选修一 微生物的培养与应用.ppt

1、酵母菌,醋酸菌,毛霉,乳酸菌,兼性厌氧,需氧,需氧,厌氧,1825,3035,1518,室温,以上微生物属于真核生物的是？ 毛霉、酵母菌,几种传统发酵的比较,以上微生物细胞中含有核糖体的是？ 毛霉、酵母菌、醋酸菌、乳酸菌,异养 异养 异养 异养,几种传统发酵易考知识点,1、传统果酒制作的酵母菌来源于？ 葡萄皮上的野生型酵母菌,2、发酸的酒表面形成的菌膜是由哪种菌形成？ 醋酸菌,3、在缺乏糖源时，醋酸菌能利用何种物质？ 乙醇， 能将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸,4、如何检测是否产生酒精？ 酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈灰绿色,几种传统发酵易考知识点,5、参与腐乳制作的只有毛霉？ 多种微生物，

2、主要是毛霉,6、加盐腌制腐乳的目的是？ 析出豆腐中水分，使其成形 抑制微生物的生长，避免豆腐腐败,7、腌制腐乳的卤汤中酒精浓度为多少？原因？ 12%左右 酒精浓度过高，腐乳成熟时间延长 酒精浓度过低，腐乳容易腐败变质,几种传统发酵易考知识点,8、制作泡菜时，对盐水的要求是？ 清水与盐的质量比是4：1 煮沸冷却,9、测定亚硝酸盐含量的方法 比色法在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合，形成玫瑰红色染料。,（2011年江苏卷）下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是 A腐乳制作所需要的适宜温度最高 B果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵 C使用的菌

3、种分别是酵母菌、醋酸菌、乳 酸菌 D使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、 DNA和RNA,D,低,毛霉,醋酸菌最高,微生物的实验室培养,培养基：,人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养基质。,1、碳源：,CO2、糖类、牛肉膏,2、氮源：,NH3、硝酸盐、 牛肉膏、蛋白胨、尿素,4、特别条件：,3、水、无机盐,凡是碳源都能提供能量？ 不是，如CO2,无机氮源也能提供能量？ 可以，如NH3,同一种物质不可能既为碳源又为氮源？ 可能，如牛肉膏，可提供氮源和碳源,培养基的分类,1、物理性质： 固体培养基 液体培养基,（加入凝固剂琼脂）,若想形成菌落，则应该使用？,2、功能用途： 通用

4、培养基 选择培养基 鉴别培养基,碳源,氮源,（唯一）,唯一碳源,1.下列说法正确的是( ) A.铵盐、硝酸盐可以作为自养微生物的氮源 B.凡是碳源都能提供能量 C.除水以外的无机物仅提供无机盐 D.无机氮源不能提供能量,CO2,CO2,NH3,A,无菌技术：,防止一切外来杂菌的进入，并保持已灭菌物品及无菌区域不再被污染。,1、对实验操作的空间，操作者的衣着和 手进行清洁和消毒；,2、将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；,3、为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行； 4、实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。,制备牛肉膏蛋白胨培养基,计算

5、 称量 溶化 灭菌 倒平板,1、操作为何在酒精灯火焰附近进行？ 为避免周围环境中微生物的污染,2、为何待平板冷却后倒过来放置？ 防止皿盖上的水珠落在培养基上，造成污染,2.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中，错误的是( )双选 A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 B.牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸 C.待培养基冷却至室温时，进行倒平板 D.待平板冷却凝固约5 min10 min后，将平板倒过来放置,AC,50左右,灭菌、倒平板,纯化大肠杆菌,平板划线法,纯化大肠杆菌,稀释涂布平板法,系列稀释,涂布平板,还可用来进行活菌计数,有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成

6、的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题： （1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。 （2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。,2011全国高考卷,原油,选择,平板划线法,稀释涂布平板法,（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力 。 （4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。,强,干热灭菌,高压蒸汽灭菌,火焰,2.用平

7、板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( ) 可以用相同的培养基 都需要使用接种针进行接种 都需要在火焰旁进行接种 都可以用来计数活菌 A. B. C. D.,C,碳源,氮源,（唯一）,选择培养基,无机盐,凝固剂,系列稀释,涂布平板,稀释涂布平板法,鉴别培养基,pH升高 指示剂（酚红）将变红,纤维素酶一种复合酶,唯一碳源,酵母浸膏（酵母膏）是采用新鲜酵母为原料，经酵母酶解自溶、分离过滤、浓缩而得到的。酵母浸膏富含蛋白质、氨基酸类、肽类、核苷酸、B族维生素、微量元素。主要作用是补充氮源和提供微生物生长的各种维生素及氨基酸及生长因子。,即水解酪蛋白，由酪蛋白水解得到。 分为酶水解酪素和酸水解酪素,

8、选择培养,液体培养基,鉴别培养基,+ 刚果红,刚果红染色法,3.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( ) A.以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂 B.以尿素为惟一氮源的培养基中加入二苯胺试剂 C.以尿素为惟一氮源的培养基中加入苏丹试剂 D.以尿素为惟一氮源的培养基中加入双缩脲试剂 【解析】选A。,5.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题： (1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和_。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_ _和_。 (2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。,氮

9、源,碳源,无机盐 水,高压蒸汽灭菌,(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于_中培养，培养的温度设定在37。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。 (4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。一般来说，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。 (5)如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_细菌，这种培养基被称为_。,选择培养基,盐,恒温箱,无菌水,多,大,【例证2】下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验，完成下列问题： 实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将

10、用表层土壤制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离。 材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛有9mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛有90mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。,(1)方法步骤： 倒平板：分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，应在_ _操作。 制备土壤稀释液：取土样10g加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1mL，转至盛有9mL的无菌水的试管中，依次稀释到107稀释度。,酒精灯火焰旁,涂布：按照由107103稀释度的顺序分别吸取0

11、.1mL进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布_个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布_个。 培养：放入恒温箱内，在28 30 下培养3d4d。 细菌的计数：当菌落数目稳定时，选取菌落数在_的平板进行计数。如果测试的平均值为50，则每克样品中的菌落数是_。(稀释度是105),3,1,30-300,3.(2011惠州)从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。 (1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从_环境中采集。 (2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培