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文档简介
1、胡萝卜中色素的分离和鉴定是一个实验目的1 .学习从胡萝卜中提取分离胡萝卜素的原理和方法2 .使用柱和纸色谱的实验操作是因为胡萝卜中含有丰富的天然色素,在黄色到红色的范围内可以为相关食品饮料提供红色素。 胡萝卜素为橘黄色结晶,化学性质较稳定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。 胡萝卜素有-胡萝卜素、-胡萝卜素、-胡萝卜素、-胡萝卜素、番茄红素、孕酮等多种异构体。 其中胡萝卜素在胡萝卜素中分布最广泛,含量最多。 胡萝卜素在胡萝卜根中与胡萝卜素一起存在,含量一般较少。 胡萝卜素在生物体内的分布有限。 二实验原理,-类胡萝卜素(C40H56 ),1 .溶剂萃取法是根据物质的相似相容原理,使
2、色素物质溶解进入溶液,这是固一液萃取过程,溶剂渗透到原料粒子内部含色素的细胞组织内,色素溶解,扩散到萃取液本体。 胡萝卜素之类的脂溶性色素多用氯仿、石油醚等非极性溶剂萃取。 2 .在柱层析装置中,柱内装有氧化铝和硅胶等“活性”固体(固定相),液体样品从柱的顶部进入,在流过吸附柱时被柱的上端吸附,然后,从柱的顶部加入洗脱溶剂进行清洗。 再用溶剂洗脱,吸附能力最弱的部分与溶剂一起最初流出,分别收集成分。 3 .微波提取法微波提取利用高频电磁波透过被提取物质,使细胞内部温度迅速上升,细胞内部液体水分气化产生的压力使细胞膜和细胞壁急剧破裂,形成微小的孔,使可溶性物质迅速溶出、分散在适当的溶剂中,提高被
3、提取色素的提取率。 提取方法,4 .超声波提取法超声波提取法的原理是,超声波在液体中产生空洞作用,而空洞作用引起的冲击波和射流破坏植物细胞和细胞膜结构,增加细胞内容物穿过细胞膜的能力,有助于天然色素的释放和溶出。 超声波使提取液不断振动,有助于溶质的扩散,同时超声波的热效应使水温升高,而对原料有水浴作用。 5 .超临界流体萃取法超临界流体萃取是一种新的萃取分离技术。 该技术是利用流体(溶剂)在临界点附近的某个区域(超临界区域)与分离的混合物中的溶质具有异常的平衡行为和传递性能,对溶质的溶解能力随着压力和温度变化在相当宽的范围内变动的特性,实现溶质分离的技术。 6 .酶解水提取法利用纤维素酶和果
4、胶酶破坏植物细胞壁提取类胡萝卜素,同时还可以用超声波辅助提取。 超声波有助于破碎细胞壁,加快萃取速度,节约成本。 提取方法,胡萝卜素的理化性质:(1)橙色结晶化学性质比较稳定,(2)不溶于水,微溶于醇,容易溶于石油醚等有机溶剂,3 )实验室提取方法:提取法,石油醚,醋酸乙酯,二乙醚,苯,四氯化碳, 一些水不溶性有机溶剂的沸点:石油醚沸点最高,加热萃取不易挥发,对胡萝卜素溶解性高,最适合溶剂。 主要因素:萃取剂的性质和用量、原料:颗粒大小、密合度、含水量、环境:温度、时间等,原料颗粒小、水分少、萃取温度高、时间长、效果好,影响萃取的因素,胡萝卜素萃取过程除去萃取液中的不溶物,1、萃取装置2、影响因素,鉴定:纸原料填充:将胡萝卜粉和石油醚20mL放入蒸馏瓶中。 加热萃取:安装回流冷凝装置,用沸水浴加热萃取30分钟。 过滤:过滤提取物,除去固体物质,得到提取液。 浓缩:安装蒸馏装置,加热萃取液,使萃取剂挥发,得到胡萝卜素。 注意事项:胡萝卜干燥时,温度过高,时间过长,胡萝卜素分解。 产品检查,1 .通过纸层析鉴定点样层析后,如发现滤纸上出现多个不同高度的色素点样。 提取的类胡萝卜素含有杂质。 2 .分光光度法在200-800nm的波
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