银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡脂肪代谢的影响说明书.doc
银杏叶提取物加蝇蛆喂鸡对鸡脂肪代谢的影响说明书带开题
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目 录摘要 6abstract 7引言 8正文 91材料与方法 91.1药品与试剂 91. 2试验动物及分组处理 92. 1.3病理学检查 92结果与分析 102.1病理学检查 102.1.1肝脏的病理变化 102.1.2肝脏组织学变化 103讨论 114结论 12参考文献 13致谢 149 银杏叶提取物对鸡脂肪代谢的影响摘 要目的：本试验主要研究银杏叶提取物作为饲料添加剂饲喂鸡对鸡脂肪代谢的影响。方法：（1）将120鸡随机分为3组，每组40只， A组 饲喂基本日粮（对照组）；B组 饲喂基本日粮+1%蝇蛆；C组 饲喂基本日粮+0.1%的银杏叶提取物+1%蝇蛆（2）饲养45天后，每组随机抽取15只鸡进行剖检，取出肝脏并观察肝的病理变化，制作病理组织切片，观察肝脏组织学改变。结果：观察肝的病理切片，发现AC组肝细胞病理切片正常，而B组因为饲喂蝇蛆而而导致肝脏的水泡变性。结论：饲喂蝇蛆后不当会导致肝轻度受损，而银杏叶提取物对慢性肝损坏有良好的保护作用，降低了肝脏损伤的程度。关键词：银杏叶提取物；蝇蛆;病理切片；水泡变性Ginkgo biloba extract the influence of chicken fatty liverAbstractObjective: this experiment mainly research ginkgo biloba extract feeding for chicken weather cause fat metabolism influence. Methods: (1) put 120 chickens into three groups random, each group have only 40 Group A, feeding basic diet (control group); Group B, feeding basic diet + 1% flies maggots; Group C, feeding basic diet + 0.1% of ginkgo biloba extract + 1% flies maggots (2) raising 45 days, each group of 15 chickens were taken randomly for making profile anatomy, then removed liver and observed the liver pathological changes, making pathologic biopsy and observation liver pathology. Results: observing the liver pathological, found liver cell of Group A C is pathological normally, Group B, which has fed flies maggotsand, has caused the liver blisters degeneration. Conclusion: fed flies maggots undeserved cause liver mild damaged, while ginkgo biloba extract has good protection effect for chronic liver damage, it also reduces the liver injury level.Keywords: ginkgo biloba extract; Flies maggots; Pathological; Blisters degeneration 引 言随着人们的生活水平的逐步提高，肉类食品在人的日常饮食中占有的比例越来越大，尤其是鸡肉。在这种经济的刺激下，提高鸡的品质尤为重要。为了提高经济效益，很多鸡场，采用用蝇蛆作为饲料添加剂。因为蝇蛆作饲料适口性好，转化率高，营养比豆饼高13倍。鲜蝇蛆中蛋白质量15.6。干蝇蛆粉粗蛋白5963，粗脂肪10一20，赖氨酸为 4 1，蛋氨酸1.8，色氨酸0.7，营养价值很高，适合作为鸡的饲料1 。此外也研究表明以蝇蛆作为蛋白补充饲料饲喂蛋鸡 ， 根据不同生长阶段分别加喂不同量的蝇蛆，可促进生长阶段蛋鸡的日增重和蛋鸡的产蛋量 。日增重的提高可以降低了饲料消耗量。鸡蛋的产蛋量不仅提高了，鸡蛋中胆固醇含量也是普通鸡蛋的二分之一，有利于人类健康。2 但是在饲养过程中，蝇蛆饲喂比例不当很容易会影响鸡肝脏代谢。例如鸡脂肪肝综合症，这种疾病普遍发生于笼养蛋鸡，尤其是处于产蛋期高峰的蛋鸡3。发病率一般为5%左右，这种疾病会导致产蛋量逐渐下降2%50%。产蛋率越高越易发生，造成的危害也越大。近十几年来，我国养鸡业发展迅猛，集约化养鸡规模不断扩大，该病有逐年增多的趋势，给现代密集型养禽业带来了严重的经济损失。为了降低这种损失，我们思考如果用银杏叶做添加剂是否会降低鸡肝脏代谢疾病的发病率。林跃鑫等人4发现银杏叶具有益心敛肺、 化湿止泻的功效,银杏叶的提取物( extract of Ginkgo biloba, EGb)其主要成分只要为黄酮类、 萜类、生物碱、 多糖、 酚类及氨基酸等，具有体外抑菌和抗病毒作用，并调节血脂，提高机体免疫等功能。沈海中5等也人发现银杏叶乙醇及水提取物均可明显增强小鼠淋巴细胞线粒体脱氢酶的活性和中性粒细胞过氧化物酶的释放，这样可以提高机体免疫细胞功能。目前尚未见到有关于银杏叶提取物加蝇蛆粉喂鸡对鸡脂肪代谢影响的报道。本试验试图通过对鸡肝脏病理改变来观察银杏叶提取物加蝇蛆粉对鸡脂肪代谢的影响。 1材料与方法本次试验时间为2011年2月到4月，在南通文圣生态特种养殖有限公司进行，场址位于江苏省南通市海安县墩头镇，本养殖场改变了传统的养殖模式，形成了有自己特色的生态养殖模式。用饲料养猪，畜禽粪便养蛆，再用鲜活蝇蛆喂养畜禽、水产等。以降低饲料成本，提高畜禽、水产的生长速度，同时提高畜禽、水产抗病能力及产品的品质，也更好的解决了家畜、家禽粪便的排放问题，改善了环境。本次试验正是借助于养殖场内的设施，以及专门的养殖人员，科学的饲养管理条件下进行的试验。1.1药品与试剂电子称、饮水槽、料槽、高倍显微镜、病理切片机（广东 RM2235）、福尔马林、75%到100%的酒精溶液、二甲苯、苏木精、伊红。1.2试验动物及分组处理选取120只1日龄健康草鸡雏鸡，随机分成3组，每组40只，饲养45天，每天每组分别饲喂：表1 试验动物及分组处理table1 grouping and treatment of animals序号组别A饲喂普通饲料（对照组）B饲喂普通饲料+1%蝇蛆粉C饲喂普通饲料+1%蝇蛆粉+0.1%银杏叶提取物在试验开始前，首先将每组雏鸡在新搭建的鸡笼里饲养3天，以减少小鸡因为换了环境而产生的应激反应，减少因为应激反应而产生吃食饮水量减少，将试验误差尽量降低到最低。雏鸡前22天饲喂全价颗粒饲料，配以蝇蛆和银杏叶提取物，22天之后饲喂的是自配饲料（即：28%豆粕+62%玉米+5%预混料+5%麸皮）。试验开始后每天早晚各投料一次，并记录投料量以及次日剩余的饲料量，每一周称量一次体重并记录。及时注意观察各组小鸡的死亡数量并记录。整个试验过程采取正常的饲养管理及免疫程序。 1.3病理学检查1.3.1病理学解剖 在这样的环境下饲养了45天以后，每组随机抽取15只解剖，采取颈动脉取血后处死，剖开腹腔观察肝脏的病理变化。1.3.2病理组织学检查 取草鸡的肝脏用生理盐水漂洗以除去血液和其他污物，将脏器放入10%的中性福尔马林固定12h，再经脱水、浸蜡、包埋、切片和HE染色等处理，显微镜观察。2结果与分析2.1病理学检查2.1.1肝脏的病理变化 AC组草鸡剖检时无明显病理改变，B组大部分肝脏体积略大，颜色变淡，质脆易碎。2.1.2肝脏组织学变化ac组肝细胞多边形依然可见。肝细胞的胞浆和胞核颜色均匀，肝细胞结构清晰，排列规则。（图一，图三）b组呈现肝脏的水泡变性。整个细胞被水泡充盈，胞浆的原有结构完全被破坏，胞核悬浮于中央或被挤压在一侧。肝细胞体积增大、 数量减少，胞浆空白，形如气球，整个细胞呈蜂窝状结构，外形如气球。（图二）图1饲喂普通饲料HE染色 400倍Fig.1 Feeding ordinary图2饲喂普通饲料+1%蝇蛆粉 HE染色 400倍Fig.2 feeding ordinary feed+1% flies maggots powder图3普通饲料+1%蝇蛆粉+0.1%银杏叶提取物 HE染色 400倍Fig.3 feeding ordinary + 1% flies maggots powder + 0.1% ginkgo biloba extract3讨 论肝脏是动物体内参与消化的最大腺体，主要是代谢、储存、解毒功能。各种有害因子和物质，如病毒、药物、乙醇、缺氧、内毒素、免疫等， 能以肝细胞作为靶细胞， 激发肝细胞损伤。肝细胞损伤的机制很复杂， 可分为化学性和免疫性肝损伤两类6。蝇蛆在较低的适宜浓度使用时，具有促进畜禽生长和蛋白质同化作用， 对提高饲料利用率有较好效果7， 本试验中我们采取饲喂过量的的蝇蛆导致肝细胞变性。试验中出现的水泡变性属于细胞肿胀的一种，是由于细胞内水分增多，胞体增大，胞浆内出现大小不等的水泡，可能是由于缺氧，缺血，中毒，脂肪过度氧化，细菌及病毒感染，免疫反应等。蝇蛆的营养价值较高，能过提高蛋鸡蛋的品质，但过度的营养会造成肝脏代谢紊乱，从而导致肝脏代谢疾病8。银杏叶提取物具有抗氧化、拮抗血小板活化因子、抗炎、抗病及提高免疫力等多种功能,且副作用较小,作为天然的绿色饲料添加剂加剂,具有极高的营养、保健、医疗价值9。根据陈伟等人10的研究发现银杏叶可有效的减少外源性脂质的吸收，促进其排泄；通过调节脂质代谢影响血脂的分布，促进其排泄；具有升高高密度脂蛋白的含量的作用，抑制内源性胆固醇合成，并反馈性的使低密度脂蛋白受体数目增加，抑制鸡脂肪肝形成。在本试验中，C组也未发现有脂肪变性的表现，进一步证实了他们的观点。 黄沛力等人还发现银杏叶提取物对慢性肝损坏有良好的保护作用11。草鸡饲喂蝇蛆粉后，被肠道吸收后，在经过肝脏代谢作用后，被机体吸收。如果蝇蛆饲喂过剩就会对肝脏造成损坏，而银杏叶具有对肝脏有调节作用。在本次试验中，我们饲喂过量的蝇蛆粉后，发现肝脏受到不同程度的损坏，而在添加蝇蛆粉的饲料中再添加银杏叶提取物的试验组却没有发现明显的病理变化，因此我们判断银杏叶对慢性肝损坏有良好的保护作用，并降低了肝脏损坏的程度。在试验中，并未出现当初假设的脂肪肝的出现病理现象，可能的以下原因的影响：1) 饲喂蝇蛆粉导致的水泡变性比引起鸡肝脏的脂肪变性要严重，导致试验结果不明显。2) 鸡脂肪肝普遍发生于笼养蛋鸡，尤其是处于产蛋期高峰的蛋鸡。而试验采用的试验鸡为雏鸡，可能导致实验结果不明显。3) 饲喂的环境过于密闭，可能影响了试验结果结 论本试验表明，银杏叶加蝇蛆作为饲料添加剂，可以有效的减缓鸡肝脏水泡变性的程度，证明了银杏叶提取物对护肝的功能。有望对其进一步研究将银杏叶作为饲料添加剂，对动物饲料产业的发展具有重要的意义。 参考文献1 高锦明,王蓝,张鞍灵,等.银杏叶中有效成分的研究J. 西北林学院学报, 1995, 10( 4) : 94- 100 2 徐丽兰,单安山,陈鹏.无菌蝇蛆在饲料领域中的应用及研究进展J.中国畜牧兽医,201O年第37卷第11期3 陈亮.产蛋鸡脂肪肝综合症的诊治J.河北畜牧兽医,2005年第21卷 第5期4 尹玲,张新明.银杏叶提取物的生物学功能以及在禽类生产中的研究应用进展J.养殖与饲料,2010年第2期5 沈海中, 张力平,赵文明,等.银杏叶提取物对小鼠淋巴细胞和中性粒细胞活性的影响J. 首都医学院学报,194 ,15(4):254-2566 孟宪平,王军喹乙醇在北方冬季对肥育猪生长性能的影响J饲料工业,2000,21(3):39.7 李同洲喹乙醇在不同蛋白水平下对仔猪生产性能的影响J饲料研究, 2000,(4): 11 12. 8 李友红.蛋鸡脂肪肝综合症的病因及防治J.中国畜禽种业,2009年3月9 田季雨,刘澎涛,李斌.银杏叶提取物化学成分及药理活性研究进展 M. 国外医学中医中药分册, 2004 , ( 3): 142- 145 .10 陈伟,张瑞霞,曹阳春.饲料级银杏叶提取物的主要功能及应用前景J. 浙江畜牧兽医, 2009年第 3期11 黄沛力,曾昭晖.银杏叶和山楂叶的抗氧化作用J.中国药学杂志, 1996 , 31( 5): 274- 276 .12 尹荣焕,白文林,吴长德等,喹乙醇对小鼠肝脏和肾脏的毒性作用研究J. 畜牧兽医学报,2008.39（7）：974-97913 LEONORE M. DECARLI and CHARLES S. LIEBER. Fatty Liver in
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