浅谈肿瘤标志物PPT参考课件

1、浅谈肿瘤标志物,黄慧瑾 2016年5月19日,1,肿瘤标志物（tumor markers，TM),肿瘤标志物是指在肿瘤发生和增殖的过程中，由肿瘤细胞合成、释放或者是机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质，这些物质在血液、体液及组织中可检测到，达到一定的水平时能提示某些肿瘤的存在。,肿瘤标志物高与查到癌细胞是两回事，也不一定是代表患有肿瘤！,2,血清肿瘤标志物分类,3,一、为什么要查肿瘤标记物？ 我们知道，早期诊断是治愈肿瘤的关键；而有些肿瘤标记物的升高往往早于临床症状的出现，因此肿瘤标记物有助于早期发现肿瘤迹象，早诊断、早治疗，从而提高疗效。 比如，我们国家70年代以后在上海等地，通过对大量人群的

2、甲胎蛋白普查，曾检出不少肝癌特别是小肝癌患者，使很多病人得到了及时手术切除的机会。 二、肿瘤标记物还能用于以下方面 出现肿瘤症状或可疑肿物后的鉴别诊断 肿瘤生物特点和疾病阶段的判断 肿瘤治疗后的疗效观察和判断预后 提示肿瘤的复发、转移,4,肿瘤指标升高是不是肯定就有肿瘤了？,答案是不一定。 肿瘤标志物不仅存在于恶性肿瘤中，也存在于良性肿瘤、胚胎组织、甚至正常组织中； 肿瘤的诊断不能单独依靠肿瘤标志物的检查，需要由临床检查、影像检查、内镜检查或手术探查等综合判断，而病理诊断是肿瘤诊断的“金标准”,5,肿瘤标记物筛查结果判读,肿瘤标记物检查阴性： 患相关恶性肿瘤的概率相对较低； 如有家族史、癌前病

3、变或有症状，仍需定期复查,结合其他检查； 肿瘤标记物检查阳性： 检测可能有假阳性或患良性疾病； 优先考虑复检,复检仍阳性者进一步检查； 指标轻度升高，不要轻下结论，持续观察肿瘤标志物的动态变化，如进行性升高，患恶性肿瘤的概率比较高； 中重度升高或多项指标持续升高，提示肿瘤发生的可能性很高，必须尽快做医学影像学和细胞病理学等检查； 不同医院检验科仪器、试剂各不相同，参考值不一定一样，因此，不能随意比较不同医院测量值的高低。,6,除了恶性肿瘤，引起肿瘤标记物升高的其他因素包括：,良性疾病，如炎症性疾病：肝脏良性疾病时，AFP、CA19-9、CEA会升高；肾功能衰竭时2-微球蛋白及CA15-3、CA

4、19-9、CEA和PSA会升高；风湿病时CA19-9浓度可增高； 生理变化：妊娠时AFP、CA125、HCG会升高； 不良习惯：吸烟、酗酒； 检查引起：屡次进行直肠指检后，PSA值可升高； 服用某些药物； 饲养宠物； 此外，抽血过程中的污染、抽血引起的红细胞破裂、标本保存不当、试剂差异及检测欠规范等因素也会干扰检查结果。,7,肿瘤标志物升高了，可不可以明确是哪个部位的肿瘤？,有时可以，但多数不能单凭借肿瘤标记物来明确，还需要结合其他检查。 一种肿瘤标记物往往与多种恶性肿瘤有关，以下是一些常见的肿瘤标记物及其所提示可能有肿瘤发生的脏器： CA19-9 胰腺、胃肠道和肝胆 CA15-3 乳腺、肺、

5、卵巢、肝 CA242 结直肠、胰腺、卵巢 CA72-4 胃、卵巢、胰腺、乳腺 CA125 卵巢、子宫、胰腺、肝、肺 CA50 胰腺、乳腺、肺、胃肠道和肝胆,8,常见肿瘤的标志物检测,9,ADVIA Centaur XP全自动化学发光分析系统检测原理,10,经典直接化学发光方法,吖啶酯(AE)为放光剂 采用微磁颗粒分离 两种结合模式： 竞争法 夹心法,11,免疫测定,抗体 抗原 示踪/发光剂：吖啶酯 分离方法：微磁颗粒分离 检测装置,12,抗原抗体特意专一结合是检测的基础,13,发光剂是检测的技术核心,14,吖啶酯简介,提升扩散速率 最大程度避免结合位点的遮蔽 提高分析灵敏度,碱性磷酸酶,哎啶酯

6、,15,一秒钟高强度的光释放使报告结果更快,吖啶酯简介,16,哎啶酯直接化学发光法的优点,无需额外的信号放大或底物 光的释放快速 对温度和pH值的影响不敏感 背景干扰最小,17,微磁颗粒分离技术,氧化铁颗粒被吸引至磁场区 与抗原或抗体发生共价结合,微磁颗粒(PMP),抗体,18,用于分离结合与未结合的反应物,磁场,未结合的AE,微磁颗粒分离技术,19,检测原理的反应模式,夹心法 竞争法 标记抗原检测方法 标记抗体检测方法 抗体捕获模式,20,夹心法 步骤 1,AE-标记抗体加入样品中，与样品抗原结合,哎啶酯 (AE),抗体,样品中的分析 物特异性抗原,其它颗粒,21,PMP-抗体-抗原-抗体A

7、E复合物,加入与特异性抗体结合的微磁颗粒PMP，孵育，结合抗原的PMP再与AE-标记抗体结合,夹心法 步骤 2,22,将未结合的AE分离并去除,夹心法 步骤 3,23,加入酸碱试剂启动化学发光反应计算浓度,夹心法 步骤 4,24,采用标记抗原的竞争法 步骤 1,AE-标记抗原与样品抗原竞争结合与PMP共价结合的有限的抗体结合位点,25,孵育后将反应混合物置于磁场下，分离并除去未结合的AE,采用标记抗原的竞争法 步骤 2,26,加入酸碱启动化学发光反应计算浓度,采用标记抗原的竞争法 步骤 3,27,采用标记抗体的竞争法 步骤 1,结合抗原的PMP与样品抗原竞争AE-标记抗体上有限的抗原结合位点,28,孵育后将反应混合物置于磁场下，分离并除去未结合的AE,采用标记抗体的竞争法 步骤 2,29,加入酸碱试剂启动化学发光反应计算浓度,采用标记抗体的竞争法 步骤 3,30,夹心法与竞争法反应原理小结,竞争法,夹心法,样品浓度,样品浓度,光释放 (RLUs),光释放 (RLUs),31,抗体捕获模式,分析物是样品中含有的抗体 采用一种直接针对样品中抗体的特异性抗体,32,抗体捕获模式,结合有抗人类IgM特异性抗体的微磁颗粒（PMP）被加入到样品中 人类IgM抗体与PMP上结合的抗人类IgM抗体进行结合,33,样品中的抗体通过磁场作用与可能造成干扰的其它物质进行分离,抗体捕获模式