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文档简介
1、,高效液相色谱仪操作条件选择,组员:魏鹏翔、崔建哲、张龙、韩守印、李淼、孙磊。,指导教师:姜洪文,1,目录,实验目的 实验原理 仪器与试剂 实验步骤 仪器清洗(结束工作),2,一、实验目的,掌握色谱分析的原理 掌握高效液相色谱仪的基本结构和工作原理 掌握SY-8100高效液相色谱仪的基本操作步骤 掌握HPLC条件试验的方法以及分离条件的确定,3,二、实验原理,本次实验采用ODS-C18色谱柱,以甲醇+水混合液为流动相,根据混合物中萘、联苯和菲在固定相与流动相间分配性质的不同,进行分离。不同比例的甲醇+水混合液为流动相,流动相的极性发生改变,因此混合液的分离条件也发生了改变,选择能将混合液中各组
2、分能充分分离并且相对分析时间短的条件,综合确定HPLC法分析萘、联苯、菲的分析条件,完成对混合液的分析。 检测器采用紫外分光(UV)检测器,检测波长为254nm。,4,三、仪器与试剂,仪器: SY-8100高效液相色谱仪1台 KQ-50B超声波清洗器1台 AP-01P真空泵1台 过滤装置1套 微量注射器50L1支 容量瓶50mL7只 药品: 萘(G.R.)、联苯(G.R.)、菲(G.R.)、甲醇(G.R.)、二次蒸馏水,5,四、实验步骤,流动相的准备 1、流动相的过滤 安装抽滤装置,选用有机相过滤膜,过滤试剂甲醇;选用无机相过滤膜,过滤二次蒸馏水。,6,2、流动相的脱气 将盛有过滤好甲醇、二次
3、蒸馏水的试剂瓶分别放于超声波清洗器中,进行脱气处理。,7,仪器的准备 1、更换流动相 将A泵的输液管放入处理好的甲醇试剂瓶中;B泵的输液管放入处理好的二次蒸馏水试剂瓶中。 2、分别排除A、B两个泵输液管中的气泡,8,3、开启高压泵A、高压泵B、UV检测器、混合器的电源,打开工作站,9,分析步骤 1、分别设置两个高压泵的流量,使总流量为F1.00mL/min,分别启动两泵,10,2、待基线稳定后,完成标样的分析,记录分析所获得的各组分的保留时间、理论塔板数、分离度。数据填表 3、选择最佳流动相配比,调整A、B两泵的流量。待基线稳定后吸取标样,完成分析后建立组分表,再完成试样的分析,测得试样中萘、联苯和菲的含量,完成实验,11,12,五、仪器的清理(结束工作),更换流动相 将流动相重新更换为处理过的甲醇,以利于色谱柱的保护。 清洗“进样阀” 用适量的甲醇清洗进样器、进样阀,以避免样品组分的残留。,13,THE ENDTHANKS,PPT模板下载: 行业PPT模板: 节日PPT模板: PPT素材下载: PPT背景图片: PPT图表下载: 优秀PPT下载: PPT
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