6、培养基灌装ppt课件.ppt

1、无菌工艺模拟试验 诺华疫苗 XXX,内容,培养基灌装的技术要求 培养基灌装实施要点 结果解释和偏差调查,2,无菌工艺模拟试验定义,无菌工艺模拟试验 Process Simulation Testing （PST） 培养基灌装 Media Fill 采用培养基代替药品进行无菌灌装对无菌工艺进行验证。此模拟工艺称之为“培养基灌装”,3,进行培养基灌装的目的,验证一个无菌工艺 对无菌工艺过程无菌保证水平的综合评估（ 设备、人员、操作、灭菌过程、环境） 对无菌操作人员进行资格确认 确认进行重大变更后对无菌工艺的影响 作为问题调查的手段,4,培养基灌装测试的频率,初始验证：每班次连续做3批验证 随后每半

2、年针对不同班次/工艺进行一次再验证 所有日常操作人员每年都必须参加一次培养基灌装验证 空气净化系统、设备、生产工艺及人员重大变更后，应当重复进行培养基模拟灌装试验 偏差调查的手段,5,培养基灌装测试的频率,影响无菌灌装过程中无菌保证水平的重大变更需要进行培养基灌装 判断： 灌装层流改造 胶塞进料装置变更 终端无菌过滤器改变位置 灭菌程序变更,6,培养基灌装批量,培养基灌装容器的数量应当足以保证评价的有效性。批量较小的产品，培养基灌装的数量应当至少等于产品的批量 批次量5000瓶，通常500010000瓶 手工灌装 VS 隔离器无菌生产工艺 跨班次生产，大批量生产,7,灌装数量,例1：某冻干产品

3、，冻干机容量为30,000瓶，分布在九个层板上，请问：较合理的一次培养基灌装数量为多少？如是初始验证，如何考虑不同层板的分布？,例2：某冻干产品为人工灌装，共有三个操作人员具有无菌灌装资格，批量为3000瓶，请问：此种情况较为合理的一次培养基灌装数量为多少？,8,生产线运行速度,高速运行比较适用于评估需要频繁干扰操作的生产工艺或手工操作多的生产工艺， 低速运行则一般适用于评估无菌产品、容器/胶塞在无菌区暴露时间比较长的工艺。,9,灌装速度、瓶子尺寸、灌装量,几个原则 速度慢，产品暴露时间长；速度快，有时造成较多的干扰 瓶子大（包括敞口大小），灌装速度慢 尽量按产品实际灌装体积，如不可行，体积应

4、能充分接触所有表面、并足够支持微生物生长 举例： 多规格的瓶子 - 最慢的速度，最大的瓶子规格;最小的瓶子规格，最快的速度 单一规格的瓶子 正常或略慢速度,10,11,最长允许的灌装时间（如考察操作人员疲劳操作风险） 有代表性的正常性操作活动的数量、种类和复杂性，非常规的干扰和各类突发事件（如维修、灌装中断等） 冻干过程 无菌设备的装配,最差条件挑战,12,人员数量及其活动，换班，休息，更衣等 具有代表性数量的无菌操作（如添加容器，密封件，无菌原料成分）或者转移 设备无菌连接和拆卸 样品的无菌收集 生产线速度和模具的规格 各个工艺步骤的最长持续时间挑战,最差条件挑战,13,应当根据产品的剂型、

5、培养基的选择性、澄清度、浓度和灭菌的适用性选择培养基 TSB或FTM （澄清） 某些情况下应该考虑使用厌氧性培养基 应该进行促菌生长实验 标准菌株 环境分离菌,培养基选择,14,应当根据产品的剂型、培养基的选择性、澄清度、浓度和灭菌的适用性选择培养基 TSB或FTM （澄清） 某些情况下应该考虑使用厌氧性培养基 应该进行促菌生长实验 标准菌株 环境分离菌,培养基选择,15,在20-25条件下培养7天(培养真菌) ，30-35下 7天 (培养细菌) 确保其内壁和瓶塞充分接触培养基 培养基促生长试验 应由有资质的人员进行检查 无缺损的瓶均应该培养，任何不作培养的瓶子都应说明不作培养的原因 要进行物

6、料平衡计算,培养及读数,培养基灌装的先决条件,洁净室/设备的验证状态确认 经过重大维修或变更后进行了生产线的运行确认或性能确认 参与培养基灌装的人员接受了培训 无菌操作 洁净室行为 培养基灌装方案 明文规定的工艺过程及最差条件,16,培养基灌装方案设计,分析工艺流程，确定风险因素 绘制流程图 通过分析确定可能造成产品污染的风险因素,灌装时间 干扰活动（时间、次数、种类包括停机、维修、调整） 冻干过程 设备装配（如灌装前的装机） 人员数量及其活动 无菌操作（如各种无菌部件操作、产品转移）,不同班次轮换，着装更换 生产中出现的无菌管道连接 无菌样品取样 灌装速度 重量检查 容器密闭性（大小、种类、

7、与设备匹配程度 ） 某些特殊操作（如进行清洁前的操作）,17,灌装过程流程图,灌装部件装配,管道 排液,正式 灌装,灌装量检查,添加胶塞,处理倒瓶,人员进出,班次轮换,设置灌装参数,停机维修,环境监测,收集 转移,冻干 压塞,暂存 压盖,人员操作 人员操作 时间 时间,风险因素,灌装速度 灌装时间长短 干扰操作及次数 人员数量 停机操作,转移操作 时间 暂存位置时间 时间,18,干扰操作,种类：任何进入百级层流的操作都为干扰操作，应包括所有类型的干扰操作 ， 常规的（灌装线装配，称量调节，加胶塞，处理倒瓶，取样，环境监测） 非常规的（设备故障，灌装线堵塞，轨道调节，拆卸/替换破损的部件） 数量

8、：干扰的次数应该不少于正常生产时发生的次数,19,人员,人数：模拟无菌区可能容纳最多的人数 活动：最多换班次数，不同时间段（日班和中夜班），进行正常操作 频率：无菌区工作人员至少每年参与一次成功的培养基灌装,20,环境监控和微生物限度控制,制定环境监测计划，综合形成书面方案 如何制定环境监测计划 其他一些因素的考虑 方案的批准 制定培养基灌装过程的微生物负荷的监控计划, 便于偏差调查,21,环境监控方案,应用风险评估的方法确定关键监控点 给产品构成最大风险的位置，如产品暴露位置、直接接触表面 人员 按实际需要选择合适的监测方法 空气浮游菌 沉降菌 接触碟/棉签法 合理制定控制标准 体现全面监控

9、、动态监控,22,风险点 - 产品暴露区域 瓶子裸露区 灌装站区域 胶塞裸露区,至冻干机,23,例如： 在左、中、右各设置一个连续粒子监测点 在灌装站左右设置两个浮游菌取样点 在左、中、右各设置一个沉降菌取样点 在轨道、灌装针头、胶塞盘各处设置多个表面取样点 可以参考ISO14644,24,25,文件记录： 过程控制检测和实验室检测结果 环境和人员监测结果 设备功能（批报警记录，过滤器完整性测试） 人员干扰操作、偏差、中断等 - 发生时间和持续时间 培养基报废记录 生产线清场记录 过程录像,培养基灌装过程记录,26,无菌生产区域 管道系统 冻干机 过程中的微生物泄露 培养基的撤出和报废 应当采

10、取措施保证验证不能对生产造成不良影响,培养基灌装结束后的清场和清洗,抑菌影响分析-物料准备，储存过程,抑菌因素影响分析,27,抑菌影响分析-灌装,抑菌因素影响分析,28,抑菌影响分析-中间过程,抑菌因素影响分析,29,抑菌影响分析-冻干,抑菌因素影响分析,30,培养基灌装的接受标准,培养基模拟试验的目标是不出现长菌，且遵循以下原则： 灌装少于5000支时，不应检出污染品； 2. 灌装在5000至10000时： (1) 有1支污染需进行调查，并考虑重复培养基灌装试验 (2) 2支污染需进行调查，并可即视作再验证的理由 3. 灌装超过10000支时： (1) 1支污染需进行调查 (2) 2支污染需

11、进行调查，并可即视作再验证的理由 4. 发生任何微生物污染时，均应进行调查。,31,培养结果阳性调查,当培养基灌装出现阳性结果时，不管是否符合合格标准，都必须进行调查，科学评估工艺的可靠性以及上市产品可能存在的风险。 发现任何阳性结果样品均属应进行调查。分离到的微生物应鉴别到种。调查过程中应详细分析可能的产生阳性结果的原因。 对于超出标准的结果，应当在调查清楚原因后再次进行培养基灌装。,32,培养结果阳性调查,如果未达到接受标准: 生产需要被暂停。在工艺重新确认前的产品不得放行。 在培养基灌装之后生产的到下一次成功的培养基灌装之间的产品都需要被进行回顾，评估其无菌失败的风险。 在该次培养基灌装

12、和上一次成功的培养基灌装之间的产品也需要被进行回顾，评估其无菌失败的风险。 必要时，需制定纠偏和预防性措施，并进行工艺的重新确认。,33,污染调查举例,发现污染瓶的调查应该从人、机、料、法、环各个方面进行调查。 （1）生产环境监测数据（粒子、浮游菌、沉降碟等） （2）对人员的监测结果 （3）高效过滤器的完整性检测数据 （4）层流台性能数据（气流流速、压差记录等） （5）生产房间监控数据（空气流向、工作台面气流方向速度） （6）人员培训情况，操作资质和能力 （7）干扰模拟的执行情况 （8）无菌室生产用具和其他相关物品的储存情况,34,污染调查举例,（9）微生物鉴定结果，至少要鉴定到属。有条件的话

13、可以鉴定到种以帮助确定来源 （10）清洁消毒流程的执行情况 （11）设备仪器的校验结果 （12）生产前后产品过滤器的泄露测试数据 （13）生产过程发生的偏差 （14）设备的CIP/SIP的情况 （15）培养基的培养研究 （16）生产线和培养基的历史数据分析,35,污染调查举例,根据调查分析确定可能引起污染的原因，针对性制定有效措施。 所有调查行动、改进措施和结果都应当形成正式文件记录。,36,培养基灌装失效,培养基灌装试验结果被认作无效的情况不应该频繁发生， 更不能直接将失败的培养基灌装结果视为无效 在符合明确的书面规程要求的情况下才能做出试验无效的判定，此时，应给出支持文件并充分说明理由，并且在实际生产中遇到类似情况时也应同样处理。 失效= 无测试 注意: 如果不可接受的情况发生，最