第12章-分子发光-荧光与磷光-PPT课件.ppt

1、仪器分析课程，厦门大学名牌课程仪器分析(包括实验)，第12章，Chapter Twelve，分子荧光3360Fluorescence分子磷光3360Phosphorescence，首次记录分子发光荧光现象是在16世纪西班牙的内科医生，植物学家N。到1852年，Stokes考察奎宁和叶绿素的荧光时，用分光光度法观察了该荧光的波长比入射光的波长稍长。这种现象被认为是吸收光能后，重新发射其他波长的光，而不是光的扩散作用。荧光引入了光发射的概念，并由发出荧光的矿石“萤火虫”推断。1867年，Goppelsroder进行了历史第一次荧光分析，应用铝桑叶色素配合物荧光测定铝。19世纪以前，荧光的观察是肉眼

2、进行的，直到1928年，Jette和West才提出了第一个荧光仪。1 .分子荧光和磷光的产生，1 .断重商态和三重商态，2。分子的激活和激活，3 .分子发光的类型，根据此处的图案分类：按分子激发态类型分类：光致发光化学发光/生物发光热发光场发光摩擦发光，按光子能量分类斯托克斯荧光(Stokes): ex em共振荧光(Resonance): ex=em，分子的激活和激活辐射转移类型，共振荧光：10-12 sec荧光：10-8 sec磷光：110-4 sec迟滞现象荧光336010210-4 sec，2。分子荧光(磷光)频谱，1 .荧光(磷光)，a .此处频谱，固定em=620nm(MAX)，e

3、x=290nm (max)，固定发射波长扫描此波长，荧光激发光谱是UV-vis吸收光谱，固定em=6200nm分子的发生光谱可以包含多个发生带，但只能包含其中一个发射光谱的发射带。即使分子被刺激到比S1更高的电子状态，由于非常快的内部转换和振动松弛，它会下降到S1电子状态的最小振动，能级旋转，然后发射能量，返回到基态状态。I F f (ex，em)、蒽的发射光谱、固定激发波长、扫描发射波长、蒽的三维等高线频谱、蒽的三维荧光强度频谱、VB1和VB2的三维荧光频谱、RLS、ds、ts、ATS分子荧光(磷光)强度与荧光物质浓度的关系，1。荧光强度(磷光)；荧光强度(IF)与相应的吸光分数成正比。给水

4、展开式：稀溶液的bc0.05(磷光bc0.01)诗：IF -荧光强度F -荧光量子产率，IP -磷光强度P -磷光杨紫产率，B-吸收光晶体-摩尔吸光系数C-荧光物质浓度荧光(磷光)的平均寿命，分子的激发态平均时间或激发态对于S1(T1)电子状态下的荧光粉，平均寿命()在左侧，3 .荧光(磷光)的量子产率，荧光量子产率的定义：kF，KP主要是荧光物质和分子结构St系列之间的跳跃效率。Ki主要取决于化学环境，荧光物质的分子结构也相关。大多数荧光物质的杨紫产率在0.11之间。例如：0.05mol/L的硫酸喹啉，f=0.55荧光素F=1，1。过渡类型，2。荧光和有机化合物结构、有机荧光物质：*、n *

5、 max 100平均寿命10-510-7sec、* max104平均寿命10-710-、强荧光有机化合物特征：具有大轭关键结构。刚性平面结构最低的单电子激发态S1为*型。置换团是电子置换通风。12.2分子荧光和磷光强度的影响因素，1 .荧光的量子产率，2，荧光物质的刚度和平面性增加，有利于荧光发射。3 .刚性平面结构，芴，郑智薰苯基，F=1，F=0.2，不生成荧光，生成荧光，不生成荧光，F=0.92，萘，VA，F(萘)电子替换器减弱荧光，加强磷光，C=0，COOH，NO2，P共轭。硝基苯：不产生荧光、弱磷光、空间位阻对。纯2苯乙烯非荧光物质，电离效应对荧光发射的影响，pH=1，有荧光，pH=1

6、3，没有荧光，有荧光，有荧光，含重原子的溶剂，由于重原子效应，荧光减弱，磷光增强。5 .中原子撞击效应，Cl，Br，I，S1 T1的系间跳跃是由于中原子的存在增强而导致的6 .溶剂效应，蓝移： E n * E n *，红移： E* E*，极性溶剂中8羟基喹啉弱荧光，8羟基喹啉-Zn螯合物黄绿色强荧光，2，2-二羟基偶氮苯无形光，2，2-，相对速度1 K1 M* K2 M* Q与分子的直径、粘度、温度等有关。2 .能量转移关闭，再吸收过程：共振能量转移：分子内能量转移：发射关闭，3。氧消失作用，氧分子荧光，磷光消火剂，4。自消化和自吸收，荧光物质的浓度大于1g/L时，12.3荧光(磷光)分光光度

7、计，1 .主要组件和组件的功能、荧光分光光度计工作原理和仪器结构箱、光源、氙灯、此处单色器、样品池、光电倍增管、数据处理仪器控制、2。光源，1 .光源要求：辐射强度足够稳定的连续频谱辐射强度随着波长的变化，寿命足够长。2.氙灯光源，常用气体放电灯类型：氙灯光源高压汞灯，波长范围：2001000nm工作压力：520 ATM最广泛使用的连续光源：辐射波长范围宽发射光强度，3 .高压汞灯光源，应用范围广泛的线光源：253 . 7 296 . 5 302 . 2 312 . 6 313 . 2 365 . 0 365 . 0 365 . 5 366单色器、平面衍射光栅、线色散率、聚光技术、分辨率、4。

8、探测器，光电倍增管放大系数：2n5nN=10，103107，最大值为108109，5。样品池：灌木丛，荧光池，1 .样品池的材料：和紫外线-可见分光光度计的吸收场一样，2 .吸水池的形状：紫外线-可见分光光度计的吸收、污染问题、闪蒸特性、6。磷光分光光度计，1 .光学系统和荧光分光光度计的区别，共振荧光：10-12 sec，荧光：10-8 sec，磷光：110-，12。荧光分析法的应用，1 .工作曲线法荧光分析的灵敏度比紫外线分光光度法103104。荧光灭火工作曲线法，直接荧光标准曲线法，2。荧光分析法的灵敏度在紫外线中可能发生荧光的无机化合物较少，主要取决于有机试剂形成螯合物。3 .荧光分析

9、的应用，1 .无机化合物，直接荧光测定法，其中更经常测量的元素：Be，Al，B，Ga，Se，Mg，Zn，Cd和一些稀土元素测量的灵敏度可能达到10-10。一些元素没有形成有机试剂和发光的配合物，但它与发光的配合物和配位体争夺不引起荧光的合作，从而产生荧光牙齿关闭荧光牙齿关闭的强度牙齿元素的含量。更频繁测量的元素：F，S，Fe，Ag，Co，Ni，Cu，Mo，W，W，荧光熄灭测定法，自1867年Goppelsroder进行历史第一次荧光分析以来，使用铝莫林配合物荧光测定铝后，催化荧光，低温荧光测量，经常测量的元素：Cu，Be，Fe，Co，Os，Ag，Au，Zn，Al，Ti，v，Mn，Er，H2O2，CN，