ISO 160003 译文整理好(1)

1、外文标准译文标 准 号： ISO 16000-3： 2011标准英文 名称：Indoor air Part 3: Deteimination of fomialdehydeand other carbonyl compounds in indoor air and test chamber air Active sampling method标准中文名称： 室内空气一第3部分：测定室内空气和试验箱空气中甲醛和其它拨基化合物一活性取样法翻译：校对：批准： 口期:室内空气一第3部分:测定室内空气和试验箱空气中甲醛和其它拨基化合物一活性取样法1范ISO 16000第三部分规定了空气中甲醛（HCHO）

2、和其他拨基化合物（醛类 和酮类）的测定方法。该方法只针对甲醛，但是，经过修改，至少可以检测到并 量化其他12种芳香剂和饱和及不饱和脂肪族拨基化合物。可以在大约为1 pg/m3 到lmg/n?浓度范围内测定甲苯和其他拨基化合物。选样方法能够提供时间加权 的平均浓度（TWA）的样木，可以用于空气中甲苯的长期（1小时到24小时） 或短期（5分钟到60分钟）选样。ISO 16000第三部分规定了甲苯和其他拨基化合物的选样和分析程序，即从 空气中将甲苯和其他拨基化合物收集到2,4二硝基苯脐（DNPH）涂层的吸附盒 内，然后通过紫外线吸收检测法对高效液相色谱法形成的踪进行分析。本方法不 适合于较长链或者不

3、饱和的拨基化合物。ISO 16000第三部分适用于以下化学物质的测定：乙醛2,5 二甲基苯甲醛m 甲苯甲醛丙酮甲醛0 甲苯甲醛苯甲醛异戊醛P 甲苯甲醛丁醛丙醛戊醛己醛3原则ISO 16000第三部分规定的方法需要从带有2,4二硝基苯月井（DNPH）试剂涂 层的含硅胶暗箱内提取空气。该方法的原则基础是根据图1显示的反应，有酸的 情况下，拨慕与二硝慕苯腓发生具体反应而形成稳定衍生物。根据紫外线检测或 者二极管矩阵检测方法，利用高效液相色谱法（HPLC）,使用二硝基苯脐的衍生 物来分析母醛类和母酮类。该检测方法已经扩展到了其他9.3.5条中可测定的其 他拨基化合物。ISO 16000第三部分规定了用

4、户该如何在每个喑箱中使用酸化的二硝基苯 月井，从商购的色谱级硅胶暗盒中进行抽样暗盒的制备。或者，由于预先涂装的二 硝基苯月井硅胶暗盒产品通常更加一致，而且空白程度较低，因此我们更推荐这种 暗盒。但是，如果使用了商购暗盒，应证明该暗盒符合ISO 16000第三部分的性 能标准。商购暗盒的另一优势是它们可以容纳暗盒低压降产生的更大的硅胶颗 粒。这种低压降喑盒更适合使用电池供电的个人取样泵进行的空气取样。拨基化合物（乙醛或酮）2,4二硝基苯月井（DNPH） DNPH衍生物说明：R,R 烷基，芳族基图1 形成2,4二硝基苯腺的拨基化合物的反应4局限与干扰4.1概述对于高达1,51/min的取样流速，I

5、SO 16000第三部分己经对取样流速做出了具 体规定。流速受限的主要原因是用户制备的硅胶盒中的颗粒大小为55|im到 105pm,因此产生了较高压降（1,01/min流速时8 kPa） o 一般来说，这些取样 盒不兼容个人取样设备使用的屯池供屯取样泵（例如，工业卫生学家使用的取样 泵）。I古I体吸附剂取样程序专门用于甲醛的取样和分析。当分析其他醛类和酮类 时，某些同质异构的醛类和酮类可能会被高效液相色谱系统溶解，导致这一方法 受到干扰。任何与甲醛的二硝基苯脐衍生物的保留时间和360nm时的强大吸收 力相同的有机化合物都会产生干扰作用。通过改变分离条件（例如，使用高效液 相色谱的替代柱或者流动

6、相成分），可以克服这种干扰作用。二硝基苯腓（DNPH）试剂产生的甲醛污染是一个常见的问题。二硝基苯月井 应在紫外线级乙膳中通过多次再结晶进行提纯。在40C到60C的温度下，缓慢 蒸发溶剂，实现晶体粒度的最大化，再结晶过程则完成。在使用前，使用高效液 相色谱法测定二硝慕苯胖中拨慕化合物的杂质等级，每取样箱的杂质等级应低于 0,15ggo如果二硝基苯阱镀膜的取样盒在阳光直射下曝光，可能会产生伪影，因此应 避免这种情况根据这种方法，丙烯醛和丁烯醛可能不会获得准确的量化值。这些化合物测 定结果不准确，会导致形成多个衍生物峰值和峰比率的不稳定。二氧化氮能够与二硝基苯脐发牛反应。由于根据高效液相色谱法纵列

7、和参数 的变化，二硝基苯胖衍牛物的保留时间可能会类似于二硝基苯胖的甲醛衍牛物的 保留时间，因此高浓度的二氧化氮（例如，天然气炉灶）可能会产生问题。5安全措施52,4二硝基苯阱在干燥状态下会发生爆炸，因此处理时应极其小心。该物质还 具有毒性（在老鼠身上，LD50 = 654 mg/kg）,已经在一些实验中被证实会发生突 变，而1对眼睛和皮肤产牛刺激。5.2在室温下，浓度低于68%质量浓度的高氯酸是稳定无毒的。但是，当温度高 于16（）C时，就会容易脱水，与酒精、木材、纤维素和其他可氧化材料接触就会 引起爆炸。因此应存放在清凉干燥的地点，只能用于化学物质通风橱，而且应谨 慎操作。6仪器实验室常用仪

8、器，尤其是下列仪器。6.1取样6.1.1取样盒，根据第8条规定，使用硅胶包裹，外涂二硝基苯腓，或者使用商 购产品。取样盒中硅胶的含量至少为350毫克，二硝基苯阱的最低比例为29%的质量 浓度。硅胶床径与硅胶床的比例不得超过1:1.甲醛取样盒的容量至少为75昭，在 1,51/min的速度下，收集效率至少为95%。空白程度很低且高效能的取样盒可以 在市场上买到。备注 我们观察了 1,51/min的取样速度下，用户准备的19kPa容积的取样盒的压 降情况。一些商购预涂膜取样盒的压降更低，这样就可以允许使用屯池供屯的个 人取样泵。6.1.2在0,1/min至0 1,51/min的流速下，空气取样，泵能

9、够真实准确地完成取样工 作。6.1.3流量控制器，质量流量计和质量流量控制器、或者其他计量以及将取样盒的空气流量设置在0,501/min到1,201/min的之间的适当仪器。6.1.4 流 1校准仪，例如转子流量计、肥皂泡流量计或者湿式气体流量计。6.2样品制备 6.2.1取样盒容器，例如带有聚丙烯螺帽的硼硅酸盐玻璃培养管（20 mmxl25mm）,或者其他合适的容器，用于运送镀膜取样盒。622聚乙烯手套，用于处理硅胶取样盒。623运输容器，带有聚乙烯气泡包装或者其他合适填料、顶部磨砂的金属罐（例 如41的容量），或者其他合适的容器，用于运输和缓冲密封的取样盒容器。备注如果合适，带有商购的二硝

10、基苯脐盒子、高温密封带金属薄片内衬的塑料 袋也可以在取样后用于储存二硝基苯胖镀膜的取样盒。6.2.4镀膜盒子支架。使用铝板（0,16 cmx 36 cmx 53 cm）制作、四角设有可调节 脚架的注射器支架。圆孔直径略大于10ml注射器的矩阵（5x9）,从铝板中心对 称钻孔，从而能够成批处理45个取样盒，包括清洁、镀膜和/或样本洗脱等。（见 图3） o 6.2.5取样盒干燥器，例如天然气连接器支架、多标准注射器阳螺纹接头支架（见 图3） o备注只有用户选择自己制作二硝基苯月井涂层的取样盒时，才需要624和625中 的仪器。6.3样本分析6.3.1高效液相色谱法系统，包括：a）带有脱气设备的流动

11、相容器（例如，减压条件下的薄膜）；b）咼压泵；c）喷射阀（25（11或其他适合容积环（loop volume）的自动取样机）；d）C-18倒相（RP）栏（例如，内直径25cmx4,6mm,颗粒大小5pm）；e）360nm运行的紫外线检测器或二极管阵列检测器f）数据系统或者条状记录器。使用等度倒相高效液相色谱法和360nm运行的紫外线吸收检测器，就可以测 定二硝基苯甲醛的衍生物。同样方法也可以用于脱附并分析空白取样器。通 过使用标准溶剂对比保留时间、峰高或波峰面积，就可以测定并量化样木中的甲 醛和其他拨慕化合物。备注1大多数商购的高效液相色谱分析系统也可以用于本方法。备注2柱式加热箱可以用于确定

12、稳定的柱式工作温度坊提高再生能力。6.3.2注射管和吸量管 6.3.2.1高效液相色谱注射器，容量至少为容积环（loop volume）的四倍（详见6.3.1） 6322注射器，容量为10ml,用于制备二硝基苯脐涂层的取样箱（聚丙烯注射管 就可以）。6323注射器配件和塞子，用于将取样盒连接到取样系统，给预制取样盒加盖。6324吸量管，ISO86552，容积式，重复调剂式、容积为0ml到10ml之间。7试剂与材料分析期间，除非另有规定，只能使用认可的分析等级的试剂，例如，最佳品 质级、化学物质分析级或高效液相色谱分析级，蒸憾水、软化水或者同等质量的 水。7.1 2,4-硝基苯腓，使用前至少使用

13、紫外线级乙月青再结晶两次。7.2乙睛，紫外线级（使用前应检测每批溶剂）7.37.4高氯酸，60%的质量浓度,p二1,51 kg儿试剂等级（最佳来源）盐酸，36,5%到38%的质量浓度，p=U9kg/l,试剂等级（最佳来源）7.5盐酸，2mol/l,试剂等级（最佳来源）7.6甲醛，37%质量浓度溶液，试剂等级（最佳来源）7.77.8乙醇或甲醇，高效液相色谱级。7.9醛类和酮类，高纯度，用于二硝基苯脐衍牛物标准的制备（可选择）7.10木炭，颗粒状（最佳来源）7.11氨，高纯度等级（最佳来源）8试剂和取样盒的制备8.1 2,4 二硝基苯腓的提纯二硝基苯脐（DNPH）试剂产生的甲醛污染是一个常见的问题

14、。二硝基苯脐 （7.1）应在紫外线级乙H青（7.2）中通过多次再结晶进行净化。在40C到60C的 温度下，缓慢蒸发溶剂，实现晶体粒度的最大化，再结晶过程则完成。在使用前, 使用高效液相色谱法测定二硝基苯月井中拨基化合物的杂质等级，每取样箱和单独 化合物的杂质等级应低于0,15建。在200毫升乙月青中煮沸多余的二硝基苯月井，时间大约为1小时，制备一份二 硝基苯月井的过饱和溶液。一小时后，取出过饱和溶液并将其倒入热板上的加盖烧 杯内，逐渐冷却到40C到60C。使溶液保持该温度（40C）,直到95%的溶剂蒸 发掉。轻轻倒出溶剂，使用三倍的虚表乙月青，分两次清洗剩余晶体。将晶体放入 另一只干净的烧杯，

15、加入200毫升的乙睛，加热到沸腾，再次使晶体缓慢冷却至 40C到60C,直到95%的溶剂蒸发掉。如上所述重复清洗步骤。取出第二次清 洗的小部分晶体，用乙腊稀释10次，每100毫升二硝基苯月井中加入1毫升的3,8mol/l高氯酸（7.3）,使之酸化，并按照9.3.4部分规定，用二硝基苯腓进行分解。警告一进行本程序试验时，要使用通风良好的罩子，前方放置防爆屏。备注 酸可以催化拨基化合物和二硝基苯脐的反应速度。盐酸、硫酸、磷酸或过 氯酸等大多数强性无机酸都能够达到满意效果。在极少的情况下，盐酸和硫酸会 导致问题。二硝基苯月井的再结晶溶剂中，0,025big/ml的甲醛腺，0,02%质量浓度的二 硝基

16、苯月井都属于合格的杂质等级。如果杂质等级不能用于计划的取样活动，可重复再结晶过程。将提纯的晶体 倒入全玻璃的试剂瓶，加入200毫升乙月青，堵住瓶口，轻轻摇晃，放置一个晚上。 根据9.4.3规定，使用高效液相色谱法分析上层溶剂。如果杂质等级仍不满意， 用洗液器吸取溶剂，然后将25毫升的乙膳倒入提纯的晶体中。使用20毫升的乙 睛春福清洗，直到经过二硝慕苯腓分析，可以确定上层溶剂的杂质级别低到令人 满意为止。如果杂质级别令人满意，另外加入25毫升的乙月青，堵住瓶口，摇晃试剂瓶, 然后放置到一边。提纯晶体上方的饱和溶液是储存的二硝基苯腓试剂。只需保留 足够日常试验操作所需的最少量饱和溶剂即可。这样可以

17、使提纯试剂的浪费降到 最少，对于一些需要更严格纯度的试验，则需要重新清洗晶体，降低杂质等级。 进行任何分析试验时，将饱和的二硝基苯脐储备溶剂倒入干净的吸量管。不要从 试剂瓶中倾倒储备溶液。8.2二硝基苯耕甲醛衍生物的制备在一部分再结晶二硝基苯腓（8.1）中加入足够2mol/l的盐酸（7.5）,获得大 致饱和的溶剂。在该溶剂中加入摩尔质量超过二硝基苯胖的甲醛（7.6）。过滤二 硝基苯月井甲醛的沉淀液，使用2mol/盐酸和水进行清洗并晾干。使用熔点测定法（165C到166C）或者色谱分析法检测二硝基苯月井甲醛衍生物 的纯度。如果杂质等级不合格，使用乙醇再次结晶衍生物（7.8）。重复纯度检测 过程，

18、如有必要则再次进行结晶，直到获得满意的纯度为止（例如，99%的质量浓度)。二硝基苯脐甲醛衍牛物应在冷冻条件下(4C)避光保存。这样至少可以保存6 个月。使用氮(7.9)或者氮储存能够进一步延长衍生物的使用期。附录B给出了几种拨基化合物中二硝基苯脐衍牛物的熔点。对于甲醛和其他拨基化合物(7.7)中适合作为标准规格使用的二硝基苯月井的 衍生物，既可以以纯晶体形式在市场上买到，也可以作为乙購中的单一或混合储 备溶液购买。8.3二硝基苯脐甲醛标准的制备精确称出乙月青的重量，并进行溶解，可以制作出二硝基苯月井甲醛的标准储备 溶液(7.2)。利用标准储备溶液制作校准用标准的混合液。应调整标准混合溶液 中二

19、硝基苯胖甲醛的浓度，以反映出真实样本中的浓度范围。将10毫升的固体衍牛物溶解在100毫升乙月青内，可以得到大约100mg/l的单 一储备溶液。单一储备溶液可以用于制作浓度在0.5gg/ml到20gg/ml之间相关衍 生物的校准用标准溶液，该浓度范围可以满足相关浓度需求。将所有标准溶液储存在盖紧的容器内并放入冰箱，避光保存。使用前使之平 衡到室温。溶液应在四周后替换掉。8.4带有二硝基苯耕涂层的硅胶盒的制备8.4.1概述该程序应在乙醛木底浓度极低的环境下进行。所有玻璃和塑料制品应使用去 离子水和无醛乙膳(7.2)彻底清洗和清洁。实验室空气中接触试剂的次数应减 到最少。接触硅胶盒时，应佩戴聚乙烯手

20、套。8.4.2二硝基苯耕涂料溶液用移液管吸出30毫升的二硝慕苯腓饱和储备溶液，放入1000毫升的量瓶内， 然后加入5()()毫升乙膳(7.2)。使用1()毫升的浓盐酸(7.5)进行酸化。应使用二硝基苯肘涂层的硅胶盒对酸化溶液上方的空气进行过滤，将实验室 空气产生的污染降至最低。摇晃溶液，然后使用乙睛补足溶液体积。堵住烧瓶， 倒置过來并摇晃几次，直到溶液质量均匀为止。将酸化溶液倒入一个容量在0 毫升到10毫升之间、带有容积式分液器的试剂瓶内。填装分液器，缓慢分出10毫升到20毫升溶液。将一份溶液倒入样本瓶内， 根据9.3.4使用二硝基苯腓测定酸化溶液的余质等级。甲醛的朵质等级应V 0,025pg

21、/mlo8.4.3硅胶盒的涂层打开硅胶盒包装，将硅胶盒(6.1.1)的较短一端连接到10毫升注射器，并 按照图3所示放在注射器支架(624)上。使用连续式微量的容积式烧瓶(6.324), 每个注射器内加入10毫升乙月青(7.2)。使液体靠重力流入排水道。使用乙月青替换注射器中的气泡，从而去除任何可能挡在注射器和硅胶盒之间 的气泡。使用含有酸化二硝基苯月井涂层溶液的连续式微量分液器，向硅胶盒内加入7 毫升溶液。一旦硅胶盒出口的表面水流停止，将7毫升的涂膜溶剂加入每个注射 器。使涂膜溶剂依靠重力流过硅胶盒，直到硅胶盒另一端水流停止。使用干净的 纸巾擦去每个硅胶盒出口的多余液体。按照图3b)所示安装

22、干燥管，其中每个出口处(例如，洗涤器或者“防护盒T 有一个预制的二硝基苯阱涂层盒。这些“防护盒”能够清除氮气(7.9)供给时可 能存在的甲醛痕迹。方法如下：根据下文指示烘干几个新涂膜的盒子，并且“牺 牲掉,，这些盒子，确保剩余盒子的纯度，就可以实现这一冃的。将盒子连接器两端张开，0,64 cmx 2,5 cm外直径聚四氟乙烯(PTFE)导管, 内直径略小于盒子出口处的外直径插到洗涤器盒子的较长一端。移除注射器上的盒了，将盒子较短一端连接到已连接到洗涤器盒子的连接器的开 口端。氮气(7.9)以300毫升/分钟到400毫升/分钟的速度通过每个盒子。使用巴 斯德吸管和乙月青，清洗盒子的外表面和出口端

23、。15分钟后，停止氮气流动，清 洗干净盒子外表而的乙睛，取走干燥的盒子。将标准聚丙烯阳注射器塞子（male syringe plug）插入涂膜盒子两端，并将各自置于带有聚丙烯螺丝帽（6.2.1）的硼 硅玻璃培养管内。将序列号和批号标签贴到每个盒子的玻璃储存容器上，在使用前预制盒子应 冷藏保存。在4C的条件下避光保存时，取样盒至少可以保存6个月。9程序9.1样本收集安装取样系统，保证在取样期间，取样泵（6.1.2）能够保持恒定流速。当温 度高于10C时，取样盒（6.1.1）可以安全进行空气取样。如有需要，增加一个 臭氧浊蚀器或洗涤器（详见4.2）o进行取样收集前，检查系统是否存在泄漏。将取样盒入

24、口（较短一端）堵上, 这样取样泵出口端就不会流出溶剂。流量计不应显示出取样仪器中有任何空气通 过。如果取样期间无人看守或者取样时间延长，强烈建议使用大流量控制器 （6.1.3）或者，如果合适，使用补偿式个人取样泵，以保持恒定流量。流量控制 器的设定值应至少比取样盒最大空气流量低20%o备注1硅胶存在于取样盒中两个多细孔过滤筛之间。取样期间，空气流速会随 着前筛上空中悬浮颗粒的沉积而发生变化。当取样颗粒沉积的空气时，气流变化 影响重大。安装好整个系统（包括“虚拟“取样盒），检查流速是否接近理想速度。应保 持0,51/min至U 1,21/min的流速。取样空气中拨基摩尔的总数不应超过二硝基苯脐

25、（2毫克或者0,01 mol/盒；商购预涂膜取样盒为1毫克到2毫克/盒）。一般来说, 样本尺寸应该低于取样盒考虑到干扰因素（详见第4条），甲醛为100聘到200昭 二硝基苯月井质量荷载的75%o 般来说，如果系统是密封的，使用肥皂泡流量计 或者连接到流量出口的校准用湿式气体流量计（6.1.4）都可以进行校准。备注2EN1232ll0J说明，不需要取样泵设有密封的流量系统下游，就可以进行正 确的校准。在取样开始和结束时测量和记录取样的流速，就可以测定样本体积。如果取 样时间超过2个小时，应在取样中期测定流速。使用转子流量计能够观察流速， 而不需要中断取样过程。或者也可以使用直接测量并持续记录流速

26、的取样泵。取样前，从带摩擦顶的金属上或者其他适当容器中取出取样盒容器。使取样盒在 玻璃试管内加热到室温，再连接到取样器上。如果使用商购的预涂膜二硝基苯月井取样盒，在连接到取样器前，也应提前将 取样盒加热到室温。使用聚乙烯手套(6.2.2)取出注射器塞子，使用注射器适配器将取样盒连接 到取样系统上。将取样盒连接到取样器上，这样较短一端就可以变成取样入口。 如果使用商购的预涂膜二硝基苯月井取样盒，应遵循制造商的指示。一些商购取样 器可能是密封玻璃试管。这种情况下，使用试管破碎机打破取样盒两端。使用较 小流量的吸附剂把一端插到取样器上，连接取样盒，这样较大流量的吸附剂就位 于进气口了。处理破碎一端时

27、应加以小心。打开取样机，将流速调节到理想速度。前后两个取样盒中的典型流速分别是 1,01/min和0,81/min。取样机按照所需的时间运行。定期记录取样时的变化。如果取样期间的环境气温低于10C,应提高取样盒的保存温度。经过观察，在 各种天气条件下寒冷、湿润和干燥的冬季，以及炎热潮湿的夏季，相对湿度 不会对取样产牛重大影响。取样结束时，在流动停止前测定流速。如果取样开始和结束时的流速差异超 过1()%,应将取样标记为怀疑。如果通过计算，需要将浓度变换到标准条件(温度和压力)，应在取样期间 测定温度和压力。取样完成后，应立即从取样系统中取岀取样盒(使用聚乙烯手套)，使用原 配的端部螺塞盖上，放

28、回原来已贴标签的容器内。使用聚四氟乙烯胶带密封，放 入内有2厘米到5厘米高度木炭颗粒（7.10）的顶部摩擦罐子（6.2.3）或者另一 带有适当垫料的合适容器内。在适当情况下，可高温密封的带金属片内衬塑料袋 也可以用于储存曝光的取样盒。在分析前，应冷冻曝光的取样盒。分析前的冷冻 时间不应超过30天。如果需要将样本运输到中心检验室进行分析，应将非冷冻时间降到最低，最 好少于两天。按照下列公式（1）计算样本平均流速：n其中：可厂指的是平均流速，单位：毫升/分钟；2指的是取样开始时、结束时和中间时测定的流速n指的是平均次数然后，使用公式（2）计算总流量：（r2-ri）x?r1 000其中，指的是在测定

29、温度和压力下进行取样时的总体积，单位：公升；耳指的是停止时间；指的是开始时间；2 一 H指的是取样总时间，单位：分钟；血指的是平均流速，单位：毫升/分钟；9.2处理空白在每批样本中，至少分析一个现场空白。如果一组的数量超过10个样本， 至少10%的分析样木应为现场空白。应记录一组或者一个时间段内的样木数量, 或者二者同时记录，这样就可以获得给定数量的空气样本中现场空白的比例。除 了取样盒无空气取出的情况外，现场空白应与样本进行同样的处理。处理空白时 应符合9.1条提出的性能标准。为了区分可能出现的现场和实验室污染，分析实 验室（实验室空白）保留的空白取样盒也是可取的。9.3样本分析931样本制

30、备将样木装入带有2厘米到5厘米木炭颗粒（7.10）的外部容器内，送回实验 室，在分析前保存在冰箱里。或者，样本也可以单独储存在各自容器内。取样和 分析的时间差不应超过30天。9.3.2样本去吸附将取样盒（取样时的入口或者较短一端）连接到干净的注射器。为了防止不可溶解的颗粒进入洗出液，去吸附期间的液体流动方向应该与取 样期间的气流方向一致。如果高效液相色谱法分析之前已经过滤了洗出液，则可 以进行反方向的去吸附。每批样本都应分析过滤的空白提取物，确认过滤器没有 引入污染。将取样盒和注射器放置在注射器支架上。使用注射器中5毫升的乙惰（7.2） 通过取样盒，注射到有刻度的试管或者5毫升的容量瓶，去掉二

31、硝基苯脐衍牛物 中的拨基和取样盒中未反应的二硝基苯腓。根据取样盒的情况，也可以使用其他 体积的乙睛。备注干取样盒中的乙膳持有量应略大于1毫升。由于取样盒过滤器和注射器适 配器尖端之间能够阻截空气，在注射器中的乙月青彻底倒入取样盒之前，可以停止 洗出液的流动。如果发牛这种情况，使用一次性的长头巴斯德吸管，用注射器中 的乙月青替换掉阻截的空气。将乙膳添加到5毫升的刻度线。给烧瓶贴上样本标识。使用聚四氟乙烯内衬 的隔膜，使用吸管将一份乙月青吸入样木瓶。使用高效液相色谱法分析一份乙月青。作为备份，保留第二份乙月青并储存在冰箱内，直到第一份分析结果得出并证实有 效。如有必要，第二份乙月青可以用于证实性分

32、析。对于含有两个吸附剂垫层的玻璃密封二硝基苯肘采样管，打开离第二层吸附 剂（出口端）最近的试管一头。小心取出带有吸附剂垫层的玻璃棉的弹簧（卡环） 和塞子。把吸附剂倒入带有聚四氟乙烯内衬隔膜或者盖子的干净的4毫升玻璃试 管内。贴上备用样本标识。仔细取下玻璃棉的下一个塞子，将剩余的吸附剂倒入 另一4毫升容量的烧瓶，并标记为首要取样部分。小心用移液管吸出3毫升的乙 月青并注入每个烧瓶，每个烧瓶并盖上盖子，偶尔摇晃瓶子，使之站立30分钟。9.3.3高效液相色谱法校准制定二硝基苯胖甲醛衍生物中乙睛（7.2）的校准标准（详见8.3）扌巴10毫 克的固体衍生物溶解在10（）毫升的流动相内，得到10（）毫升的

33、单独储备溶液。每个校准标准（至少5个等级）都分别分析两次，将注入物质的而积响应做 成表格（或者，更方便的方法是，与注入的二硝基苯月井甲醛相对，固定循环容 积；详见图4和图5） o按照934的样本分析方法操作所有流量的校准。为了 避免出现滞后效应，从较低浓度开始操作。使用紫外线检测器或者二极管阵列检 测器，每25川的注射量能够得到大约0,05gg/ml到20昭/ml的线性响应范围。如 图6所示，该结果可以用于制作校准曲线。数据（浓度VS面积响应）的线性最 小二乘法拟合的相关系数至少为0,999时，可以发生线性响应。每种分析物的保 留时间应一致在2%以内。一旦记录了线性响应，接近每种成分预计等级的

34、中间浓度标准，至少是检测 范围的1（）倍，应作为口常校准标准。各种成分的口常响应应在lMg/ml或者更多 被测物浓度的10%以内，低于接近0,5gg/ml被测物浓度的20%。如果观察到更 高的浮动范围，按照新的标准重新校准或者制作新的校准曲线。9.3.4利用高效液相色谱法分析甲醛按照9.3.3装配高效液相色谱法系统并进行校准。下文给出了标准操作参数。研究人员发现了十八烷基硅烷柱式（100毫米X5毫米内直径，10pm颗粒，） 的流动相中含有7（）%体积分数（volume fraction）甲醇+ 30%体积分数的水混合液，这能够为二硝基苯腓甲醛和可能出现的其他干扰化合物提供充分的解析度。可以采用

35、坡度或等度洗脱计划（详见ISO 16000-4） 0或者，实验证明，含有60%体积分数乙H青+40%体积分数水混合液的等度流 动相也能够满足此需要。参数如下：色谱柱C-18 （4,6毫米内直径x25厘米，或者相等）；如有需要，可以使用柱式加热 炉获得更加准确的温度控制。流动相60%的体积分数乙睛+40%的体积分数水，等度，批量温度40C检测器紫外线，360nm下运行流速1,0 ml/min保留时间018柱的甲醛保留7分钟，两个C18柱的甲醛保留13分钟样本注射量25 pl每次分析前，检查检测器的基线，保证检测条件的稳定性。将600毫升乙膳和400毫升的水混合，或者将参数设置为适当的梯度洗脱高

36、效液相色谱，制作高效液相色谱法的流动相。使用0,22屮n聚酯膜滤器将上述混 合液过滤到全玻璃或聚四氟乙烯抽吸过滤仪器内。，使用氨（7.11）清洗过滤后 的流动相1（）分钟到15分钟（100毫升/分钟）,或者在带有表面玻璃盖子的锥形 烧瓶内加热到60C并持续5分钟到10分钟，完成过滤后流动相的脱气。检测器 后而应放置一个恒定反压限制器（350kPa）或者0,25毫米内直径的聚四氟乙烯 装管的短尺（15到3（）厘米），减少流动相的进一步脱气。备注1除了氨清洗或加热进行流动相（乙月青与水的混合液）的脱气之外，实验 室常用的方法是在减压情况下，通过薄膜进行超声波脱气或者在线脱气。将流动相放入高效液相色

37、谱法的溶剂储存器内，将取样泵流速设定为1,0毫 升/分钟。批次温度设定为40Co在第一次分析前，取样泵工作2（）到30分钟。 第一次分析前，检测器至少工作30分钟。检测器结果显示在条状记录器或者类 似的结果展示设备上。如果使用人工注射系统，至少将loom样本注入清洁的高效液相色谱法注射 器内。使用注射器将多余的样木加入高效液相色谱环内（阀门荷载位置）。打开 阀门调到“注射”位置，开始运行。同时使用注射剂激活数据系统，在条状记录器 上标记注射点。大约1分钟后，将注射阀调回到荷载位置，使用乙精与水的混合 液清洗或冲洗注射器和阀门，为下一次样本分析做好准备。当阀门处于“注射位置时，不要通过高效液相色谱环注射溶剂。二硝基苯耕甲醛衍生物（图4）洗脱完成后，终止数据采集进程，按照第10 条规定计算化合物的浓度。获得稳定的基线后，如前文所述，系统可以用于进一 步取样分析。备注2几次取样盒分析后，使用几个100%体积分数乙睛的圆柱冲洗圆柱上的组 合（如有表示，例如，每次运行提高压力到给定流量和溶剂成分）。如果使