HPLC维护讲课版.ppt

1、HPLC 使用基本维护,目的,通过本次学习，应达到以下目的 学会HPLC正确的维护方式与方法； 按照规定的维护方式与方法进行维护； 学会色谱柱的正确维护、保存方式； 关注色谱工作站的使用。,维护流路系统,1、溶剂瓶 2、过滤头 3、输液管 4、purge阀过滤芯 5、泵清洗 6、进样针底座 7、氘灯 8、废液管 9、清洁,溶剂瓶,1、溶剂瓶在盛装溶液前必需确干净，装有机溶剂的需要保证无水，装正相流动相的需要进行干燥处理。 不干净的瓶容易滋生微生物，溶液很快变混，产生颗粒或絮状物。每次换流动相应先清洗溶剂瓶。 2、试剂瓶应用封口膜密封，避免灰尘细菌进入、溶液挥发，溶剂挥发。 3、瓶盖应定期清洗。

2、,过滤头,将充满溶剂的管路提起，溶剂应很快滴落，如滴下很慢或很少，说明管路堵塞。 玻璃滤头采用35%硝酸浸泡2小时或者在通风橱中煮沸30分钟，然后纯水冲洗干净。不得超声清洗。 不锈钢滤头可超声清洗，不得酸洗。,输液管,细菌，不溶性颗粒及其他污染物会粘附在管壁上，导致输液不畅通。 乙腈会聚合尤其是见光条件下。 每个月应 用6080 的热水冲洗2小时后再用异丙醇低流速冲洗过夜。 含有盐的流路必须放在A/D路，B/C放置有机溶剂； 流路应经常更换，例如盐、水互换，乙腈与其它互换。 每36个月将管路拆下来，管路中充满纯化水，置热水中超声清洗。,purge阀过滤芯、泵清洗,当打开purge阀，流量设置为

3、5ml/min时，压力超过10bar，说明过滤白头需要更换； 更换后拧上如漏液，应先检查是否上正位置，否则拧下后洗瓶冲洗表面后重新拧紧。 输液泵在往复运动中可能有盐析出，泵在线清洗一直开启可以冲走析出的细微颗粒，保证宝石杆不会划伤。 一般采用10%的异丙醇溶液。每15天必须更换一次。,进样针底座,如发现进样针底座上有盐析出：说明有渗漏；（在实际工作中每台仪器多少都会有盐析出的）为减少交叉污染，出现鬼峰、怪峰，应定期检查、清洗进样针底座 进样针弯、有毛刺、或钝应更换。 清洗和更换应按照正确的流程操作，过程中确保自动进样器不断电。,废液管,废液管不应被挤压，从流通池出来的管路不得随意加长或去除，保

4、证压力正常，否则可能导致峰形异常或流通池破裂。 废液管连接到废液钢管接口，应定期检查是否密封或正确连接。,工作站软件,1、不得随意更改系统IP地址； 2、不得删除软件内的任何文件； 3、不得删除产生的数据文件。 4、不得随意修改系统时间 。,色谱柱（1）,对于C18柱/ C8柱 1、使用完毕的色谱柱应两端使用盖帽密封； 2、短时间不使用，可以保存在纯的甲醇（乙腈）中，最好保存在乙腈中； 3、使用完毕，长时间不使用应保存在纯的乙腈中，但是每3个月需要使用2030倍柱体积的乙腈进行置换； 4、不得保存在纯水中或缓冲盐中； 5、不得使用纯水冲洗色谱柱，初始比例可以是水和乙腈（甲醇）比例9：1。,色谱柱（2）,其它常见色谱柱包括： 手性色谱柱 苯基柱 氨基柱 阴（阳）离子交换柱 使用前应仔细阅读说明书，根据要求使用和维护保养。,氘灯流通池维护,流通池进行