凝胶过滤法分离蛋白质.ppt_第1页
凝胶过滤法分离蛋白质.ppt_第2页
凝胶过滤法分离蛋白质.ppt_第3页
凝胶过滤法分离蛋白质.ppt_第4页
凝胶过滤法分离蛋白质.ppt_第5页
已阅读5页，还剩5页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、实验三 凝胶过滤法分离蛋白质,血红蛋白+高铁氰化钾 高铁血红蛋白 Mw=64 500 Mw=327.25 黄色(过量) 红褐色,实验原理 凝胶过滤法(分子筛层析/凝胶层析): 凝胶多孔凝胶颗粒(分子筛)： 交联葡聚糖凝胶 (Sephadex G-25 ),PBS,大分子不能进入凝胶颗粒内部，直接沿凝胶颗粒间隙流出，流程短，故先洗脱出来; 小分子则扩散进入凝胶微孔，流程长，在柱内保留时间长，则后洗脱出来,凝胶过滤法的分子筛效应,G-25凝胶颗粒,大分子,小分子,大分子,凝胶颗粒,小分子,操作步骤,凝胶准备（已完成） 装柱（关开关） 样品处理 (3滴+8滴+2滴，已完成) 上样(开关，加样0.2m

2、l，开) 洗脱(3cm) 分部收集（10滴/min, 13滴/管） 测定A425(+2ml蒸馏水，空白管),1.装柱后 及洗脱时,2.上样时,柱床,PBS (3cm),PBS (1mm),管编号,A425,1 2 3 4 5 6 7 8 9 10,洗脱图谱,MetHb,K3Fe(CN)6,1. 装柱后要检查柱床是否均匀，若有气泡或分层的界面时，需要重新装柱。 2. 上样时滴管末端一定要靠近凝胶柱表面(1cm)、沿柱内壁缓缓滴加，不能冲击凝胶柱表面。样品上柱后应在凝胶柱表面形成一层薄液层。 3. 收集要及时，不能等红褐色物质流出之后再收集(13滴/管)。 4. 流速不可太快(约10滴/min)。 5. 洗脱过程中要防止凝胶柱洗脱液流干(3cm)。 6. 洗脱完成后凝胶要回收，勿丢

人人文库> 全部分类> 生活休闲 > 科普知识

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论