土壤中分解尿素的细菌的分离和计数_课件.ppt

1、课题2土壤中降解尿素的细菌的分离和数量，课题2微生物的培养和应用，1，课题背景，1，尿素的利用，尿素是重要的农业氮肥。乙醚不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌只有把尿素分解成氨后才能被植物利用。2，细菌利用乙醚的原因，土壤中的细菌分解乙醚的原因，因为脲酶，3，常见的降解尿素的微生物，孢子菌，牛球菌，假单胞菌，杆菌，放线菌，放线菌也可以分解乙醚。4，主题的目的，从土壤中分离出可降解乙醚的细菌，并对每个土壤样品中含有多少细菌进行统计。1.研究事故，菌株筛选，统计群落数，控制设定，1，案例：启示：在寻找目的菌种时，根据对生存环境的要求，原因：热泉温度70800C淘汰了大部分微生物，因此只筛选了Taq细

2、菌。DNA聚合酶链式反应是体外大量复制少量DNA的技术，需要耐高温(930C)的DNA聚合酶。要筛选菌株以分离微生物，必须根据营养、生理、生长条件等微生物的特征进行分离。构成适当的培养基方法：抑制大部分微生物生长，创造有利于牙齿细菌生长的环境，在一定时间内培养后，牙齿菌数增加，然后通过稀释图版法等分离纯化培养。2，实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。3，土壤中分解乙醚的细菌的分离和计算所需的培养基：啊，物理性质看，牙齿培养基属于什么种类？功能上属于哪种培养基？固体培养基、牙齿培养基中哪个用作碳源、氮源？碳源：葡萄糖

3、，元素氮源：元素，培养基选择，培养基中的氮源是尿素，只有脲酶合成微生物才能分解尿素，尿素可以用作氮源。由于缺乏脲酶的微生物不能分解尿素，氮源不足，无法生长和繁殖，因此使用牙齿培养基可以选择分解尿素的微生物。4，培养基选择分解尿素的微生物的原理，培养基选择：允许微生物学中某些种类的微生物生长，抑制或阻止其他种类的微生物生长的培养基。1，显微镜直接数：利用血细胞计数板用显微镜计算一定容积内样品的微生物数。统计菌落数：无法区分死细菌和活细菌。不适合运动细菌的数量。需要相对高的细菌浓度。个人的小细菌很难用显微镜观察。缺点，2 .间接计数法(生菌计数法)(1)一般方法：每克样品(CV)M其中，C是在特定

4、稀释度下板中生长的平均菌群数，V是在涂板时所用稀释液的体积(ml)，M，样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的菌落在样品稀释液中的一种活菌中，(2)原理：稀释涂层板法。为了确保准确的结果，通常在30300的平板电脑上计算菌类的数量。为了使结果接近实际值，可以将相同的稀释度添加到3个以上的平板上进行涂层，计算出均线的平均值。统计殖民地往往低于活细菌的实际数量。涂层板法选择的稀释度很重要，一般三种茄子稀释度中出现在第二种稀释度的平均菌群数为50左右。设定对比的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可靠性。控制设置：控制设置方法：空白控制：没有控制组的处理因素。条件对比：给

5、对照组一些实验因素，但不是需要研究的处理因素。，自我控制：对照组和实验组都在同一研究对象上进行。相互控制：不仅是对照组，还有几名实验组徐璐对照。同学A的结果与其他同学不同，可以解释两种茄子。一是由于不同的土壤样本；第二，是介质污染或操作失误造成的。摘要：通过牙齿实例表明，实验结果必须具有说服力，对比设置必须。方案1:用其他同学A同学等土壤样品进行实验，方案2: A同学配方的培养基不放土壤样品，进行培养，用空对照进行培养，确认培养基是否被污染。(阿尔伯特爱因斯坦，美国电视电视剧，统计)，结果预测：如果结果与同学A匹配，证明A是正确的。结果不同，证明A同学操作失误或培养基配方存在问题。2 .实验的

6、具体操作土壤取样从肥沃湿润的土壤中取样。先去除表土3厘米左右，然后取样，放在事先准备好的信封里。采土的小铲子和装土的信封在使用前要灭菌。准备培养基：准备以尿素为唯一氮源的选择性培养基。在火焰旁应该叫土壤10g。在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行，每一个微生物都要使用不同的稀释度。也就是说，根据微生物，土壤的含量不同的目的菌群的数量在30300之间，要保证适于计数的板，三个茄子样品的稀释，为什么要分离不同的微生物，使用不同的稀释度呢？(威廉莎士比亚、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物、微生物)测定土壤中细菌总量和测定土壤中可分解乙醚的细菌数量，所选择的稀释范围是否

7、相同呢？原因：土壤中各种微生物的数量(单位：周/公斤)不同。例如，在干燥土壤的上层样本中，好氧及兼性厌氧细菌数约为2185万人，放线菌数约为477万人，真菌数约为23.1万人。结论：为了获得多种微生物，必须徐璐根据不同的稀释度进行分离，选择培养的条件也要根据用途提供。样品涂层，实验时要在培养皿上做标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。如果得到2个以上的群落数在30300的板块，稀释工作就比较成功，如果同一稀释倍数的3个茄子重复群落数大不相同，实验就不正确，需要重新实验。、在计算微生物的培养和观察、菌落数时，每24h计算菌落数。选择殖民地数量稳定时的记录作为结果，防止培养时间不足而丢

8、失的群落数量。培养其他微生物往往需要不同的培养温度。细菌：3037培养12d放线菌：2528培养57d真菌：在2528的温度下培养34d。微生物的培养和观察，3 .结果分析和评估1。通过对比实验，培养物有杂菌污染的话，菌群数高。培养物混入不同的氮源，菌落形态多样，菌落数量高，难以选择分解尿素的微生物。2.提示：选择每板生长30300个菌的稀释梨，计算每个样品的细菌数最合适。相同稀释倍数的三个茄子重复殖民地数不能有很大差异。差异大意味着实验不准确。4，操作提示，无菌操作，标记，计划时间，5。课外扩展将酚红指示剂放在以尿素为唯一氮源的培养基中。培养某种细菌后PH值升高，指示剂会变红，表示细菌可以分解尿素。测定饮用水中大肠杆