件(如药物)来达到时间控制和组织特异性表达。四周期素、一型干扰素、三苯氧胺可以与与雌激素受体相互作用的蛋白质结合，用于获取药物柔道启动子。lsl-cre: loxp-stop-loxp、crefsf-fl po 3360 frt-stop-frt、flpo established lung tumors、si-flpoTK基因仅在肝癌细胞中表达。neo基因卡那霉素耐药基因编码为新霉素磷酸转移酶II，基因记录为Neo，可以分解G418，新霉素，卡那霉素，以实现真核和原核细胞的相应抗性。一般来说，原核生

5、物应用是卡那霉素抗性基因，应用于真核生物的是G418抗性。外源基因导入ES细胞的方法是： 1。电穿孔法2。逆转录病毒传递法3。地质体包装法4。磷酸钙沉淀法，3，囊胚注射，杂交筛选，鼠标基因型鉴定？标准线：ES细胞线：E14Tg2a (129背景)；JM8(C57BL/6N系列)；JM8A3(C57BL/6N系列，探索Agouti)注射用囊胚系列：C57BL/6C57BL/6，129和C57BL/6系列鼠标近交系Inbred Mice，C57bl/129系列EMSC57BL/6 ES cell相对细腻。表1。用基因打靶法制备的一系列重要基因消除了老鼠和表型。基因表型RAG-1和/或RAG-2没有TcR基因重排，T细胞TcR双音胸腺细胞聚集，双阳胸腺细胞较少，TcR牙齿正常重排TcR有双音和双阳T细胞，单阳T细胞P56 LC没有。无T细胞CD3- T细胞发育在早期双阳性成熟期，CD45 T细胞发育在双阳性成熟期受阻，MHC-，不变性无CD4T细胞，CD4 CD8-/非常少，正常NK，1.1 CD4，CD8正常CD4 CD8数和功能正常MHC-，