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1、医学检验各论 抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) 内容课件模板,医学检验各论:抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) ,别名:,抗AchR抗体。,医学检验各论:抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) ,简介:,抗乙酰胆碱受体抗体主要为IgC型(以IgCl、IGC.2亚类为主,IgC.亚类次之),可检测到IgM型。不同类型的MG病人血清抗AchR抗体具有不同性质。抗AchR抗体的检测方法最先使用的是放射免疫,以后,为避免使用核素,各种酶联免疫法应运而生。这些检测方法中都要应用。银环,医学检验各论:抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) ,简介:,蛇毒素(a-bungarotoxin,a-BT):a-
2、BT是从银环蛇毒液中提取的一种肽类,分子量为8kD左右。它能高度选择性与AchR结合,这种结合几乎是不可逆的。如用ELISA法,可用ct-BT预先包被固相载体,然后利用其特异性吸附加入的AchR,再测定待测血清中的抗AchR抗,医学检验各论:抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) ,简介:,体。ELISA法简便易行,便于推广,故将其介绍如下。 1.试剂 a-BT:可购得商品;AchR:取人骨骼肌200250g,用生理盐水洗净,加入湿重2倍量的缓冲液,高速匀浆90s后20 000Xg离心30rain。除去上清(血液、脂质),加入湿重2倍量的缓冲液,再次匀浆。,医学检验各论:抗乙酰胆碱受体抗体(Ac
3、hR-Ab) ,简介:,向其中加入TritonX-100至最终浓度为2%,4搅拌过夜。100 000Xg离心1h,上清即为AchR。也可购买商品;HRP标记的抗人IgC。 2.操作步骤 (1)用包被液将ct-BT稀释为最适浓度(用方阵滴定法选出),包被聚苯乙烯反应板,每孔200pL(含ct-,医学检验各论:抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) ,简介:,BT约为2.5pmol/L)。4过夜后用洗涤液洗3次,每次3min(以下同)。 (2)将AchR用稀释液适当稀释,加至包被孔中,每孔200btL(0.2pm01),37C1h。同上洗涤。 (3)力1X适当稀释的待测血清,每孔200gL,3730
4、min。同上洗涤。,医学检验各论:抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) ,简介:,(4)加入最适工作浓度的HRP标记抗人IgC,3730rain。同上洗涤。 (5)加入底物溶液(OPD-H202)每孔200L,37 30min,mol/LH2S04终止反应。 3.结果观察 于酶标仪上测492nm吸光度。以阳性混合血清作为标准血清,制备标准曲线。,医学检验各论:抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) ,简介:,待测血清中抗AchR抗体含量,可根据吸光度从标准曲线上换算。,医学检验各论:抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) ,临床意义:,阳性(0.169):重症肌无力。 另外,检出率在合并胸腺瘤的眼肌型、全身型或无胸腺瘤的全身型重症肌无力病人最高,阳性率达70%以上。,医学检验各论:抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) ,正常值:,ELISA法:0.090.148或阴性。 (注:具体参考值请根据各实验室而定。)。,医学检验各论:抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) ,相关检查:,烟碱型乙酰胆碱受体抗体、血清钾(K+,K)。,医学检验各论:抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) ,相关症状:,毒蕈碱样症状、肌性肌无力、眼睑下垂。,医学检验各论:抗乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab) ,相关疾病:,胆汁性肝硬化、重症肌无力危象
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